直腸癌患者外周血及腫瘤組織XKRX基因表達及臨床意義

潘華，陳玉星，牛萍

（南陽市第一人民醫院，河南 南陽473000）

結直腸癌具有發病率高和高死亡率的特點,是常見的惡性腫瘤之一，發病率逐年升高，患者預后性較差，臨床治療上沒有顯著的進展[1]。 因此，迫切需要對直腸癌的發病機制進行研究， 以期尋找到方便有效的診斷和干預指標， 這有助于結直腸癌患者治愈率和死亡率的提高[2]。 在之前的工作中，我們從大分子數據庫中篩選出了在結腸癌細胞中高表達的XKRX 基因， 為進行下一步的研究工作做準備。 XKRX 在胎盤和腎上腺中均有表達，屬于XK 基因家族[3]。 Xk 位于在紅細胞上，是在XK/Kell血型系統中的膜轉運蛋白， 與Kell 蛋白通過二硫鍵連接[4]。Kell 是一種與內皮素-3 轉化酶活性相關的ⅱ型膜多糖蛋白，可以表達多種不同的抗原。 目前，國內外對XKRX 與腫瘤的研究很少。 本次研究選取2018 年1 月至2019 年3 月在我院治療的直腸癌患者110 例， 探討直腸癌患者外周血及腫瘤組織XKRX 基因表達及臨床意義。 現有報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018 年1 月至2019 年3 月在我院治療的直腸癌患者110 例 （直腸癌組），納入標準：（1）均經病理學確診；（2）在我院行手術切除；（3）年齡＞18 歲；（4）患者及家屬知情同意。排除標準：（1）術前行放化療等抗腫瘤治療；（2）合并有其他系統惡性腫瘤。 同時選取健康志愿者60 例作為對照組， 直腸癌組和對照組一般資料比較差異無統計學意義（P＞0.05），見表1。

表1 直腸癌組和對照組一般資料比較

1.2 實驗方法 RT-PCR 檢測： 將少量組織樣本切碎放入1.5 mL ep 管， 加入TRIZol 試劑提取總RNA，逆轉錄合成cDNA，使用Mx3000P 定量PCR儀進行檢測。使用Primer 5.0 軟件設計XKRX 引物XKRX -F：GGCACTGAACTGAATCCCCT; XKRX -R：CAGGGTGTAGCCGATCTGTC， 管家基因GAPD HGAPDH -F：CCATCAATGACCCCTTCATTGACC;GAPDH-R：GAAGGCCATGC-CAGTGAGCTTCC 作為對照。 重復3 次。

1.3 統計學處理 統計分析采用SPSS 22.0 軟件，計量資料采用（±s)表示，比較使用t 檢驗，計數資料比較使用χ2檢驗， 相關性采用Pearson 相關分析，P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 直腸癌組和對照組外周血XKRK mRNA 相對表達量比較 直腸癌組外周血XKRK mRNA 相對表量明顯高于對照組，差異比較有統計學意義（P＜0.05），見表2、圖1。

表2 直腸癌組和對照組外周血XKRK mRNA 相對表達量比較

圖1 直腸癌組和對照組外周血XKRK mRNA 相對表達量分布圖

2.2 直腸癌和癌旁組織XKRK mRNA 相對表達量比較 直腸癌組織XKRK mRNA 相對表量明顯高于癌旁組織，差異比較有統計學意義（P＜0.05），見表3、圖2。

表3 直腸癌組織和癌旁組織XKRK mRNA 相對表達量比較

圖2 直腸癌和癌旁組織XKRK mRNA 相對表達量分布圖

2.3 外周血XKRK mRNA 相對表達量與臨床病理特征關系 Dukes 分期Ⅲ～Ⅳ、腫瘤直徑＞5 cm 患者外周血XKRK mRNA 相對表達量明顯高于Dukes分期Ⅰ～Ⅱ、腫瘤直徑≤5 cm 患者（P＜0.05）。 見表4。

表4 外周血XKRK mRNA 相對表達量與臨床病理特征關系

2.4 腫瘤組織XKRK mRNA 相對表達量與臨床病理特征關系 Dukes 分期Ⅲ～Ⅳ、腫瘤直徑＞5 cm 患者腫瘤組織XKRK mRNA 相對表達量明顯高于Dukes 分期Ⅰ～Ⅱ、腫瘤直徑≤5 cm 患者（P＜0.05）。見表5。

表5 腫瘤組織XKRK mRNA 相對表達量與臨床病理特征關系

2.5 相關性分析 將外周血和腫瘤組織XKRK mRNA 相對表達量進行相關分析，結果顯示：外周血和腫瘤組織XKRK mRNA 相對表達量呈正相關（r=0.633，P＜0.05）。

3 討論

直腸癌是最常見的惡性腫瘤之一,發病率和死亡率急劇上升。 研究證實，腫瘤的發生和發展與多種因素有關，是由多步驟、多基因突變引起的疾病[5]。 以往的研究表明，基因在結直腸癌的發生、發展和預后中起著重要作用[6]。 探索癌癥發生發展的機制，篩選診斷和治療的分子靶點，對直腸癌患者的輔助診斷和指導用藥具有重要的臨床意義。

直腸癌是消化系統常見的惡性腫瘤,它的發生和發展也有明顯的幾個階段[7]。 首先是腺癌和原位癌通常由正常上皮非典型增生形成， 最后浸潤和遠處轉移。 隨著分子生物學的發展，直腸癌的研究已經達到分子水平[8-10]。 一些學者發現結腸直腸癌是由各種遺傳變異引起的。 目前，大腸癌有四種公認的分子途徑: 抗原呈遞細胞-β-連環蛋白-Tcf-Myc 途徑；HNPCC 途徑； 潰瘍性結腸炎-非典型細胞增殖-癌癥途徑；基因過度甲基化導致雌激素失活[11]。 對結直腸癌的發生發展過程的研究，尋找簡便有效的觀察和干預指標， 對于結直腸癌患者治愈率和死亡率的提高具有重要的科學意義。.因此，在之前的工作中， 我們從數據庫中篩選出在結直腸癌中高表達的XKRX 基因， 并開展了下一步的研究工作[12]。 XKRX 是XK 家族的一員，Xk 家族中成員xkr4，xkr8 和xkr9 主要在誘導細胞凋亡的過程中發揮重要的作用， 其作用機制是暴露出細胞中的磷脂絲氨酸， 隨后磷脂絲氨酸被巨噬細胞吞噬[13-14]。 據報道， XK 基因缺乏的男性患有遲發性神經細胞增多癥，稱為McLeod 綜合征，臨床表現為中樞神經系統，神經肌肉和血液學功能異常，目前關于XKRX 基因表達與細胞凋亡和惡性疾病發生之前的關系還沒有得到證實[15]。

本次研究結果顯示， 直腸癌組和對照組外周血XKRK mRNA 相對表達量比較， 直腸癌組外周血XKRK mRNA 相對表量明顯高于對照組， 差異比較有統計學意義。 說明，XKRX 可能發揮原癌基因的作用，影響結直腸癌的惡性進展。 直腸癌和癌旁組織XKRK mRNA 相對表達量比較， 直腸癌組織XKRK mRNA 相對表量明顯高于癌旁組織。 說明XKRX 在結直腸癌患者癌組織中表達上調，這為進一步研究XKRX 在結直腸癌中的作用和機制奠定了基礎。 外周血XKRK mRNA 相對表達量與臨床病理特征關系，Dukes 分期Ⅲ～Ⅳ、腫瘤直徑＞5 cm 患者外周血和腫瘤組織XKRK mRNA 相對表達量均明顯高于Dukes 分期Ⅰ～Ⅱ、 腫瘤直徑≤5 cm 患者[16]。 結果提示XKRK mRNA 的表達促進了結直腸癌的發生發展，有助于直腸癌的惡性轉化。在一定程度上，XKRK mRNA 可能影響結直腸癌的發生和發展。 將外周血和腫瘤組織XKRK mRNA相對表達量進行相關分析，結果顯示：外周血和腫瘤組織XKRK mRNA 相對表達量呈正相關。 提示XKRK 的表達與患者外周血和腫瘤組織的發生密切相關，是一種重要的致癌基因，可作為評估直腸癌患者預后的重要指標。

結直腸癌組織中XKRX 基因的表達水平升高，不同病理分化程度的表達存在差異。 XKRX 基因可能參與結直腸癌的發展， 并可能影響癌細胞的遷移能力，這可能成為治療結直腸癌的新靶點。因此，XKRX 基因表達的檢測對結直腸癌的診斷，治療和預后具有一定的臨床意義。

綜上所述， 直腸癌患者外周血及腫瘤組織XKRX 基因表達上調，與Dukes 分期、腫瘤直徑有關，值得進一步研究。