燒傷整形患者血清Toll樣受體4和髓樣細胞觸發(fā)受體1表達水平及影響因素分析

華 振，趙卓偉，段策中，霍君藝

(空軍軍醫(yī)大學唐都醫(yī)院燒傷整形科，陜西 西安 710038)

人體燒傷組織會出現(xiàn)缺損、增生，嚴重影響外觀，并造成不同程度的功能障礙，患者生理和心理負擔沉重。燒傷后整形能夠改善甚至完全恢復外觀和功能，隨著醫(yī)學技術的發(fā)展和實踐經(jīng)驗的積累，燒傷整形手術日漸成熟[1]。但由于燒傷通常創(chuàng)面較大，手術切口多，損傷組織皮瓣對外界病原菌抵抗能力較差，相對于其他整形手術，其術后發(fā)生感染等并發(fā)癥的風險較高[2-3]。燒傷患者體內(nèi)存在大量微生物及其代謝產(chǎn)物，能夠激活全身性炎癥反應，這對整形手術而言也是較大的挑戰(zhàn)[4]。炎癥反應在燒傷患者傷后、整形手術中具有至關重要的作用，其中Toll樣受體4(Toll-like receptor 4，TLR4)[5]、髓樣細胞觸發(fā)受體1(Triggering receptor expressed on myeloid cell 1，TREM1)[6]是目前發(fā)現(xiàn)的兩種重要的促炎癥因子，可引起機體組織和器官損傷。但目前關于燒傷整形患者TLR4和TREM1表達的研究較少。鑒于此，本研究探討燒傷整形患者血清TLR4和TREM1水平及影響因素，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 將2019年2月至2022年2月期間本院燒傷整形科收治的燒傷整形患者58例(燒傷整形組)和健康體檢者50例(健康對照組)作為研究對象。燒傷整形組男性37例，女性21例；年齡19～65歲，平均(37.16±5.83)歲；平均燒傷面積(59.29±11.73)cm2；燒傷部位中，頭面部19例，四肢24例，背部13例，胸腹部2例；燒傷原因中，熱液燒傷21例，火焰燒傷19例，電燒傷14例，其他5例。健康對照組男性32例，女性18例；年齡22～68歲，平均(37.86±6.28)歲。兩組性別構成及年齡比較差異無統(tǒng)計學意義(均P>0.05)。納入標準：燒傷整形組患者在本院接受燒傷治療整形；臨床資料完整；知情同意。排除標準：合并重大器質(zhì)性疾病；妊娠期、哺乳期女性；急危重癥燒傷；中途退出及失訪者。本研究已通過醫(yī)院倫理委員會審批。

1.2 研究方法

1.2.1 資料收集：收集并記錄患者年齡、性別、體重、身高、基礎疾病(高血壓和糖尿病)、創(chuàng)面瘢痕、整形手術時間、抗菌藥物種類、術區(qū)殘留瘢痕、術區(qū)殘留創(chuàng)面、術后感染等。根據(jù)體重和身高計算體重指數(shù)(BMI)。感染診斷標準參照《醫(yī)院感染診斷標準(試行)》[7]中切口感染診斷標準。

1.2.2 實驗室檢測：采集研究對象晨起空腹靜脈血5 ml，室溫靜置1 h后3000 r/min離心10 min，分離血清。分別采用人TLR4酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)試劑盒(批號：ab277392，英國Abcam公司)和人TREM-1 ELISA試劑盒(批號：ab270884，英國Abcam公司)檢測血清TRL4和TREM1水平。每個樣本均重復檢測3次，以平均值作為該樣本TRL4和TREM1含量。

2 結 果

2.1 燒傷整形組與健康對照組血清TRL4和TREM1表達水平比較 見表1。燒傷整形組血清TRL4和TREM1表達水平顯著高于健康對照組(均P<0.05)。

表1 燒傷整形組與健康對照組血清TRL4和TREM1表達水平比較(ng/ml)

2.2 燒傷整形患者血清TRL4和TREM1表達水平的相關性 見圖1。Perason分析結果表明，燒傷整形患者血清TRL4和TREM1水平呈正相關(r=0.613，P<0.05)。

圖1 燒傷整形患者血清TRL4和TREM1表達水平的相關性

2.3 燒傷整形患者血清TLR4和TREM1表達水平影響因素單因素分析 見表2。單因素分析發(fā)現(xiàn)，增生性瘢痕、整形手術時間、抗菌藥物種類、術區(qū)殘留瘢痕、術區(qū)殘余創(chuàng)面、術后感染是影響燒傷整形患者血清TLR4表達水平的重要因素，而增生性瘢痕、整形手術時間、術區(qū)殘余創(chuàng)面、術后感染是影響燒傷整形患者血清TREM1表達水平的重要因素(均P<0.05)。

2.4 燒傷整形患者血清TLR4和TREM1表達水平影響因素Logistic回歸分析 見表3、4。分別以燒傷整形患者血清TLR4和TREM1表達水平作為因變量，以增生性瘢痕、整形手術時間、抗菌藥物種類、術區(qū)殘留瘢痕、術區(qū)殘余創(chuàng)面、術后感染作為自變量，進行多元Logistic回歸分析，結果表明增生性瘢痕、整形手術時間≥180 min、抗菌藥物種類>2種、術區(qū)殘余創(chuàng)面、術后感染是燒傷整形患者血清TLR4表達水平的獨立危險因素，而增生性瘢痕、整形手術時間≥180 min、術區(qū)殘余創(chuàng)面、術后感染是燒傷整形患者血清TREM1表達水平的獨立危險因素(均P<0.05)。

表3 燒傷整形患者血清TLR4表達水平影響因素Logistic回歸分析

表4 燒傷整形患者血清TREM1表達水平影響因素Logistic回歸分析

3 討 論

燒傷是臨床常見的一種復雜的皮膚損傷性疾病，可造成不同程度的生理紊亂、組織壞死，皮膚損傷后病原微生物極易侵入體內(nèi)引起感染，嚴重者甚至發(fā)生全身性炎癥反應和膿毒癥，引起患者死亡[8-9]。燒傷后皮膚外觀通常不佳，患者心理壓力較大；四肢燒傷和面部燒傷可能造成部分生理功能缺損，給患者正常生活、工作造成嚴重不良影響，通過整形能夠改善患者外觀和生理功能，是目前燒傷后治療的重要組成部分[10]。在燒傷患者治療和康復過程中炎性因子一直貫穿始終，成為影響預后的關鍵因素。因此，近年來逐漸有學者關注燒傷整形患者炎性程度及相關的生物標志物[11]。

本研究發(fā)現(xiàn)，與健康對照組相比，燒傷整形患者血清TLR4和TREM1表達水平顯著增加。TLR4是非特異性免疫細胞、T淋巴細胞和B淋巴細胞表面的一種跨膜蛋白，胞外區(qū)富含亮氨酸，能夠和CD14分子中的亮氨酸重復序列結合進而介導蛋白間反應，胞內(nèi)區(qū)為高度保守序列，能夠與白細胞介素(IL)-1受體結合進而誘導下游信號通路、蛋白激酶發(fā)揮免疫活性[12-13]。燒傷患者血液中含有較多的細菌代謝產(chǎn)物，其中以細菌脂多糖激發(fā)機體炎癥反應的能力最強，脂多糖與TLR4胞外區(qū)結合后，跨膜信號能夠通過胞內(nèi)區(qū)激活轉(zhuǎn)錄因子，進而促進各種炎癥因子表達[14]。TREM1是免疫球蛋白超家族的成員，是一種中性粒細胞、單核細胞、巨噬細胞表面表達的髓系細胞表面受體，能夠應答內(nèi)源性和外源性信號因子。TREM1也是炎癥反應的上游因子，細菌和脂多糖均能夠促進TREM1表達水平增加，在膿毒癥中TREM1表達水平增加后可促進肺等組織和全身炎癥損傷[15-16]。本研究還發(fā)現(xiàn)，燒傷整形患者血清TLR4和TREM1表達水平呈正相關，與劉燕等[17]研究結果一致。已有研究[18]發(fā)現(xiàn)，Toll樣受體中各種配體亞型都能夠明顯上調(diào)TREM1表達水平，單核細胞TREM1與其抗體結合后在TLR4、TLR3等配體協(xié)同作用下放大促炎因子產(chǎn)生。

本研究進一步發(fā)現(xiàn)，增生性瘢痕、整形手術時間≥180 min、術區(qū)殘余創(chuàng)面、術后感染是影響燒傷整形患者血清TLR4和TREM1表達水平的獨立危險因素，抗菌藥物種類>2種是影響患者血清TLR4表達水平的獨立影響因素。增生性瘢痕是一種較為嚴重的皮膚纖維化疾病，其形成與免疫、遺傳、細胞凋亡等密切相關。有研究[19]發(fā)現(xiàn)，細菌感染和長時間炎癥反應在增生性瘢痕具有關鍵性作用。邱榮等[20]研究發(fā)現(xiàn)，燒傷患者增生性瘢痕組織中TLR4表達水平及IL-6、IL-8等炎性因子水平均顯著高于正常皮膚組織，且TLR4表達水平與炎性細胞因子水平間存在顯著的正相關性。燒傷創(chuàng)面及整形手術創(chuàng)面愈合過程中發(fā)生的炎癥反應可引起損傷皮膚組織代謝改變，在較長時間的炎性微環(huán)境下炎性因子持續(xù)表達，刺激TLR4和TREM1表達，進而引起成纖維細胞代謝異常，胞外基質(zhì)蛋白過度沉積，最終引起增生性瘢痕[21]。

手術時間過長將造成創(chuàng)面長期暴露，提高了細菌侵入概率，增加了感染風險；術區(qū)創(chuàng)面有殘余時，容易滋生病原微生物，引起感染；圍手術期抗生素使用超過2種可能存在抗生素濫用，患者容易出現(xiàn)耐藥性，既無法取得良好的預防感染效果，還可能增加術后感染風險。對于燒傷整形患者，需要從以下幾方面減少炎癥反應和感染風險，以降低血清TLR4和TREM1表達水平，進而縮短炎癥反應持續(xù)時間：①術前做好準備，盡量縮短手術時間，避免創(chuàng)面長時間暴露，同時對手術室、器械進行嚴格消毒；②合理使用抗生素，一方面應通過病原菌鑒定和耐藥檢測針對性地選擇抗菌藥物，另一方面應盡量縮短用藥時間；③燒傷整形術前應對瘢痕褶皺和殘余創(chuàng)面進行徹底清潔，去除污垢和壞死組織，術后應認真檢查是否存在殘余創(chuàng)面。

綜上所述，血清TLR4和TREM1表達水平能夠反映燒傷整形患者全身炎癥程度，并與多種因素密切相關，應控制整形手術時間，提高創(chuàng)面愈合，預防術后感染，合理使用抗生素。但本研究未對燒傷整形患者TLR4和TREM1相互作用機制進行深入探討，且由于納入病例較少，結果可能存在一定偏倚，仍需進行大樣本量和基礎性研究來確定燒傷整形患者TLR4和TREM1表達水平的臨床應用價值及影響因素。