小劑量葉酸降低H型高血壓患者高同型半胱氨酸及其MTHFR C677T基因多態(tài)性的研究

陳 萍 陳肖霞 謝利坤 詹夏菲 鄧晶晶 林孝裕

（福建醫(yī)科大學(xué)附屬福州市第一醫(yī)院全科醫(yī)學(xué)科，福建 福州 350004）

高血壓是最常見的心血管疾病，可引起心、腦、腎等靶器官損害。李建平教授等[1]研究指出，目前中國高血壓人群中有約75%為H型高血壓，可見同型半胱氨酸作為心血管疾病的獨立危險因素越來越受到人們的重視。H型高血壓是指合并高同型半胱氨酸(Hcy≥10 μmol/L)血癥的高血壓[2]，其心腦血管疾病事件的風(fēng)險明顯升高[3]。亞甲基四氫葉酸還原酶(MTHFR)是Hcy代謝過程中的關(guān)鍵酶之一，該酶缺陷引起Hcy的轉(zhuǎn)化發(fā)生障礙，血液中的Hcy水平升高。本研究旨在檢測福州地區(qū)漢族人群H型高血壓病患者的MTHFR C677T基因多態(tài)性，分析小劑量葉酸治療該類患者對同型半胱氨酸（Hcy）的影響，以期為當(dāng)?shù)胤乐蜨型高血壓病提供參考。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2019年12月至2020年12月福州市第一醫(yī)院（以下簡稱“我院”）全科醫(yī)學(xué)科接診的H型高血壓患者178例，對MTHFR C677T位點基因進(jìn)行檢測后將其分為3組：CC組（50例）、CT組（74例）、TT組（54例）。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①年齡＞18周歲。②漢族。③籍貫為福州常住人口。④高血壓診斷標(biāo)準(zhǔn)：符合《中國高血壓防治指南》（2018版）中關(guān)于H型高血壓的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)；收縮壓≥140 mm Hg（1 mm Hg=0.133 kPa）和（或）舒張壓≥90 mm Hg。高血壓合并高同型半胱氨酸血癥是指原發(fā)性高血壓患血漿Hcy升高≥10 μmol/L。剔除標(biāo)準(zhǔn)：①近期有手術(shù)、外傷、感染疾病，呼吸衰竭、嚴(yán)重心腦血管疾病、肝腎疾病、惡性腫瘤、血液系統(tǒng)及自身免疫疾病者。②半年內(nèi)已服用葉酸、維生素B6、維生素B12者。③精神異常疾病者。④無法隨訪者。所有研究均在患者本人簽署知情同意書后完成，通過我院醫(yī)學(xué)倫理委員會的審查（編號201903051）。

1.2 治療方法 給予入組患者個體化降壓治療方案，在降血壓治療基礎(chǔ)上，3組患者口服葉酸片5 mg，每周一、三、五晨起口服1片（福州海王制藥有限公司，批號：H35020215）。研究期間患者規(guī)律服用降壓藥物，監(jiān)測血壓，飲食、生活起居習(xí)慣不變，但研究期間不能服用含有葉酸等維生素B族的藥物和影響維生素代謝的藥物如苯妥英鈉、甲氨蝶呤等。

1.3 觀察指標(biāo) 記錄所有患者性別、年齡、吸煙史、飲酒史、糖尿病史、血壓、體質(zhì)量指數(shù)（BMI）=體質(zhì)量/身高2（kg/m2）、葉酸、Hcy指標(biāo)。血壓測定：患者在未服用降壓藥物情況下，安靜休息30 min后，坐位測量右側(cè)肱動脈收縮壓、舒張壓3次，取平均值。記錄治療前及治療1個月、3個月后檢測葉酸、Hcy水平。

1.4 檢測方法 血清葉酸檢測、血漿Hcy檢測：受試者空腹10 h，抽取清晨肘靜脈血2 mL，應(yīng)用貝克曼AU680全自動生化分析儀檢測，葉酸正常參考范圍9.53～44.9 nmol/L，血漿Hcy正常參考范圍為0～10 μmol/L。

MTHFR C677T基因檢測：采用EDTA抗凝采血管抽取2 mL靜脈血，存至-80 ℃冰箱用于提取DNA，使用MX3005p熒光定量PCR儀，應(yīng)用PCR熒光探針法結(jié)果判讀，MTHFR 677C/T檢測試劑盒（深圳泰樂德醫(yī)療有限公司生產(chǎn)）。

1.5 統(tǒng)計學(xué)處理 將本研究受試者涉及的臨床資料使用SPSS 24.0軟件進(jìn)行處理。計數(shù)資料采用頻數(shù)、百分比表示，組間采用χ2檢驗。符合正態(tài)分布的計量資料采用（x-±s）表示，不符合正態(tài)分布的計量資料采用中位數(shù)（四分位數(shù)）[M（P25，P75）]表示，采用秩和檢驗，兩兩比較采用Bonferroni方法校正。以上所有數(shù)據(jù)均采用雙側(cè)檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 3組一般資料比較 3組患者性別比例、年齡、吸煙史、飲酒史、有糖尿病史、血壓、體質(zhì)量指數(shù)（BMI）差異無統(tǒng)計學(xué)意義（均P＞0.05）。見表1。2.2 3組治療前后血清葉酸水平比較 治療前3組間葉酸水平無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。治療1個月后3組基因型患者葉酸水平升高，與治療前水平比較，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。治療后3個月3組組間葉酸水平比較，無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。見表2。（P＜0.05）。與本組相比較，治療后3個月Hcy水平與治療后1個月比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表3。

表1 3組一般資料比較

表2 3組治療前后血清葉酸水平比較（±s）

表2 3組治療前后血清葉酸水平比較（±s）

注：3組治療后1個月與治療前相比，aP＜0.05；3組治療后3個月相比，bP＞0.05。

組別n治療前治療后1個月 治療后3個月CC組5012.63±3.4221.24±5.43a35.22±3.24b CT組7411.42±4.2818.82±4.61a34.74±3.96b TT組5411.84±3.6517.43±5.22a32.43±4.34b

表3 3組治療前后血漿Hcy水平比較（±s）

表3 3組治療前后血漿Hcy水平比較（±s）

注：TT組與CC、CT組相比，aP＜0.01；與本組治療前相比，bP＜0.05；TT組與CC組相比，cP＜0.05；治療后3個月與本組治療后1個月相比，dP＜0.05。

組別n治療前治療后1個月 治療后3個月CC組50 23.21±5.4617.56±4.22b11.54±3.82d CT組7428.54±6.2221.84±5.35b12.32±4.16d TT組54 36.42±6.64a 23.25±3.86bc 14.26±5.39d

2.3 3組治療前后血漿Hcy水平比較 經(jīng)重復(fù)測量方差分析顯示，治療前CC與CT基因型與TT基因型Hcy水平差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。治療1個月后3組基因型患者Hcy水平均下降，與治療前Hcy水平比較，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），其中TT組葉酸降低Hcy治療有顯著影響（P＜0.01）；治療后1個月，比較CC組與TT組差值，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義

2.4 治療有效率比較 治療3個月后，3組血漿Hcy＜10 μmol/L的例數(shù)、有效率為CC組39例，有效率78%、CT組45例，有效率60.81%、TT組31例，有效率57.41%。經(jīng)χ2檢驗，3組治療有效率差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.028）；經(jīng)χ2分割法兩兩比較，CT組和TT組有效率差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.683）。CC組治療有效率明顯高于其他兩組，與CT組比較P=0.015，與TT組比較P=0.009，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

3 討 論

HHcy是心腦血管疾病的危險因素，H型高血壓病的發(fā)生、發(fā)展與MTHFR C677T基因多態(tài)性密切相關(guān)[4-5]。MTHFR C677T突變后5-甲基四氫葉酸（5-MTHF）合成不足，影響Hcy向蛋氨酸的轉(zhuǎn)換，進(jìn)而引起 Hcy升高，Hcy水平升高與原發(fā)性高血壓患者在心血管時間上存在協(xié)同作用，使得高血壓心血管風(fēng)險升高[6-8]。因此，控制血壓和降低血漿Hcy水平對減少高血壓患者心腦血管疾病的發(fā)生具有重要意義。本研究結(jié)果顯示，檢測福州地區(qū)178例高血壓患者M(jìn)THFR C677T基因類型，TT型的H型高血壓患者血漿Hcy偏高而葉酸水平偏低，TT型血漿Hcy高于CT型、CC型，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01），CT和TT基因型相比于CC基因型發(fā)生H型高血壓的風(fēng)險增高，與國內(nèi)張俊等[9]、章衍達(dá)[10]報道一致。

本研究過程中沒有發(fā)現(xiàn)服用葉酸出現(xiàn)藥物不良反應(yīng)，小劑量葉酸降低Hcy治療有很好的安全性[11]。但也有研究發(fā)現(xiàn)，服用大劑量葉酸片可能有其他潛在風(fēng)險[12-13]，如增加腫瘤的發(fā)生風(fēng)險[14-15]。盧曉燕等[16]研究不同劑量葉酸對HHcy的影響發(fā)現(xiàn)，對CT、TT型的人群，4周內(nèi)給予5 mg/d葉酸治療的效果更好，而CC型患者選擇0.8 mg/d葉酸即可，且指出不同劑量葉酸治療3個月后，TT型患者Hcy水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義。但服用葉酸片的研究存在一定局限性，因為個人飲食生活習(xí)慣不同，每個人從食物中攝入葉酸存在差異，而且有研究[17]指出吸煙、飲酒、熬夜等不良生活習(xí)慣均會影響血清Hcy水平，因此，臨床可根據(jù)高血壓病患者Hcy水平、MTHFR C677T基因型進(jìn)行精準(zhǔn)、個體化干預(yù)，降低高Hcy血癥引起心腦血管并發(fā)癥的風(fēng)險。

綜上所述，高血壓病患者的血漿Hcy水平升高與MTHFR C677T基因突變相關(guān)，可短期適當(dāng)補充葉酸，彌補葉酸代謝途徑的缺陷，為降低H型高血壓伴有的Hcy水平的升高提供了一種可行性方案，以期降低H型高血壓患者心腦血管事件風(fēng)險，為防治H型高血壓提供新思路。