Hcy、NSE及IL-2與缺血性腦卒中急性期患者認知功能的相關性研究

陳華 錢文軍 張曉剛

1濱州醫學院附屬醫院煙臺業達醫院臨床心理科，煙臺 264003；2濱州醫學院附屬醫院煙臺業達醫院神經內科，煙臺 264003

缺血性腦卒中是指腦循環障礙導致的局限性或全面性腦功能損傷，腦功能損傷可引發吞咽障礙、大小便障礙、肢體功能障礙、認知功能障礙等［1］。認知功能障礙是指在學習、記憶、思維判斷等有關大腦高級智能加工中出現的異常狀況，認知功能障礙是缺血性腦卒中后常見的并發癥，報道顯示發病率約為20.0%～80.0%，發病率與地區、種族、診斷標準及腦卒中病情、救治水平等因素有關［2］。同型半胱氨酸（homocysteine，Hcy）是含硫氨基酸的代謝產物，研究發現Hcy可作為血管性癡呆患者神經功能缺損程度及日常生活功能水平的獨立預測因子［3］。神經元特異烯醇化酶（neuron specific enolase，NSE）是中樞神經系統的特異性標志物，腦卒中后由于中樞神經系統受損，神經細胞膜被破壞，NSE可從細胞外溢進入血腦屏障，是反應神經系統損傷的重要指標。白細胞介素-2（interleukin-2，IL-2）是炎癥指標之一，IL-2水平的大幅上升預示了炎癥級聯反應，IL-2還可與IL-6相互作用，在腦血管疾病中經氧化應激損傷，引起腦缺血灌注不足，加重腦神經病功能損傷［4］。本研究旨在明確Hcy、NSE及IL-2與缺血性腦卒中急性期（發病后1～2周）認知功能的關聯，為臨床上預防或減輕缺血性腦卒中認知功能損傷提供參考。

資料與方法

1、一般資料

本研究經煙臺業達醫院倫理委員會審批通過，患者或家屬知情并同意。（1）納入標準：①均符合《中國各類主要腦血管病診斷要點2019》［5］中關于缺血性腦卒中的診斷標準；②均為急性期患者，發病后1～2周；③發病前認知功能正常。（2）排除標準：①嚴重臟器官病變、惡性腫瘤、惡性血液系統疾病、嚴重心力衰竭、心房纖顫、呼吸衰竭等；②昏迷、休克、失聰等無法行認知功能評測者；③缺血性腦卒中發作前已存在影響認知功能疾病，如阿爾茨海默病、精神分裂、雙相情感障礙、強迫癥等；④伴腦出血、蛛網膜下腔出血等中樞神經系統疾病者；⑤精神類藥物、鎮痛類藥物濫用、酗酒、吸毒者；⑥嚴重凝血功能障礙、營養不良、感染者；⑦既往有腦卒中史、顱腦損傷史、腦手術史者；⑧患者或家屬拒絕研究內容者。選取經煙臺業達醫院神經內科2019年4月至2021年5月接收的缺血性腦卒中急性期患者122例作為研究對象，其中男70例，女52例；年齡52～84（66.67±9.16）歲；文化程度：小學及以下65例，初中33例，高中16例，大專及以上8例。

2、方法

2.1、認知功能檢測認知功能評測采用簡易智力狀態檢查量表（Mini-mental State Examination，MMSE）評測，該量表包含時間定向力、地點定向力、即刻記憶力、注意及計算力、延遲記憶、結構模仿、視覺空間共7個方面，包含30個條目，采用李克特（Likert）2級評分法評測，回答正確得1分，回答錯誤得0分，計分越高提示認知功能越好，認知功能正常：27～30分；輕度認知功能障礙：21～26分；中度認知功能障礙：10～20分，重度認知功能障礙：＜10分［6］。評測方法：由經訓練的心理咨詢師采用該量表逐項對患者開展評測，量表評測總體耗時20～30 min。

2.2、血清Hcy、NSE及IL-2檢測于發病后7～11 d抽取患者空腹靜脈血9 ml，3 000 r/min，離心10 min，離心半徑15 cm；采用酶聯免疫吸附試驗（ELISA）檢測患者血清中Hcy、IL-2、NSE水平，儀器為雅培C8000全自動生化儀，試劑盒購于美國R&D Systems公司。

2.3、基線資料調查采用自制調查表調查，社會學資料包含年齡、性別、文化程度，文化程度分為小學及以下、初中、高中、大專及以上4個水平。病史包含高血壓、高脂血癥、糖尿病，高血壓標準為收縮壓≥140 mmHg或舒張壓≥90 mmHg（1 mmHg=0.133 kPa）和/或2周內服用降壓藥［7］；高脂血癥：總膽固醇≥5.2 mmol/L或三酰甘油≥2.3 mmol/L［8］；糖尿病：典型糖尿病癥狀，伴隨機血糖≥11.1 mmol/L或空腹血糖≥7.0 mmol/L或糖化血紅蛋白（HbA1c）≥6.5%［9］；發病至認知功能評測時間：記錄患者有起病癥狀（頭痛、眩暈、乏力、黑矇、卷舌等）至認知功能評測時間。

3、統計學方法

散點分布圖繪制采用GraphPad Prism 8軟件，數據處理采用SPSS 22.0統計學軟件，計數資料采用例（%）表示，采用χ2檢驗；符合正態分布的計量資料以均數±標準差（±s）表示，多組間比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用LSD法，Hcy、NSE、IL-2與MMSE評分采用Pearson相關性分析；采用線性回歸模型分析MMSE評分的影響因子，剔除標準P≥0.10；以P＜0.05表示差異有統計學意義。

結 果

1、不同認知功能組患者的基線資料比較

122例缺血性腦卒中急性期患者于發病后7～11 d進行了認知功能評測，并分為認知功能正常組（65例）、輕度認知功能障礙組（33例）、中度認知功能障礙組（15例）、重度認知功能障礙組（9例）。4組患者的年齡、高脂血癥、糖尿病比例方面比較差異均有統計學意義（均P＜0.05）。詳見表1。

表1 不同認知功能組缺血性腦卒中急性期患者的基線資料比較

2、不同認知功能組患者的Hcy、NSE及IL-2水平比較

輕度認知功能障礙組、中度認知功能障礙組及重度認知功能障礙組的Hcy、NSE及IL-2水平均高于認知功能正常組（均P＜0.05）；重度認知功能障礙組的Hcy、NSE水平均高于輕度認知功能障礙組，差異均有統計學意義（均P＜0.05）。詳見表2。

表2 不同認知功能組缺血性腦卒中急性期患者血清指標水平比較（±s）

表2 不同認知功能組缺血性腦卒中急性期患者血清指標水平比較（±s）

注：認知功能正常為簡易智力狀態檢查量表（MMSE）評分27～30分，輕度認知功能障礙為MMSE評分21～26分，中度認知功能障礙為MMSE評分10～20分，重度認知功能障礙為MMSE評分＜10分；與其他3組比較，aP＜0.05，與中度認知功能障礙組比較，bP＜0.05；與重度認知功能障礙組比較，cP＜0.05

組別認知功能正常組輕度認知功能障礙組中度認知功能障礙組重度認知功能障礙組F值P值例數65 33 15 9同型半胱氨酸（μmol/L）18.42±4.84a 23.33±5.17c 24.88±6.15c 29.49±8.64 19.678＜0.001神經元特異烯醇化酶（ng/L）21.79±5.76a 24.28±6.12a 28.97±7.83c 33.25±8.32 13.116＜0.001白細胞介素-2（ng/L）126.64±11.89a 140.96±16.10b 150.26±8.97 145.10±15.72 20.160＜0.001

3、Hcy、NSE及IL-2與認知功能的相關性分析

Pearson相關性分析顯示，Hcy、NSE、IL-2與MMSE評分均呈顯著負相關性，相關系數分別為-0.577、-0.549、-0.498，均P＜0.001。詳見圖1。

圖1 122例缺血性腦卒中急性期患者Hcy（A）、NSE（B）、IL-2（C）水平與MMSE評分的散點分布圖

4、缺血性腦卒中急性期患者MMSE評分影響因素的線性回歸分析

以MMSE評分為因變量，年齡、Hcy、NSE、IL-2、高脂血癥、糖尿病為自變量，行線性回歸分析。年齡、Hcy、NSE、IL-2均是缺血性腦卒中急性期患者MMSE評分的影響因子（均P＜0.05）。詳見表3。

表3 122例缺血性腦卒中急性期患者MMSE評分影響因素的線性回歸分析

討 論

Hcy、NSE高表達與腦血管疾病發生后的神經功能缺損有密切關聯。Hcy是蛋氨酸與半胱氨酸的重要代謝中間產物，Hcy上升被證明與動脈粥樣硬化、腦血管疾病發生密切相關。Anniwaer等［10］的研究發現，隨Hcy水平的上升，原發性缺血性腦卒中患者的美國國立衛生研究院卒中量表（NIHSS）評分明顯下降。NSE是參與糖酵解途徑的烯醇化酶中的一種，在神經組織與神經內分泌組織中含量較高，NSE在腦細胞活性最高，且由于分子量低的特點，腦卒中后NSE可經被破壞的神經細胞膜流動至血腦屏障，誘發腦細胞凋亡；有研究發現，腦卒中患者的NSE水平顯著高于健康人群，NSE水平與患者的蒙特利爾認知評估表（MoCA）評分呈負相關性［11］。IL-2是炎性反應的調節介質，其參與了缺血性腦卒中患者的炎癥反應與免疫應答進程，IL-2可部分性的介導腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、IL-6的分泌，而TNF-α、IL-6水平的上升，可誘發或加重腦卒中患者的認知功能下降［12］。

張穎等［13］對血管性癡呆患者的Hcy檢測后發現，與健康體檢人群比較，血管性癡呆患者的Hcy水平顯著升高，Hcy與患者的MMSE評分呈負相關性，與NIHSS評分呈正相關性。研究發現，NSE與腦卒中抑郁障礙、神經功能缺損有關，而抑郁障礙、神經功能缺損被認為是認知功能降低的原因［14］。有研究發現，IL-1β、IL-6、IL-8分別與腦小血管病、帕金森、腦卒中患者的認知功能有關，IL-1β、IL-6、IL-8水平越高，患者的認知功能越差［15-17］。李國勝等［18］研究發現，腦小血管病患者血清Hcy、超敏C反應蛋白（hs-CRP）及IL-1與患者的MoCA量表各維度評分呈現顯著的負相關性，高Hcy、炎癥狀態與腦血管病患者認知功能損傷有關。缺血性腦卒中急性期患者認知功能下降的確切機制尚未完全明確，本研究顯示，輕度認知功能障礙組、中度認知功能障礙組及重度認知功能障礙組的Hcy、NSE及IL-2水平均顯著高于認知功能正常組；重度認知功能障礙組的Hcy、NSE水平均顯著高于輕度認知功能障礙組；Pearson相關性分析顯示，Hcy、NSE、IL-2與MMSE評分均呈現顯著的負相關性。說明缺血性腦卒中患者的認知功能與Hcy、NSE及IL-2密切相關，高水平的Hcy、NSE及IL-2預示了缺血性腦卒中急性期的低認知功能，這提示在缺血性腦卒中急性期管理中，調節患者的Hcy、NSE及IL-2水平，可能有助于改善其認知功能。

報道顯示，腦卒中認知功能障礙除了已知的腦卒中后帶來的神經功能缺損有關外，還與患者的基礎疾病、腦梗死部位、不良飲食習慣等因素有關［19］。趙鳳華等［20］對88例急性缺血性腦卒中后認知功能障礙的相關因素行logistic回歸分析顯示，高脂血癥、高NIHSS評分、額顳葉梗死、Nod樣受體熱蛋白結構域相關蛋白3（NLRP3）炎癥小體活化水平是腦卒中后認知功能障礙的危險性因子。一項大樣本研究發現，受教育年限、高血壓、高脂血癥、房顫與Hcy是卒中后認知功能障礙的危險性因素［21］。本研究發現，年齡、Hcy、NSE、IL-2是缺血性腦卒中急性期患者MMSE評分的影響因子，年齡、Hcy、NSE、IL-2每上升1個單位，對應的MMSE評分將下降0.343、0.345、0.280、0.049分，進一步證實了Hcy、NSE、IL-2與缺血性腦卒中急性期認知功能損傷的關聯。年齡作為缺血性腦卒中急性期認知功能損傷的危險性因子已被有關研究證實，與高齡帶來的臟器官功能衰退，卒中后神經細胞大面積損傷、腦組織微灌注不足，引起的神經功能缺損加重有關［22］。高Hcy可經細胞毒性損害、血管內皮損傷、鈣離子超載與活性氧釋放帶來的氧化應激損傷、炎性反應、動脈粥樣硬化等途徑導致認知功能下降；高NSE可直接引起神經細胞損傷、自由基損傷，引起認知功能降低；高IL-2可引起氧化應激損傷、血管內皮功能障礙、關鍵酶合成障礙、T淋巴細胞亞群異常等途徑加重血管損傷，最終導致認知功能損傷［23］。

綜上，缺血性腦卒中急性期患者認知功能損傷與Hcy、NSE、IL-2有密切關聯，Hcy、NSE、IL-2與缺血性腦卒中急性期MMSE評分呈現顯著的負相關；年齡、Hcy、NSE、IL-2是缺血性腦卒中MMSE評分的影響因子。

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突