HycuNPV與BT復配防治美國白蛾林間藥效分析

張文穎　閔浩　吳勝兵　張新華　夏庭君　閔水發

摘要：為了探索生物藥劑對美國白蛾的防效，本試驗選用HycuNPV與BT復配，在湖北大悟縣開展美國白蛾幼蟲噴霧防治試驗，結果表明：用單一HycuNPV防治第一代美國白蛾幼蟲施藥7、10、13 d后校正死亡率分別為26.71%、67.96%、99.88%。用單一HycuNPV防治第三代美國白蛾幼蟲施藥7、10、13、15 d后校正死亡率分別為17.30%、40.67%、80.33%、91.67%。HycuNPV與BT復配防治美國白蛾第一代幼蟲施藥7、10、13 d后校正死亡率分別為66%、95.44%、99.88%。HycuNPV與BT復配防治美國白蛾第三代幼蟲施藥7、10、13、15 d后校正死亡率為43.33%、76.67%、91.33%、96%。均說明HycuNPV與BT復配致死速度快，明顯快于單一HycuNPV。防治第一代與第三代美國白蛾幼蟲試驗結果一致，但防治第一代效果更好。HycuNPV與BT復配，增效作用明顯，還可顯著降低防治成本。

關鍵詞：美國白蛾核型多角體病毒;蘇云金桿菌;復配;美國白蛾;林間藥效

中圖分類號：S435文獻標識碼：A文章編號：1004-3020（2022）03-0017-05

Analysis of Forest Efficacy of Re-Compounded with HycuNPV and Bacillus thuringiensis?on Control of Hyphantria cunea

Zhang Wenying Min Hao Wu Shengbing Zhang Xinhua Xia Tingjun Min Shuifa

（1. Hubei Ecological Engineering CollegeWuhan430200;

2. Wuhan Chutian Luyi Ecological Technology Co.， Ltd.Wuhan430223;

3. Forest Pest Control Station of Dawu County Forestry BreauXiaogan432800）

Abstract：In order to explore the effectiveness of biological agents on Hyphantria cunea， HycuNPV and BT were used in Dawu County of Hubei Province. The results showed that the adjusted mortality rate was 26.71% after 7 days， 67.96% after 10 days and 99.88% after 13 days.The adjusted mortality rate of controlling third-generation H.cunea?larvae administration with a single HycuNPV was 17.30% after 7 days ，40.67% after 10 days， 80.33% after 13 days， and 91.67% after 15 days.Combination of HycuNPV with BT had an adjusted mortality of controlling first-generation was 66% after 7 days，95.44% after 10 days， and 99.88% after 13 days.Combination of HycuNPV with BT had an adjusted mortality of controlling third-generation 43.33% after 7 days，76.67% after 10 days， 91.33% after 13 days， and 96% after 15 days.All indicate that the combination of HycuNPV and BT is faster and significantly faster than a single HycuNPV.The results of the first generation and the third generation of H.cunea?larvae were consistent， but the first generation was better.The combination of HycuNPV and BT has obvious synergistic effect and can also significantly reduce the prevention and control cost.

Key words：HycuNPV;Bacillus thuringiensis?;Re-compounded;Hyphantria cunea;forest efficacy

美國白蛾Hyphantria cunea是最嚴重的外來入侵有害生物之一，具有食性復雜、寄主廣泛、危害嚴重、繁殖力強、傳播途徑廣等特點，危害的農林作物品種達300多種，對園林樹木、經濟林、行道樹、農田防護林、農村居民房前屋后零星樹木等造成嚴重的危害。湖北省內于2016年在孝感市大悟縣、安陸市等地首次發現美國白蛾，對湖北省農林業生產和生態安全構成嚴重威脅[1]。

美國白蛾核型多角體病毒HycuNPV侵入蟲體后在害蟲細胞核內發育增殖，產生病毒多角體，使害蟲致死。蘇云金桿菌Bacillus thruingiensis（簡稱 BT）是一種芽孢桿菌，主要活性成分是殺蟲晶體蛋白，又稱δ-內毒素，引起敗血癥。近年來，我國在美國白蛾生物防治中大力推廣應用核型多角體病毒和蘇云金桿菌，均取得了一定的成效。但兩種生物制劑又有各自的缺陷：BT相對于病毒，具有殺蟲譜寬，殺蟲速度快，但易產生抗性;核型多角體病毒殺蟲專一，效果好，但殺蟲速度慢[2]。已有研究證明，病毒與BT混用具有增效作用[3]。病毒與BT復配防治美國白蛾的研究在湖北省還是空白，開展HycuNPV與BT復配防治美國白蛾的試驗，可為湖北省大面積實施美國白蛾生物防治提供技術支撐。

1試驗材料與方法

1.1試驗地概況

試驗地設在孝感市大悟縣高店鄉忠河村徐家塝，試驗地周圍水源充足，樹木長勢旺盛。試驗前調查被美國白蛾危害的楓楊Pterocarya stenoptera、桑樹Morus alba、山櫻花Prunus serrulata、三球懸鈴木Platanus orientalis等闊葉樹，有蟲株率5%～10%，蟲口密度5 00～1 500頭·株，以2～3齡幼蟲為主，屬于輕中度危害。選擇楓楊林作為試驗樣樹，樹齡3～4 a，樹高3～5 m，郁閉度0.6～0.7。

1.2材料

供試藥劑為美國白蛾核型多角體病毒（HycuNPV）（原液2.5×10 OBs·mL），由中國林業科學研究院森林生態環境與保護研究所提供;蘇云金桿菌（BT 16 000 IU·mg），由湖北康欣生物科技有限公司生產。施藥器械為手持式小型噴霧器。

1.3試驗方法

1.3.1單一HycuNPV林間藥效試驗

林間藥效試驗分別于2021年6月2～16日美國白蛾第一代幼蟲危害期、9月2～16日美國白蛾第三代幼蟲危害期進行。選取每2～3枝楓楊50 cm延長枝作為1個樣本，每個樣本接入2～3齡幼蟲100頭。選用單一HycuNPV（含量2.5×10 OBs·mL）兌水稀釋100倍，試驗濃度為2.5×10 OBs·mL（該濃度由研制單位篩選確定），采取小型噴霧器噴霧，至葉面浸濕為止，重復3次，并以清水噴霧作為對照。在施藥前對樣本進行編號，記錄施藥前活蟲數，施藥后，將樣本用尼龍網罩住。施藥后5、7、10、13、15 d觀察記錄美國白蛾死亡數、活蟲數。將結果進行方差分析和新復極差法多重比較，確定最佳藥效。

1.3.2HycuNPV與BT復配防治試驗

將BT （16 000 IU·mg）2.5 g 加入到HycuNPV原液（ 2.5×10 OBs·mL）10 mL中，再稀釋800倍，則噴灑時復配藥劑濃度HycuNPV 3.125×10? OBs·mL與BT 5×10 IU·mg，按照單一HycuNPV藥效試驗相同的方法，接入2～3齡美國白蛾幼蟲100頭，施藥后5、7、10、13、15 d觀察記錄美國白蛾死亡數、活蟲數，分析防治效果，判斷BT對HycuNPV的增效作用。

蟲口減退率（%）=處理前活蟲數-處理后活蟲數/處理前活蟲數×100%;

校正死亡率（%）=處理蟲口減退率-對照蟲口減退率/1-對照蟲口減退率×100%。

2結果與分析

2.1單一HycuNPV林間藥效分析

采用單一HycuNPV防治第一代美國白蛾幼蟲施藥后7、10、13 d校正死亡率分別為28.71%、67.96%、99.88%，可見施藥10 d后幼蟲死亡率達到65%以上，13 d后幼蟲死亡率逐漸達到高峰期（表1），這與張文穎等試驗結果一致[5]。用單一HycuNPV防治第三代美國白蛾幼蟲施藥后7、10、13、15 d校正死亡率分別為17.3%、40.67%、80.33%、91.67%，可見施藥15 d后幼蟲校正死亡率達高峰期（表2），但防治效果與第一代相比，施藥后7、10、13、15 d校正死亡率均較低。

2.2HycuNPV與BT復配林間藥效分析

從表1可知，HycuNPV與BT復配防治第一代美國白蛾幼蟲施藥后7、10、13 d校正死亡率分別為66%、95.44%、99.88%。說明HycuNPV與BT復配后致死速度加快，經對復配的防效進行方差分析（表3）后再進行新復極差分析得出各處理間的防效差異性結果，除施藥后15 d，其他處理復配后致死速度在同一調查時間明顯快于單一的HycuNPV（表4）。

從表4可知，處理4即AB、處理5即AB、處理9即AB、處理10即AB之間差異不顯著，且都屬于藥效最好的區間。從經濟角度分析，成本越低越好，HycuNPV與BT復配的成本遠低于單一HycuNPV，從見效時間角度分析，死亡時間越短越好，因此，處理9即AB的組合為最佳選擇，即HycuNPV與BT復配防治美國白蛾第一代幼蟲施藥后13 d，其平均校正死亡率為99.88%。

從表2可知，HycuNPV與BT復配防治第三代美國白蛾幼蟲施藥后7、10、13、15 d校正死亡率分別為43.33%、76.67%、91.33%、96.00%。仍說明HycuNPV與BT復配致死速度快，經對復配的防效進行方差分析（表5）后再進行新復極差分析得出各處理間的防效差異性結果，除施藥后5 d和15 d，其他處理復配后致死速度在同一調查時間明顯快于單一的HycuNPV（表6）。但防治效果不如第一代。

從表6可知，處理5、處理9、處理10之間差異不顯著，且都屬于防效最好的區間，單一HycuNPV施藥后15 d校正死亡率為91.67%。從經濟角度分析，成本越低越好，HycuNPV與BT復配的成本遠低于單一HycuNPV，從見效時間角度分析，死亡時間越短越好，因此，處理9即AB的組合為最佳選擇，即HycuNPV與BT復配防治美國白蛾第三代幼蟲施藥后13 d，其平均校正死亡率為91.33%。

3結論與討論

（1）病毒具有一定的自然傳染能力和持效作用，且具有高度的專一性，但殺蟲速度慢[2]。本次林間藥效試驗結果表明，HycuNPV與BT復配防治美國白蛾第一代幼蟲施藥后7、10、13 d校正死亡率分別為66.00%、95.44%、99.88%。HycuNPV與BT復配防治美國白蛾第三代幼蟲施藥后7、10、13、15 d校正死亡率分別為43.33%、76.67%、91.33%、96.00%。均說明HycuNPV與BT復配致死速度快，明顯快于單一HycuNPV。防治第一代與第三代美國白蛾幼蟲試驗結果一致，但防治第一代效果更好。

（2）蘇云金桿菌能引起美國白蛾的敗血病，其癥狀是死亡幼蟲身體癱軟，呈黑色。利用 BT防治美國白蛾，一般施藥后2～3 d 開始死亡，5～6 d進入死亡高峰。在美國白蛾2～4齡幼蟲期，單獨采用蘇云金桿菌BT8 000 IU·mg-1懸浮劑稀釋2 000～3 000倍，5～7 d后防效較好，校正死亡率為83.13%～87.95%[4]。

（3）本次試驗發現，第一代和第三代美國白蛾幼蟲施藥后第7天死亡幼蟲均表現為BT的感染病癥：體色發暗變黑，身體失水縮小。第13天幼蟲死亡癥狀均為典型的病毒感染癥狀：幼蟲身體腫脹，身體倒掛。說明HycuNPV與BT復配，可增強彼此的毒力，克服病毒殺蟲速度比較緩慢的缺陷。防治第一代與第三代美國白蛾幼蟲試驗結果一致，均說明HycuNPV與BT復配致死速度快，明顯快于單一HycuNPV，但防治第一代藥效更好。

（4） HycuNPV和BT復配藥劑成本低。用HycuNPV（ 2.5×10 OBs·mL）與BT（16 000 IU·mg）復配， 即10 mL病毒液中加入2.5 g BT可防治林地666.7 m，每666.7 m林地需藥劑成本6.045元。而單一使用HycuNPV （2.5×10 OBs·mL）， 噴灑濃度為2.5×10 OBs·mL（與復配相比病毒濃度需要增加10倍），666.7 m林地需病毒100 mL， 每666.7 m需藥劑成本60元，幾乎是復配的10倍。可見HycuNPV 和BT復配可顯著降低防治成本，林農可以接受，易于推廣。

（5）包括HycuNPV在內的生物防治技術對人畜無害，且很好地解決了化學防治帶來的抗藥性、環境污染等問題，已成為有害生物防控的新型技術和趨勢，在實際應用過程中，建議將BT和HycuNPV復配，充分發揮BT的速效性和HycuNPV的持效性，達到對害蟲的高效、持久防治。

參考文獻

[1]閔水發，曾文豪，陳益嫻，等.美國白蛾在湖北孝感市的生物學特性與防治措施[J].湖北林業科技，2018，47（5）：30-33.

[2]孫修煉，胡志紅.我國昆蟲病毒殺蟲劑的研究與應用進展[J].中國農業科技導報，2006，8（6）：33-37.

[3]段彥麗，陶萬強，曲良建，等.HcNPV和BT復配對美國白蛾的致病性[J].中國生物防治，2008，24（3）：223-238.

[4]閔水發，朱艾紅，曾文豪，等.2種蘇云金桿菌劑型防治美國白蛾效果分析[J].湖北林業科技，2019，48（6）：27-30.

[5]張文穎，閔水發，黃芳.美國白蛾核型多角體病毒防治美國白蛾林間藥效試驗[J].湖北林業科技，2020，49（6）：23-25.

（責任編輯：唐嵐）