急診血液檢驗對野生菌中毒診斷的臨床意義

姚昔友，王 進，詹學(xué)良，高 翔，徐文波，馮 磊

（玉溪市人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗科，云南玉溪 653100）

野生菌味道鮮美，營養(yǎng)價值極高，受到越來越多的民眾青睞。研究證實，野生菌中粗蛋白、礦物質(zhì)、氨基酸的含量明顯高于人工菌〔1〕。人們在享用野生菌的同時，似乎總是忽略它的潛在危害性。研究表明，云南省因食用野生菌中毒的患者逐年增多，已然成為一個嚴(yán)重威脅全省人民生命健康的公共衛(wèi)生安全問題〔2〕。2011—2017年云南省因食用野生菌中毒人數(shù)已高達7 000余人，死亡200余人〔3〕。由于人們對野生菌中毒的危害了解不夠，導(dǎo)致野生菌中毒患者就醫(yī)率不高。野生菌中毒患者可表現(xiàn)為胃腸型、溶血型、神經(jīng)型和肝損型等〔4〕。有研究表明肝損型野生菌中毒患者丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶（AST）、膽紅素明顯升高〔5〕，但對野生菌中毒患者血常規(guī)及其他檢測指標(biāo)變化未予研究。本研究對50例輕癥野生菌中毒患者血常規(guī)、電解質(zhì)、心肌標(biāo)志物水平變化情況進行研究，并與同期健康體檢人群進行比較，旨在為早期輕癥野生菌中毒的診斷提供參考，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 研究對象 將2020年6月1日至8月31日在玉溪市人民醫(yī)院急診科就診，初步診斷為野生菌中毒疑似病例患者50例（疑似野生菌中毒組）和同期健康體檢人群50例（健康體檢組）納入研究。疑似野生菌中毒的診斷依據(jù)為：①進食野生菌史；②食菌6 h以后出現(xiàn)癥狀；③排除其他食源性中毒〔6-7〕。對野生菌中毒疑似病例患者行急診血常規(guī)、急診凝血功能、急診電解質(zhì)、急診肝功能、急診心肌標(biāo)志物檢測。健康體檢者需行血常規(guī)、凝血功能、電解質(zhì)、肝功能以及心功能健康檢查。

1.2 樣本處理 抽取受檢者靜脈血2 mL于含有乙二胺四乙酸二鉀（EDTA-K2）一次性負壓真空采血管中搖勻，用于血常規(guī)檢測；抽取受檢者靜脈血3 mL于含有枸櫞酸鉀一次性負壓真空采血管中，3 000 r/min離心15 min，用于凝血功能檢測；抽取受檢者靜脈血5 mL于含有促凝劑與分離膠的一次性負壓真空采血管中，3 000 r/min離心10 min，用于電解質(zhì)、心功能、肝功能檢測。

1.3 方法 用Sysmex XN-2000全自動血細胞分析儀檢測血常規(guī)，統(tǒng)計指標(biāo)包括：白細胞計數(shù)（WBC）、中性粒細胞計數(shù)（N#）、中性粒細胞百分率（N%）、淋巴細胞計數(shù)（L#）、淋巴細胞百分率（L%）、單核細胞計數(shù)（M#）、單核細胞百分率（M%）；用Stago血凝儀檢測凝血功能指標(biāo)，主要包括：活化部分凝血活酶時間（APTT）、凝血酶原時間（PT）、凝血時間（TT）、纖維蛋白原（FBG）、纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物（FDP）、D-二聚體（D-D）；用Roche cobas 6000檢測心肌標(biāo)志物肌紅蛋白（Mb）；用ARCHITECT C16000全自動生化儀檢測電解質(zhì)碳酸氫根離子（HCO3）、肝功能。

1.4 統(tǒng)計分析 采用SPSS 22.0軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，計量資料用（±s）表示，符合正態(tài)分布的計量資料采用t檢驗；計數(shù)資料用［n（%）］表示，采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 疑似野生菌中毒患者性別、年齡及臨床癥狀分布50例疑似野生菌中毒患者中，男23例（占46%），女27例（占54%）；年齡＜30者7例（占14%），年齡介于30～60歲者37例（占74%），年齡＞60歲者6例（占12%）；臨床癥狀：惡心30例、嘔吐24例、腹瀉14例、腹痛11例、幻視23例，部分患者多種臨床癥狀共存。由此可見，疑似野生菌中毒者以30～60歲的人群為主，約半數(shù)的患者臨床癥狀表現(xiàn)為惡心、嘔吐和幻視，少數(shù)患者可出現(xiàn)腹瀉、腹痛。

2.2 兩組受檢者血常規(guī)指標(biāo)比較 與健康體檢組相比，疑似野生菌中毒組受檢者WBC、N#、N%升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；L#、L%、M%降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；M#差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。見表1。

表1 兩組受檢者血常規(guī)指標(biāo)比較（±s）

表1 兩組受檢者血常規(guī)指標(biāo)比較（±s）

注：與健康體檢組比較*P＜0.05。

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2.3 兩組受檢者凝血指標(biāo)比較 與健康體檢組相比，疑似野生菌中毒組受檢者FDP、D-D水平升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；PT、APTT、TT、FBG水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。見表2。

表2 兩組受檢者凝血指標(biāo)比較（±s）

表2 兩組受檢者凝血指標(biāo)比較（±s）

注：與健康體檢組比較*P＜0.05。

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2.4 疑似野生菌中毒組受檢者血生化檢測結(jié)果疑似野生菌中毒組受檢者中，Mb濃度降低者占70%（35/50），HCO3濃度降低者占98%（49/50），絕大多數(shù)受檢者AST、ALT水平正常。見表3。

表3 疑似野生菌中毒組受檢者血生化檢測結(jié)果［n（%）］

3 討論

隨著人們生活水平的不斷提高，越來越多的人喜歡味道鮮美的野生菌，野生菌中毒事件屢見不鮮〔8〕。由于人們在野生菌中毒后就醫(yī)率不高、就醫(yī)不及時等原因，醫(yī)生對中毒者的診斷往往只能依靠野生菌食用史和臨床癥狀，抽血化驗的目的也僅僅是為了了解患者的心功能、肝功能、腎功能、凝血功能等情況，以便對癥治療。在實際工作中發(fā)現(xiàn)，輕型野生菌中毒患者的血象、血生化和健康人之間存在明顯差異，這種差異對野生菌中毒的診斷可能有所幫助。

本研究表明，野生菌中毒患者多集中在30~60歲的中年人，且無性別差異。分析原因可能是30~60歲的中年人更喜歡食用野生菌，且出現(xiàn)中毒癥狀后就醫(yī)率更高。野生菌中毒后，主要表現(xiàn)為幻視、惡心、嘔吐，少部分表現(xiàn)為腹痛、腹瀉。在野生菌中毒分類中，幻視屬于神經(jīng)型；惡心、嘔吐、腹瀉、腹痛屬于胃腸型；ALT、AST水平嚴(yán)重升高屬于肝損型。鵝膏菌中毒后的臨床表現(xiàn)大致可分為5個時期，但這5個時期并不一定呈現(xiàn)順序發(fā)展，可能呈現(xiàn)“跳躍式”發(fā)展〔9〕。本研究結(jié)果顯示，在50例疑似野生菌中毒患者中，70%患者出現(xiàn)Mb濃度降低，98%患者出現(xiàn)HCO3濃度降低，絕大多數(shù)患者AST、ALT水平正常。在玉溪市人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗科，使用雙抗體夾心法檢測患者Mb水平，野生菌中毒患者血清Mb濃度降低的可能原因為：①鵝膏毒肽抑制肌肉蛋白代謝，從而使Mb的產(chǎn)生減少；②鵝膏毒肽競爭性抑制生物素化的抗Mb單克隆抗體和釕標(biāo)記的抗Mb單克隆抗體形成夾心復(fù)合物，使Mb含量假性降低。研究表明，α-鵝膏毒肽進入細胞，就可與RNA聚合酶Ⅱ的RNA結(jié)合蛋白亞基上的氨基酸殘基結(jié)合，破壞觸發(fā)環(huán)功能，繼而抑制真核生物的RNA聚合酶Ⅱ活性，從而抑制RNA轉(zhuǎn)錄，使得細胞生存所依賴的各種蛋白質(zhì)合成受阻，細胞發(fā)生壞死〔10〕，Mb合成也可能受到影響，從而使Mb濃度降低。HCO3濃度降低的可能原因為：鵝膏毒肽中毒后機體缺氧，呼吸加深、加快，HCO3代償性降低。研究發(fā)現(xiàn)，鵝膏菌中毒后，線粒體蛋白組含量發(fā)生了變化，其中表達下調(diào)的有細胞色素C、檸檬酸循環(huán)中的蘋果酸脫氫酶等38個蛋白〔11〕，這些變化與細胞有氧呼吸有關(guān)，糖酵解途徑會使HCO3濃度降低。本研究表明，絕大部分患者的ALT、AST水平正常，肝功能良好，這對臨床醫(yī)生遇到野生菌中毒的患者就采取保肝治療的思維模式提出質(zhì)疑，大部分輕型野生菌中毒患者無需使用保肝藥物，但是對于極少數(shù)肝損型野生菌中毒患者（如AST達1 376 mmol/L，ALT達1 553 mmol/L），建議盡快行血液凈化治療；鵝膏毒肽誘發(fā)的急性肝衰竭患者中，約有一半需要進行肝移植治療〔12〕。本研究還表明，野生菌中毒患者與健康體檢人群相比，WBC、N#、N%升高，L#、L%、M%降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。可能是因為鵝膏毒肽進入機體，刺激邊緣池中性粒細胞釋放，機體淋巴細胞在清除毒素的過程中壞死減少所致。本研究還表明，輕型野生菌中毒患者與健康體檢人群相比，F(xiàn)DP、D-D水平升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；PT、APTT、TT、FBG水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。由此可見，絕大多數(shù)野生菌中毒患者凝血功能正常，但是，野生菌中毒患者的纖溶系統(tǒng)亢進，可能與鵝膏毒肽損害微血管有關(guān)，具體機制有待進一步研究。

對疑似野生菌中毒患者，可通過血常規(guī)、電解質(zhì)、心肌標(biāo)志物、凝血功能檢查進一步確診。野生菌中毒患者WBC、N#、N%、FDP水平、D-D水平升高，L#、L%、M%、Mb濃度、HCO3濃度降低，這些指標(biāo)可能成為野生菌中毒的輔助診斷依據(jù)。目前，野生菌中毒缺少完全有效的治療措施，臨床醫(yī)生對可疑患者可通過急診血液檢驗結(jié)果進行早期識別，及時采取毒素驅(qū)除及解毒劑治療措施，必要時考慮血液凈化治療或急診肝移植。