調控Hippo通路的因子及其研究方法

覃怡瑯 王佳堃 楊 斌

(1.浙江大學奶業科學研究所，杭州 310013；2.浙江科技學院生物與化學工程學院，杭州 310023)

與大多數依賴配體和受體結合發揮作用的通路不同，Hippo通路是由核心激酶、效應因子、輔助因子和轉錄因子共同組成的激酶級聯反應，調控細胞增殖分化、黏附和細胞代謝等生理過程。除跨膜蛋白、機械信號和細胞代謝產物等調控Hippo通路外，姜黃素、膽堿、白藜蘆醇等營養素也能調控Hippo通路，提示Hippo通路可能是一些營養素發揮促畜禽生長發育作用的核心通路。因此，本文對Hippo通路的組成及作用模式、調控Hippo通路的各類因子和研究Hippo的試驗方法進行綜述，以期為利用Hippo通路進行營養干預提供理論依據和技術支持。

1 Hippo通路的組成和作用模式

在哺乳動物體內，Hippo通路高度保守，如表1所示，它由核心激酶、效應因子、輔助因子和轉錄因子共同組成。經典的Hippo通路核心激酶由哺乳動物STE-20樣激酶1/2(mammalian STE20-like kinases 1/2，MST1/2)、Salvador同系物1(Salvador homolog 1，SAV1)、大腫瘤抑制因子1/2(large tumor suppressor kinase 1/2，LATS1/2)和MOB激酶激活因子1A/B(MOB kinase activator 1A/B，MOB1A/B)共同構成[1]。絲裂原活化蛋白激酶激酶激酶激酶(mitogen-activated protein kinase kinase kinase kinases，MAP4K)和核DBF2相關激酶1/2(nuclear DBF2-related 1/2，NDR1/2)是Hippo通路核心激酶的新增成員[2-3]。Yes相關蛋白(Yes-associated protein，YAP)和具有PDZ結合基序的轉錄共激活因子(transcriptional co-activator with PDZ-binding motif，TAZ)是Hippo通路的效應因子[1-3]，14-3-3接頭蛋白是調控YAP/TAZ核質定位的重要輔助因子[1-3]。轉錄增強締合域蛋白(transcriptional enhanced associate domain，TEAD)是哺乳動物體內與YAP結合的主要轉錄因子[1-3]。

Hippo通路是一條激酶級聯反應鏈。當Hippo通路被激活，MAP4K、MST1/2和SAV1共同磷酸化并激活下游的NDR1/2、LATS1/2和MOB1A/B[2-3]。活化的NDR1/2和LATS1/2進一步磷酸化YAP/TAZ[2-3]，磷酸化的YAP/TAZ或者與14-3-3接頭蛋白結合滯留胞質[1-3]，或者在胞質中被泛素化降解[1-3]。……