急性髓系白血病患者ASXL2和ZBTB7A基因突變及其與臨床特征及預后的關系

周 冰 梁立新 辛小海 令狐銳 李青青 齊云曉 顧孟孟

急性髓系白血病(acute myeloid leukemia，AML)，是臨床血液科常見的造血系統惡性增生性疾病[1]。早期患者常出現疲倦、發熱、食欲減退等癥狀，后期患者多出現發熱、貧血、出血及器官或組織浸潤癥狀[2]。AML多起源于尚未分化為白細胞的骨髓原始細胞，其發病機制為基因突變、染色體異常等促使髓系干細胞分化受阻，失去分化成熟的能力，轉化為急性白血病細胞[3-4]。基因突變在AML發病機制中扮演著重要角色，可用于AML疾病的診斷和預后檢測[5]。ZBTB7A是一種白血病或淋巴瘤相關因子，編碼轉錄抑制因子POK/ZBTB的轉錄[6]。有研究報道ZBTB7A與腫瘤細胞增殖有關[7]。有研究稱ASXL2 和ZBTB7A 突變與AML 疾病發展的關系密切，但是相關研究較少[8-9]。本研究主要探討AML患者ASXL2和ZBTB7A突變與臨床特征以及預后的關系。現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018年3月至2020年5月本院收治急性髓系白血病患者84例。納入標準：①符合WHO診斷標準[10]中關于急性髓系白血病的診斷標準，經確診為急性髓系白血病； ②患者簽署自愿受試同意書，患者及其家屬需簽署知情同意書。排除標準：① 合并嚴重感染者或代謝性疾病；②合并其他惡性腫瘤患者；③合并其他器官嚴重性病變患者。

1.2 ASXL2和ZBTB7A基因突變分析

采集AML患者初治時骨髓液2～3 ml，使用DNA提取試劑盒(美國 Omega 公司)提取DNA，應用PCR法擴增ASXL2基因的12和13號外顯子以及ZBTB7A基因2和3號外顯子，送上海生工生物公司測序，使用 Sequencer 軟件分析測序結果。

1.3 觀察指標

收集患者的基本資料，包括性別、年齡及并發癥；實驗室檢查指標包括白細胞數量(WBC)、血紅蛋白(Hb)、血小板(PLT)、骨髓原始粒細胞。

1.4 隨訪

采取電話或者門診回訪的方式對患者進行隨訪，隨訪截止日期至5月1日，總體生存(OS)期為患者確診至死亡的時間或隨訪終點，無事件生存(EFS)期為自獲得完全緩解(CR)到復發、死亡或隨訪終點。記錄患者EFS率及OS率。

1.5 統計學分析

2 結果

2.1 AML患者ASXL2 和 ZBTB7A 的突變頻率及其與基線資料的關系

在AML患者中，27例(32.14%)發生ASXL2突變，8例(9.52%)發生ZBTB7A突變。ASXL2和ZBTB7A 突變和野生型患者在年齡、性別或其他并發癥方面差異均無統計學意義(P>0.05)。見表1。

2.2 AML患者ASXL2 和 ZBTB7A 突變與臨床指標的關系

ASXL2突變患者的白細胞數量顯著高于野生型患者(P<0.05)，而在Hb、PLT、骨髓原始粒細胞方面野生型與突變型間均無統計學差異(P>0.05)。見表2。

表2 AML患者ASXL2 和 ZBTB7A 突變與臨床指標的關系

2.3 AML患者ASXL2 和 ZBTB7A 突變與預后的關系

AML患者ASXL2 和 ZBTB7A 突變的CR率比較，差異無統計學意義(P>0.05)。ASXL2野生型患者的OS率、EFS率均顯著高于突變型(P<0.05)；ZBTB7A突變與OS率無相關性(P>0.05)，ZBTB7A野生型患者的EFS率顯著高于突變型(P<0.05)。見表3。

表3 AML患者ASXL2 和 ZBTB7A 突變與預后的關系

3 討論

AML是一種常見的血液系統惡性腫瘤，主要特征為原始和幼稚髓系細胞異常增生，臨床表現無特異性，多表現為乏力、發熱、皮膚黏膜蒼白、瘀斑、紫癜等癥狀[11-12]。由于該病缺乏特效的治療方法，且疾病發展迅速，病死率高，嚴重威脅著人類的生命健康[13]。在AML患者中染色體易位的發生率約為50%，T(8:21)是AML常見的染色體易位，可協同其他基因突變，致使髓系祖細胞分化受阻，其中ASXL2、ZBTB7A是常見的“協同分子”[14-16]，主要通過形成AML-ETO 融合蛋白造成核結合因子復合體被破壞，阻礙造血分化[17]。

ASXL2基因屬于ASXL基因家族成員，長度為144 722 bp，可編碼1 435個氨基酸[18]，主要起轉錄抑制和激活的雙重調節作用，是表觀調節蛋白polycomb 家族和trithorax家族的增強子之一[19]。同源基因還包括ASXL1和ASXL3，ASXL2基因主要存在于大腦皮層、中軸骨、心臟等組織中[20]。有研究發現AML患者存在ASXL2基因突變，且伴有ASXL2基因突變患者AML復發率高于未突變患者，主要突變類型為點突變和移碼突變，多見于第11和12外顯子區[21-22]。有研究報道AML患者中ASXL2基因突變的發生率為22.7%[23]，但本研究結果顯示，在AML患者中，32.14%發生ASXL2突變，高于研究報道的突變率，可能與種族差異有關，具體原因還需要進一步分析。本研究還發現ASXL2突變患者的白細胞數量顯著高于野生型患者，這與目前的研究報道一致[24]。 AML患者ASXL2 突變型和野生型的治療緩解率比較，差異無統計學意義，說明ASXL2 突變對AML患者治療療效的影響較小，另外ASXL2野生型患者的OS率、EFS率均顯著高于突變型，說明ASXL2 突變對AML患者預后的影響較大。

ZBTB7A基因屬于轉錄抑制因子POK家族的成員，長度為21 600 bp，可編碼584個氨基酸，可在調節造血分化和腫瘤代謝中起作用[25]。有研究發現ZBTB7A在AML患者中的突變頻率為23%[26]，然而本研究發現在AML患者中，9.52%發生ZBTB7A突變，低于23%，與上述結果不同的原因可能與種族差異有關。POK紅髓生成因子是ZBTB7A 基因編碼的產物，是與細胞生長及分化密切相關的致癌轉錄因子，是多種腫瘤預后不良的生物標志分子之一[27-28]。本研究發現ZBTB7A野生型患者的EFS率顯著高于突變型，提示ZBTB7A突變可能對AML患者的預后造成影響。

綜上所述，ASXL2和ZBTB7A突變型AML患者的預后較差，ASXL2和ZBTB7A突變有可能成為預后不良的分子標志物。但是本研究樣本量不足，結果可能存在偏移，還需要進一步增加樣本量來證實此結果。