宮頸癌組織中S100P、VEGF及E-cad的表達水平及意義

張鎮健

信宜市人民醫院 病理科，廣東 茂名 525300

0 引言

近年來，宮頸癌發病年齡有年輕化趨勢，作為婦科常見的惡性腫瘤，嚴重威脅女性生命健康，隨著宮頸細胞學篩查的普遍應用，宮頸癌的發病率和死亡率均得到有效控制。而惡性腫瘤的發生、發展和轉移是不可控的，誘發因素復雜多樣，有研究表明，惡性腫瘤的不同發展階段，不同蛋白表達協同作用，促使疾病的進一步發展[1]。S100P可對惡性腫瘤生長、增殖情況進行調控，在多種腫瘤組織中均呈現高表達水平[2]，VEGF是刺激血管生長的重要細胞因子，與腫瘤的發生、發展密切相關，近年來逐漸成為惡性腫瘤治療的靶點[3]，E-cad則普遍存在于各種上皮細胞，增加細胞間粘附作用，從而抑制惡性腫瘤細胞浸潤轉移[4]。為進一步促進臨床醫務工作者對宮頸癌疾病分期的精準判斷，輔助治療方案的制定與選擇，本研究通過比較宮頸癌患者和正常人員宮頸組織中各指標表達水平及分析其表達水平和宮頸癌臨床病理特征關系，旨在研究宮頸癌組織中S100P、VEGF及E-cad的表達水平及意義，為臨床宮頸癌診斷及疾病分期、發、浸潤等判斷提供理論依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年8月-2020年5月信宜市人民醫院收治的宮頸癌患者65例為研究組，按疾病分期分為Ⅰ期組（33例）和Ⅱ期組（32例），其中Ⅰ期組年齡為33～56歲，平均（52.17±3.26）歲，孕次1～2次，平均（1.5±0.4）次；Ⅱ期組32～55歲，平均（51.64±3.43）歲，孕次1～2次，平均（1.6±0.3）次。并選取同期健康體檢志愿者30例為對照組，年齡為34～57歲，平均（51.75±3.93）歲，差異無統計學意義（P＞0.05）。

納入標準：①研究組患者經宮頸刮片細胞學檢查、宮頸活組織檢查等檢查結合臨床癥狀確診為宮頸癌，符合相關診斷標準[5]，分期標準參考國際婦產科聯盟FIGO分期方法[6]；②無其他重要組織器官嚴重損傷；③初次以癌癥相關疾病入院；④意識清楚，無認知障礙或精神疾病；⑤患者及其家屬了解研究內容并簽署知情同意書。排除標準：①伴有其他婦產科相關疾病；②曾接受過放療、化療等；③處于妊娠期、經期或哺乳期。本研究經本院倫理委員會審核批準。

1.2 檢測方法及結果判斷

①S100P表達水平檢測：取宮頸組織切片放于無菌干燥玻片，滴加3%過氧化氫，于35℃左右孵育5min，再使用蒸餾水、PBS沖洗，干燥后滴加S100P抗體，37℃孵育4h后滴加二抗再孵育30min，最后DAB染色，鏡下觀察顯色狀況，200倍光鏡下選擇視野，雙盲法判斷，發現胞漿及細胞核黃染者視為陽性；②VEGF表達水平檢測：切片標本于酒精、二甲苯脫水后置于枸櫞酸鈉中加熱，過氧化氫孵育，滴加VEGF單克隆抗體作為一抗、生物素標記的羊抗鼠IgG為二抗，鏡下觀察細胞質內出現黃色或者棕褐色顆粒時則判定該結果為陽性；③E-cad表達水平檢測：取宮頸組織切片，已知陽性片為陽性對照，標本固定、封閉、干燥、孵育、染色均嚴格按照試劑盒說明書執行，鏡下觀察細胞-細胞交界處呈黃色或棕黃色染色，或圍繞細胞膜呈線性較強棕黃色染色為陽性。

1.3 統計學分析

本研究所收集數據均采用統計學軟件SPSS 19.0進行計算與分析，年齡等計量資料采用（）表示，采用獨立樣本t檢驗；計數資料以百分率（%）表示，采用χ2檢驗；多因素分析采用Logistic多因素回歸分析，均以P＜0.05為差異顯著或具有統計學意義。

2 結果

2.1 3組人員宮頸組織中S100P、VEGF及E-cad表達比較

Ⅱ期組患者宮頸組織中S100P陽性表達率56.25%＞Ⅰ期組30.30%＞對照組16.67%，Ⅱ期組患者VEGF陽性表達率62.50%＞Ⅰ期組36.36%＞對照組13.33%，Ⅱ期組患者E-cad陽性表達率為18.75%＜Ⅰ期組45.45%＜對照組93.33%，差異具有統計學意義（P＜0.05），見表1。

表1 3 組人員宮頸組織中S100P、VEGF 及E-cad表達比較[n(%)]

2.2 宮頸癌組織中S100P、VEGF及E-cad表達水平與疾病臨床病理特征關系

不同年齡患者宮頸癌組織中S100P、VEGF及E-cad陽性表達率比較差異無統計學意義（P＞0.05），分化程度、淋巴結轉移和FIGO分期的宮頸癌組織中S100P、VEGF及E-cad陽性表達率比較差異具有統計學意義（P＜0.05），見表2。

表2 頸癌組織中S100P、VEGF 及E-cad 表達水平與疾病臨床病理特征關系[n(%)]

2.3 宮頸癌疾病分期影響因素分析

Logistic多因素回歸分析顯示：發生淋巴結轉移、S100P、VEGF表達陽性和E-cad表達陰性均為影響宮頸癌分期的獨立影響因素（P＜0.05），見表3、表4。

表3 宮頸癌疾病分期的單因素分析

表4 宮頸癌分期的多因素分析

3 討論

研究發現胞外S100P表現出對多種細胞有多重作用，其在多種惡性腫瘤中高陽性表達，促進癌癥分布、侵襲，但部分研究發現S100P在胃部惡性腫瘤中表達水平卻明顯下調傾向，表現為抑制胃部腫瘤生長[7-8]。VEGF是目前已知最常見的促血管因子，在腫瘤細胞中通過促進腫瘤周圍及內部血管內皮細胞產生，使腫瘤血管新生，提供病變組織足夠營養，加快疾病進程[9]。E-cad屬于鈣依賴性跨膜糖蛋白，可通過維持細胞間質粘附能力減少腫瘤細胞擴散[10]。早期宮頸癌常無明顯癥狀和體征，輕微病變部位仍光滑較難與宮頸柱狀上皮異位鑒別，而疾病的早期鑒別診斷有助于疾病早治療以提高預后情況[11-12]。

本研究通過對比正常宮頸組織和宮頸癌組織S100P、VEGF及E-cad表達水平，結果顯示，宮頸癌組織中S100P、VEGF及E-cad表達陽性率遠高于正常宮頸組織，表示S100P、VEGF及E-cad表達水平檢測可作為宮頸癌輔助診斷方式，疾病早期癥狀輕微，難以鑒別，通過上述蛋白表達水平檢測可進一步為臨床診斷提供依據。本研究結果還顯示分化程度、淋巴結轉移和FIGO分期的宮頸癌組織中S100P、VEGF及E-cad陽性表達率比較差異具有統計學意義（P＜0.05），且S100P、VEGF及E-cad表達水平均為影響宮頸癌分期的獨立影響因素（P＜0.05），表示通過檢測上述表達水平可輔助患者疾病分期，為之后治療方式的選擇提供重要指導價值。當檢測發現病變部位E-cad表達水平陽性率顯著減少，則提示其病變部位上皮細胞出現功能障礙，細胞間粘附性下降，警惕出現癌癥細胞的脫落、轉移[13]。在腫瘤缺氧環境中，表達水平較高的VEGF與低氧元件相結合，使VEGF蛋白翻譯轉錄不受抑制，周圍血管新生速度增加，促進腫瘤生長浸潤，檢測病變部位出現高表達的VEGF蛋白，提示腫瘤發展迅速，處于晚期[14-15]。臨床治療可通過增加E-cad合成以增強其對宮頸部位上皮細胞的調節和對腫瘤擴散的抑制情況。

綜上所述，檢測宮頸癌組織中S100P、VEGF及E-cad表達水平，可輔助判斷臨床疾病的浸潤、發展等情況，可作為宮頸癌疾病分期的判斷指標，并有助于后期治療方式的制定。