不同藥劑對(duì)草地貪夜蛾的室內(nèi)殺蟲活性及田間防效研究

毛永凱，李繼虎，陳艷艷，林明江，許漢亮，劉景業(yè)，孫東磊,2*

(1廣東省科學(xué)院南繁種業(yè)研究所，廣東 廣州 510316；2廣東省藥肥工程技術(shù)研究中心，廣東 廣州 510316；3廣州市南沙區(qū)農(nóng)業(yè)農(nóng)村服務(wù)中心，廣東 廣州 511455)

0 引言

草地貪夜蛾Spodoptera frugiperda(J. E. Smith)，又名秋黏蟲，屬于鱗翅目Lepidoptera，夜蛾科Noctuidae，灰翅夜蛾屬Spodoptera，起源于美洲熱帶和亞熱帶地區(qū)[1]，是聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織向全球預(yù)警的跨國(guó)界遷飛性重大農(nóng)業(yè)害蟲[2]。2018年12月11日首次發(fā)現(xiàn)草地貪夜蛾成蟲從緬甸遷入我國(guó)云南西部地區(qū)[3]，隨后有報(bào)道稱2018年12月26日在云南省江城縣發(fā)現(xiàn)草地貪夜蛾幼蟲在田間為害[4]。草地貪夜蛾遷飛能力極強(qiáng)，入侵我國(guó)后在國(guó)內(nèi)迅速擴(kuò)散，至2019年10月8日就蔓延到了全國(guó)的26個(gè)省（自治區(qū)、直轄市）[5]。

草地貪夜蛾是雜食性昆蟲，寄主范圍廣，已記載的就多達(dá)76科353種[6-7]。張磊等[8]分子鑒定結(jié)果表明，入侵我國(guó)的草地貪夜蛾屬于偏好取食玉米的“玉米型”，以為害玉米為主。在我國(guó)廣西、云南、廣東等主要蔗區(qū)，甘蔗也是草地貪夜蛾的寄主和冬季重要食源[9-12]。草地貪夜蛾入侵我國(guó)后，嚴(yán)重威脅著我國(guó)糧食生產(chǎn)安全[13]。據(jù)預(yù)測(cè)，如不加以防治，草地貪夜蛾對(duì)我國(guó)玉米生產(chǎn)造成的潛在經(jīng)濟(jì)損失總量為375.68億～3283.45億元[14]。

化學(xué)農(nóng)藥具有作用速度快和防效好的特點(diǎn)，是病蟲害應(yīng)急防控的重要措施[15]，使用化學(xué)農(nóng)藥防治草地貪夜蛾能夠快速壓低種群規(guī)模、減輕為害[16]。但有研究報(bào)道，在國(guó)外長(zhǎng)期、頻繁的藥劑使用已導(dǎo)致草地貪夜蛾對(duì)多種新型農(nóng)藥產(chǎn)生了不同程度的抗性，如Gutiérrez-Moreno等[17]的研究表明，波多黎各的草地貪夜蛾田間種群已對(duì)氟苯蟲酰胺和氯蟲苯甲酰胺這2種雙酰胺類殺蟲劑產(chǎn)生了高水平的抗性，抗性水平分別達(dá)500和160倍。因此，在田間防治草地貪夜蛾時(shí)要注意不同作用機(jī)制藥劑的輪替使用，以降低抗性選擇壓力。

為明確不同作用機(jī)理的藥劑對(duì)草地貪夜蛾的殺蟲效果，加快草地貪夜蛾防控藥劑的篩選，本研究選取了化學(xué)農(nóng)藥、植物源農(nóng)藥和微生物農(nóng)藥等共計(jì)13種藥劑，對(duì)草地貪夜蛾開(kāi)展了室內(nèi)殺蟲活性試驗(yàn)。同時(shí)，對(duì)室內(nèi)殺蟲效果較好的藥劑開(kāi)展了田間防效試驗(yàn)，以期能為玉米田和蔗田草地貪夜蛾的防控提供更多藥劑選擇。

1 材料與方法

1.1 室內(nèi)殺蟲活性試驗(yàn)

1.1.1 供試蟲源

2019年6月在廣東省廣州市南沙區(qū)鮮食玉米田采集草地貪夜蛾高齡幼蟲帶回實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)。在人工氣候箱內(nèi)用新鮮甜玉米葉片(粵甜28號(hào)-粵審玉20170004)飼養(yǎng)多代后用于試驗(yàn)研究，以3齡幼蟲作為供試蟲源。飼養(yǎng)溫度為(27±1)℃，相對(duì)濕度為70%±5%，光周期為L(zhǎng)∶D=14∶10。

1.1.2 供試農(nóng)藥

供試藥劑種類及生產(chǎn)廠商信息見(jiàn)表1，所有藥劑均在網(wǎng)上平臺(tái)購(gòu)買。每種藥劑參考其農(nóng)藥登記時(shí)的推薦用量設(shè)置1～2個(gè)濃度。以玉米苗期450 kg/hm2的常規(guī)噴霧藥液量轉(zhuǎn)換為稀釋倍數(shù)，每個(gè)濃度配制50 mL藥液備用。

表1 供試藥劑

1.1.3 試驗(yàn)器具

電子天平、量筒、移液器、燒杯、容量瓶、浸蟲籠、計(jì)時(shí)器、培養(yǎng)皿、多孔飼養(yǎng)盒、濾紙、人工氣候箱等。

1.1.4 試驗(yàn)及調(diào)查方法

采用浸蟲法[18]測(cè)定化學(xué)農(nóng)藥、植物源農(nóng)藥及微生物農(nóng)藥300億孢子/g球孢白僵菌的室內(nèi)殺蟲活性。選取發(fā)育整齊的3齡幼蟲，使用浸蟲籠在配制好的藥液中浸漬10 s后取出，用干凈濾紙吸去多余藥液，自然晾干后放入多孔飼養(yǎng)盒中用新鮮甜玉米葉片飼養(yǎng)；以清水處理為對(duì)照(CK1)。采用浸葉法[19]測(cè)定微生物農(nóng)藥20億PIB/mL棉鈴蟲核型多角體病毒懸浮劑及8000 IU/μL蘇云金桿菌懸浮劑對(duì)草地貪夜蛾幼蟲的室內(nèi)毒殺效果。將苗期新鮮甜玉米葉片剪為10 cm長(zhǎng)葉段，在配制好的藥液中浸漬10 s后取出，自然晾干后置于放有保濕濾紙的9 cm培養(yǎng)皿中，選 取發(fā)育整齊的3齡幼蟲，饑餓處理4 h后放入培養(yǎng)皿中飼養(yǎng)；以清水處理為對(duì)照(CK2)。上述每處理各18頭幼蟲，重復(fù)4次。對(duì)照及微生物農(nóng)藥處理后1～5天，其他藥劑處理后1～3天，每天檢查幼蟲存活狀態(tài)，以毛筆輕觸幼蟲體表，無(wú)反應(yīng)判定為死亡，記錄死亡蟲數(shù)，計(jì)算死亡率。

1.1.5 數(shù)據(jù)分析

參照以下公式計(jì)算死亡率：

死亡率=死亡蟲數(shù)/處理總蟲數(shù)×100%

所有數(shù)據(jù)使用Excel整理后，使用SPSS 18.0對(duì)不同藥劑處理后的草地貪夜蛾死亡率進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，采用Duncan氏新復(fù)極差法進(jìn)行多重比較和差異顯著性分析。

1.2 田間防效試驗(yàn)

1.2.1 供試藥劑

選取室內(nèi)殺蟲效果較好的藥劑分A、B兩組開(kāi)展田間防效試驗(yàn)，A組藥劑為60 g/L乙基多殺菌素懸浮劑、200 g/L氯蟲苯甲酰胺懸浮劑、10%四氯蟲酰胺懸浮劑；B組藥劑為5%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽水分散粒劑、20億PIB/mL棉鈴蟲核型多角體病毒懸浮劑、4.5%高效氯氰菊酯乳油。

1.2.2 試驗(yàn)田塊

試驗(yàn)在廣東省廣州市南沙區(qū)萬(wàn)頃沙鎮(zhèn)十四涌附近(22°38′0.24″N，113°36′7.58″E) 2塊植期不同的春玉米田塊開(kāi)展，試驗(yàn)地地勢(shì)平坦，水肥管理正常。所種玉米品種均為金百甜15號(hào)，試驗(yàn)時(shí)玉米均處于苗期，行距80 cm，株距25 cm。植期較早田塊開(kāi)展A組藥劑試驗(yàn)，植期較晚田塊開(kāi)展B組藥劑試驗(yàn)。

1.2.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)不設(shè)小區(qū)，每種藥劑施藥面積800 m2。以莖葉噴霧方式施藥，藥液量450 kg/hm2。施藥時(shí)天氣多云，微風(fēng)。A組設(shè)60 g/L乙基多殺菌素懸浮劑1500倍液、200 g/L氯蟲苯甲酰胺懸浮劑3000倍液、10%四氯蟲酰胺懸浮劑1500倍液3個(gè)藥劑處理，以清水為對(duì)照，試驗(yàn)時(shí)間為2020年4月1日，藥械為背負(fù)式電動(dòng)噴霧器(農(nóng)家園3WBD-18L)。B組設(shè)20億PIB/mL棉鈴蟲核型多角體病毒懸浮劑500倍液、5%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽水分散粒劑3000倍液、4.5%高效氯氰菊酯乳油600倍液3個(gè)藥劑處理，以清水為對(duì)照，試驗(yàn)時(shí)間為2020年4月15日。藥械為背負(fù)式電動(dòng)噴霧器(農(nóng)家園3WBD-18L)。

1.2.4 調(diào)查方法

施藥前調(diào)查蟲口基數(shù)，施藥后1、3、5、7、9天調(diào)查防治結(jié)果，每個(gè)處理調(diào)查田塊左上部、右上部、中間、左下部、右下部5處，每處按“W”形5點(diǎn)取樣法調(diào)查，每點(diǎn)連續(xù)調(diào)查20株，每處調(diào)查100株，記錄有蟲株數(shù)、蟲口數(shù)、蟲齡。計(jì)算蟲口減退率，根據(jù)蟲口減退率計(jì)算防治效果。

1.2.5 數(shù)據(jù)處理

參照以下公式計(jì)算蟲口減退率、防治效果：

蟲口減退率=(藥前活蟲數(shù)-藥后活蟲數(shù))/藥前活蟲數(shù)×100%

防治效果=(處理區(qū)蟲口減退率-對(duì)照區(qū)蟲口減退率)/(1-對(duì)照區(qū)蟲口減退率)×100%

1.2.6 數(shù)據(jù)分析

數(shù)據(jù)使用Excel整理，計(jì)算蟲口減退率、防治效果。使用SPSS 18.0對(duì)不同藥劑的防效進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，采用Duncan氏新復(fù)極差法進(jìn)行多重比較，顯著性水平P＜0.05。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同藥劑對(duì)草地貪夜蛾幼蟲的室內(nèi)殺蟲活性

由表2可知，藥后1天，5%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽水分散粒劑3000倍液和6000倍液殺蟲活性最高，幼蟲死亡率均為100.00%；其次為60 g/L乙基多殺菌素懸浮劑750倍液，幼蟲死亡率為93.05%；200 g/L氯蟲苯甲酰胺懸浮劑2000倍液和10%四氯蟲酰胺懸浮劑750倍液處理后，幼蟲死亡率均為86.11%；60 g/L乙基多殺菌素懸浮劑1500倍液處理，幼蟲死亡率為79.17%；10%四氯蟲酰胺懸浮劑1500倍液處理，幼蟲死亡率為70.83%；200 g/L氯蟲苯甲酰胺懸浮劑3000倍液處理，幼蟲死亡率為61.11%；25 g/L溴氰菊酯乳油1000倍液處理，幼蟲死亡率為54.17%。

表2 7種化學(xué)農(nóng)藥和3種植物源農(nóng)藥對(duì)草地貪夜蛾3齡幼蟲的室內(nèi)殺蟲活性

藥后2天，60 g/L乙基多殺菌素懸浮劑750倍 液及1500倍液、10%四氯蟲酰胺懸浮劑750倍液及1500倍液、200 g/L氯蟲苯甲酰胺懸浮劑2000倍液的處理效果好，幼蟲死亡率分別為100.00%、100.00%、98.61%、97.22%、97.22%；其次為200 g/L氯蟲苯甲酰胺懸浮劑3000倍液處理，幼蟲死亡率為93.05%；0.5%印楝素乳油同樣對(duì)3齡幼蟲表現(xiàn)出較高的殺蟲活性，其200倍液和240倍液處理后的幼蟲死亡率分別為79.17%和65.28%，200倍液處理后的幼蟲死亡率顯著高于化學(xué)藥劑25 g/L溴氰菊酯乳油1000倍液和4.5%高效氯氰菊酯乳油667倍液處理(P＜0.05)。

藥后3天，10%四氯蟲酰胺懸浮劑750倍液及1500倍液、200 g/L氯蟲苯甲酰胺懸浮劑2000倍液及3000倍液的處理效果最好，幼蟲死亡率均達(dá)100.00%；其次為0.5%印楝素乳油200倍液及240倍液，處理后的幼蟲死亡率分別為81.94%和75.00%；25 g/L溴氰菊酯乳油1000倍液和4.5%高效氯氰菊酯乳油667倍液處理幼蟲死亡率仍較低，分別為62.50%和51.39%。20%呋蟲胺可溶粒劑、2.5%魚藤酮乳油和2%苦參堿水劑效果均很差，幼蟲死亡率最高僅27.78%。

3種微生物藥劑中以20億PIB/mL棉鈴蟲核型多角體病毒懸浮劑500倍液殺蟲活性最高(見(jiàn)表3)，處理1天后幼蟲死亡率高達(dá)100.00%。300億孢子/克球孢白僵菌可濕性粉劑250倍液的殺蟲活性一般，藥后5天幼蟲死亡率為51.39%。8000 IU/μL蘇云金桿菌100倍液的效果較差，處理5天后的幼蟲死亡率僅為6.95%。

表3 3種微生物農(nóng)藥對(duì)草地貪夜蛾3齡幼蟲的室內(nèi)殺蟲活性

2.2 不同藥劑對(duì)草地貪夜蛾幼蟲的田間防治效果

A組藥劑試驗(yàn)結(jié)果表明，60 g/L乙基多殺菌素懸浮劑1500倍液的速效性較好，藥后1天的防效為87.90%，顯著高于10%四氯蟲酰胺懸浮劑1500倍液與200 g/L氯蟲苯甲酰胺懸浮劑3000倍液處理后的79.82%和78.13%(P＜0.05)。藥后3天，3種藥劑的防效均有所上升，分別達(dá)98.53%、94.24%和94.84%。藥后5天，3種藥劑的防效均升至最高，分別為99.03%、96.41%和95.36%。藥后7天，3種藥劑的防效略有下降，至藥后9天，分別降低至91.57%、88.28%和86.90%，對(duì)草地貪夜蛾仍有較好防治效果見(jiàn)表4。

B組藥劑試驗(yàn)結(jié)果表明，藥后1、3、5、7、9天，20億PIB/mL棉鈴蟲核型多角體病毒500倍液和4.5%高效氯氰菊酯乳油600倍液對(duì)草地貪夜蛾幼蟲的田間防效均很高，分別為95.23%和88.21%、98.85%和95.28%、100.00%和98.62%、98.90%和99.08%、95.06%和88.58%。藥后1天，5%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽水分散粒劑3000倍液對(duì)草地貪夜蛾表現(xiàn)出很好的防治效果，防效達(dá)92.59%；但藥后3天蟲量增加，防效迅速降低至20.80%，至藥后5天，其防效又上升至88.67%，但仍顯著低于20億PIB/mL棉鈴蟲核型多角體病毒500倍液處理和4.5%高效氯氰菊酯乳油600倍液處理(P＜0.05)。藥后7天，5%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽水分散粒劑3000倍液的防效上升到94.73%，3種藥劑間無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。藥后9天，5%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽水分散粒劑3000倍液的防效下降到80.03%，在3種藥劑中最低(表4)。

表4 不同藥劑對(duì)草地貪夜蛾幼蟲的田間防治效果

續(xù)表4 不同藥劑對(duì)草地貪夜蛾幼蟲的田間防治效果

3 結(jié)論與討論

草地貪夜蛾發(fā)育速度快，在25℃條件下，幼蟲期僅14天左右[20]，3齡以后草地貪夜蛾取食量大增，短時(shí)間內(nèi)就可對(duì)寄主作物造成較大損失，同時(shí)對(duì)藥劑的抵抗力顯著增強(qiáng)，若防治不及時(shí)，很容易暴發(fā)成災(zāi)[16,21-22]。因此，生產(chǎn)上要加強(qiáng)蟲情測(cè)報(bào)，以蟲情測(cè)報(bào)為指導(dǎo)，抓住3齡前的關(guān)鍵時(shí)期用藥防治，而且要注意不同作用機(jī)理藥劑的輪替使用，以延緩抗藥性的產(chǎn)生。

氯蟲苯甲酰胺與四氯蟲酰胺同為雙酰胺類殺蟲劑，具有觸殺和胃毒作用[23-24]。本研究表明，在田間噴施200 g/L氯蟲苯甲酰胺懸浮劑3000倍液和10%四氯蟲酰胺懸浮劑1500倍液3天后的防效為94.24%～94.84%，9天后的防效為86.90%～88.28%，2種藥劑對(duì)入侵我國(guó)的草地貪夜蛾仍具有很好的殺蟲活性。Bolzan等[25]發(fā)現(xiàn)室內(nèi)篩選出的抗氯蟲苯甲酰胺(237倍)的草地貪夜蛾種群對(duì)同為雙酰胺類殺蟲劑的氟苯蟲酰胺的交互抗性高達(dá)42000倍。因此，在進(jìn)行田間藥劑防治時(shí)，氯蟲苯甲酰胺與四氯蟲酰胺作為相同類型的藥劑應(yīng)避免連續(xù)使用以減緩害蟲抗藥性的產(chǎn)生。

甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽（簡(jiǎn)稱甲維鹽），具有超高效、低毒、低殘留的特點(diǎn)，對(duì)鱗翅目害蟲具有較好的胃毒、觸殺作用[26-27]。本文室內(nèi)及田間試驗(yàn)均表明5%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽水分散粒劑對(duì)草地貪夜蛾幼蟲殺蟲速效性好，但在田間試驗(yàn)中藥后3天防效迅速下降，隨后又逐漸升高。在田間藥效調(diào)查時(shí)發(fā)現(xiàn)，5%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽水分散粒劑處理田塊藥后3天出現(xiàn)大量1齡幼蟲，表明施藥后仍有大量卵孵化。研究表明，甲維鹽對(duì)草地貪夜蛾卵的LC50值為12.67 mg/L[28]，而且在田間草地貪夜蛾的卵以表面覆蓋鱗毛的卵塊形式存在，故5%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽水分散粒劑3000倍液(16.67 mg.a.i./L)在田間難以起到較好的殺卵效果，使得藥后仍有大量卵孵化為幼蟲，藥后3天防效表現(xiàn)為突降，孵化的幼蟲取食噴藥葉片后死亡，隨后防效逐漸上升。因此，在卵高峰期使用甲維鹽時(shí)應(yīng)注意與殺卵活性較好的藥劑復(fù)配使用，如高效氯氟氰菊酯乳油、溴氰菊酯乳油、高效氯氰菊酯乳油等擬除蟲菊酯類藥劑均具有較好的殺卵活性[16,29-30]。本研究中，盡管在室內(nèi)4.5%高效氯氰菊酯乳油對(duì)草地貪夜蛾幼蟲殺蟲活性較低，但在田間試驗(yàn)中，其防效較高，藥后9天仍高達(dá)88.58%，推測(cè)這可能是與在卵高峰期用藥有關(guān)。

草地貪夜蛾已在我國(guó)完成定殖，從長(zhǎng)遠(yuǎn)來(lái)看，對(duì)其防控還需樹(shù)立“公共植保，綠色植保”的理念[31]。微生物藥劑具有低毒、無(wú)殘留，對(duì)人、畜安全，對(duì)環(huán)境無(wú)污染的特點(diǎn)，是重要的害蟲綠色防控措施。本研究表明，無(wú)論是室內(nèi)生測(cè)還是田間試驗(yàn)，20億PIB/mL棉鈴蟲核型多角體病毒對(duì)草地貪夜蛾都表現(xiàn)出殺蟲活性高、速效性較好。其500倍液在室內(nèi)處理3齡幼蟲1天后，死亡率高達(dá)100%；田間噴施500倍液1天后的防效高達(dá)95.23%，施藥后9天的防效仍高達(dá)95.06%。其結(jié)果與魯艷輝等[32]、馮磊等[33]以甘藍(lán)夜蛾核型多角體病毒懸浮劑對(duì)草地貪夜蛾開(kāi)展的試驗(yàn)結(jié)果相近。

室內(nèi)外試驗(yàn)結(jié)果表明，60 g/L乙基多殺菌素懸浮劑、200 g/L氯蟲苯甲酰胺懸浮劑、10%四氯蟲酰胺懸浮劑、5%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽水分散粒劑、20億PIB/mL棉鈴蟲核型多角體病毒懸浮劑對(duì)草地貪夜蛾幼蟲均有良好的防治效果，上述藥劑均可用于草地貪夜蛾的田間防控。