氣相色譜-質譜法檢測蔬菜水果中4種農藥殘留量

付 彤，宋純艷，呂 峰，張雪瑛

（1.濟寧市食品藥品檢驗檢測研究院，山東濟寧 272100；2.濟寧市任城區住房和城鄉建設局，山東濟寧 272100）

隨著社會的進步，人們消費水平的提高，消費者對食品安全問題的重視程度也在不斷提升，建立準確、高效、快速的農藥殘留檢測方法至關重要[1-2]。仲丁威、五氯硝基苯、六氯苯和七氯等均是蔬菜水果種植中較常使用的農藥，本文在GB 23200.113—2018 的基礎上，改進了QuEChERS 聯用氣相色譜-質譜儀對蔬菜水果中4種農藥進行檢測的方法，使檢測結果更為快速、準確[3-5]。

1 材料與方法

1.1 試劑與儀器

農 殘 試 劑：仲 丁 威（100 μg·mL-1）、六 氯 苯（100 μg·mL-1）、七氯（100 μg·mL-1）以及五氯硝基苯（100 μg·mL-1）；內標物質：環氧七氯（100 μg·mL-1）；正己烷（色譜純）；乙腈（色譜純）。

氣相色譜質譜聯用儀；超聲波清洗機；電子分析天平；漩渦混合器；離心機。

1.2 儀器條件

1.2.1 色譜條件

色譜柱：DB-1701（30 m×0.25 mm，0.25 μm）石英毛細管柱；色譜柱溫度程序：40 ℃保持1 min，然后以30 ℃·min-1程序升溫至130 ℃，再以5 ℃·min-1升溫至250 ℃，再以10 ℃·min-1升溫至300 ℃，保持5 min；載氣為氦氣，純度≥99.999%；流速：1.2 mL·min-1；進樣口溫度：290 ℃；進樣量：2 μL；進樣方式：無分流進樣。

1.2.2 質譜條件

電子轟擊源：70 eV；離子源溫度：230 ℃；GC-MS 接口溫度：280 ℃；選擇離子監測。

1.3 標準溶液的配制

1.3.1 內標儲備溶液

準 確 吸 取 環 氧 七 氯 標 準 溶 液（100 μg·mL-1）0.5 mL 于10 mL 容量瓶中，用正己烷定容至刻度線，配制成5.00 μg·mL-1的內標儲備液。

1.3.2 混標溶液

準 確 吸 取 仲 丁 威（100 μg·mL-1）、 六 氯 苯（100 μg·mL-1）、五氯硝基苯（100 μg·mL-1）以及七氯標準溶液（100 μg·mL-1）各0.5 mL 于10 mL 容量瓶中，用正己烷定容至刻度線，配制成濃度為5.00 μg·mL-1的混標溶液。

1.3.3 標準系列溶液的配制

分別吸取混標溶液（5.00 μg·mL-1）0 mL、0.2 mL、0.4 mL、0.6 mL、0.8 mL 和1.0 mL 于10 mL 容量瓶中，用正己烷定容至刻度線，混合均勻，配制成濃度分別為0 μg·mL-1、0.1 μg·mL-1、0.2 μg·mL-1、0.3 μg·mL-1、0.4 μg·mL-1和0.5 μg·mL-1的農藥殘留標準系列溶液。

1.4 前處理方法

取均質好的樣品10 g 于50 mL 離心管中，加10 mL 乙腈和20 μL 環氧七氯內標儲備液，渦旋1 min，超聲提取10 min，添加提取鹽試劑包（6 g MgSO4+1.5 g NaOAc）， 渦 旋1 min， 并 于6 000 r·min-1離心5 min，將上清液轉移到d-SPE 凈化管（900 mg MgSO4+150 mg PSA）中，渦旋30 s，再于6 000 r·min-1離心5 min，取上清液，并用0.22 μm有機膜過濾，上機檢測。

1.5 儀器檢測

1.5.1 定性測定

用0.1 μg·mL-1的標準溶液進行上機檢測，根據1.2 的要求設置氣相色譜-質譜儀的工作條件，并在50 ～550 nm 的波長，分別對仲丁威、五氯硝基苯、六氯苯和七氯標準溶液進行全波段掃描，然后通過檢測得到的質譜圖和各農藥對應的定性離子與定量離子來確定4種農藥和內標（環氧七氯）的保留時間。

1.5.2 標準曲線

將配制好的4種農藥的混合標準液按次序放在進樣盤中，在氣相色譜-質譜儀最佳的工作條件下，進樣器精確吸取標準溶液系列（0 μg·mL-1、0.1 μg·mL-1、0.2 μg·mL-1、0.3 μg·mL-1、0.4 μg·mL-1和0.5 μg·mL-1）2 μL 注入氣相色譜-質譜聯用儀的檢測器中進行檢測，以質量濃度為橫坐標，峰面積比為縱坐標，繪制標準曲線。

1.5.3 回收率和精密度實驗

在樣品中添加3個水平的混標溶液，即準確吸取0.2 mL、0.4 mL、0.6 mL 的農藥混合標準溶液，分別加入樣品中，按照1.4 的方法對樣品和加標試樣進行前處理，將處理好的試樣上機測定，每個樣品測定兩次。

1.6 分析結果的表述

試樣中各種農藥的含量按公式（1）計算。

式中：X為試樣中某農藥的含量，mg·kg-1；C為試樣溶液中某農藥的質量濃度，μg·mL-1；V為試樣中加入的提取液的體積，mL；m為試樣稱樣量，g。

2 結果與分析

2.1 色譜分析

4種農藥和內標（環氧七氯）的出峰時間如圖1 所示，檢測結果顯示4種農藥（仲丁威、五氯硝基苯、六氯苯和七氯）以及內標（環氧七氯）的保留時間分別為12.50 min、15.27 min、14.22 min、17.85 min 及20.98 min，且色譜峰的分離度良好，符合氣相色譜法定量分析的要求。

圖1 0.1 μg·mL-1 標準溶液色譜圖

2.2 標準曲線

仲丁威、五氯硝基苯、六氯苯和七氯4種農藥的標準曲線分別為Y=5.519 32X、Y=0.794 84X、Y=10.079 6X 以及Y=3.391 83X，其相關系數分別為R2=0.997 8、R2=0.999 4、R2=0.998 1 和R2=0.998 4，且4種農藥在0 ～0.5 μg·mL-1線性關系良好。

2.3 回收率和精密度實驗

按1.5.3 方法在稱取的樣品中分別添加3個水平（0.1 μg·mL-1、0.2 μg·mL-1、0.3 μg·mL-1）的 混 合標準溶液。結果顯示，采用QuEChERS 法進行前處理后，仲丁威、五氯硝基苯、六氯苯和七氯4種農藥的加標回收率分別為97.63%～103.51%、103.62% ～ 109.53%、87.48% ～ 99.30%、93.24% ～98.88%，RSD 分 別 為0.47% ～1.03%、0.41%～2.10%、2.94%～4.57%、0.29%～4.15%，詳見表1。

表1 加標回收率和精密度

3 討論

3.1 試劑的優化

標準溶液配制時使用的定容試劑會影響上機的檢測結果。國家標準GB 23200.113—2018 中建議使用乙酸乙酯作為定容試劑，本次實驗在1.3 標準溶液配制中則采用正己烷作為定容試劑。乙酸乙酯極易揮發，容易造成樣品含量的波動，當樣品數量較多時，會降低測定的準確度；正己烷溶液的氣味較為微弱，毒性相對較小，對人體的傷害也較小，且使用正己烷作為定容試劑時對樣品中農藥含量檢測結果的準確性影響不大，因此本實驗使用正己烷作為定容試劑。

3.2 提取條件的優化

將10 mL 乙腈加入稱取好的待測樣品中，用于提取樣品中的農藥，為了使乙腈的提取效果更好，本實驗使用超聲系統來促進農藥的溶出，將加乙腈與外標的樣品于20 ℃的條件下超聲10 min，可以起到強化農藥分離提取的效果，不僅節省了時間，還提高了檢測結果的準確度。

此外，本實驗還采用了WondaPak QuEChERS 前處理試劑包，將一些高效的提取試劑和凈化處理試劑制成可直接使用的混合品，填裝在離心管中，通過簡單的離心操作，將目標組分與樣品基質快速分離，進一步簡化了提取步驟，縮短了前處理時間。

3.3 儀器條件的優化

與國家標準方法GB 23200.113—2018 相比，本實驗對色譜柱的程序升溫模式、進樣口的溫度、進樣量以及傳輸線溫度等都進行了不同程度的優化，這些優化在保證儀器靈敏度和樣品分離度的情況下，減少了實驗對儀器的損耗，有效延長了相關配件和離子源的使用壽命。

4 結論

本次實驗結果表明，改進后的QuECHERS 前處理方法能夠進一步簡化提取步驟、縮短前處理時間，還可以保證實驗結果的準確性，可在今后的日常實驗中推廣使用。