斜紋夜蛾“葉粉因子”人工飼料的優化篩選

杜娟，于洪春

（1.內蒙古牙克石市鄉村振興促進中心，內蒙古 牙克石 022150；2.東北農業大學農學院，哈爾濱 150030）

斜紋夜蛾（Spodoptera litura）屬鱗翅目（Lepidoptera）夜蛾科（Noctuidae），具有分布范圍廣、食性雜、產卵量大、繁殖速度快、易暴發等特點，對農作物構成嚴重威脅，是亞洲乃至全世界重要的農業害蟲［1］。目前除了研究斜紋夜蛾的生物學特性及防治方法之外，還將其作為寄主昆蟲和生物靶標物種，繁育核型多角體病毒、細菌，研究害蟲抗藥性、探索害蟲生物防治技術［2-6］。為了在實驗室獲得和保持蟲源，可飼喂天然飼料和人工飼料，但斜紋夜蛾幼蟲取食量較大，在室內飼養需要大量的蔬菜或作物葉片，植株的健康、新鮮度和農藥殘留都會對斜紋夜蛾的飼養及成活造成較大影響。通常會用人工飼料繼代飼養和繁殖斜紋夜蛾，根據試驗需求提供豐富生長健康、發育整齊的蟲源。本試驗通過在人工飼料中添加常見的十字花科、禾本科、豆科和藜科雜草植株的葉粉，連續飼養多代，以篩選出飼養和配制方法簡單、價格低廉且有利于斜紋夜蛾生長發育的“葉粉因子”人工飼料。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器設備及器具儀器設備主要有人工氣候箱、中藥粉碎機、微波爐、烘干箱、高壓滅菌鍋、電子天平。器具主要有六孔養蟲板、燒杯、玻璃棒、量筒、培養皿、研缽。

1.1.2 供試蟲源供試的斜紋夜蛾來源于東北農業大學香坊農場試驗基地誘蟲燈下誘集的成蟲，放入養蟲箱中，并用脫脂棉蘸取10%的蜂蜜水置于玻璃培養皿上供成蟲補充營養，待其交尾產卵后，作為試驗蟲源。

1.1.3 試驗試劑蜂蜜，由東北農業大學國家科技園生產；蔗糖，由天津市瑞金特化學品有限公司生產；干酪素、酵母浸粉，由北京奧博星生物技術有限責任公司生產；抗壞血酸，由天津市光復精細化工研究所生產；復合維生素，由湖北百科亨迪藥業有限公司生產；紅霉素，由西安利君制藥股份有限公司生產；山梨酸，由天津市科密歐化學試劑有限公司生產；瓊脂、膽固醇均為市售。

1.2 方法

1.2.1 人工飼料的配制采集新鮮無公害的甘藍、白菜、玉米、大豆和野生藜（灰菜）（Chenopodium album）等植物的葉片，清水沖洗干凈，晾放在通風處，待葉片表面水分蒸發后均勻攤放在50～60℃的烘箱內，烘干后用粉碎機磨成粉狀。挑選長勢飽滿的玉米粒和大豆粒，自然晾干后磨成粉末，分別放入玻璃罐中，用封口膜封住，放入陰涼干燥處保存。將復合維生素和紅霉素藥粒用研缽磨成粉狀。具體用量如表1所示，方法如下。

表1 不同“葉粉因子”成分的人工飼料配方

1）滅菌。將各配方中的葉粉、麥麩粉、玉米粉、大豆粉稱量后倒入耐高溫塑料方盒中，混合均勻后蓋好蓋子，與放有無菌水的玻璃瓶，一起放入120℃高壓蒸汽滅菌鍋中，滅菌20 min。

2）溶解。將各配方中稱量好的干酪素、酵母浸粉、膽固醇、抗壞血酸、復合維生素、山梨酸、葡萄糖、韋氏鹽等試劑倒入小燒杯中混合，倒入20 mL無菌水，將其攪拌均勻。

3）混合。將瓊脂倒入燒杯中，加入90 mL無菌水，放入微波爐中加熱使其完全溶解，溶解后立即與步驟1的粉劑混合，并用玻璃棒攪拌均勻，待混合物稍許冷卻后，將步驟2的溶液緩慢倒入，繼續用玻璃棒攪拌直至混合物混合均勻，放入4℃冰箱中保存待用。

1.2.2 斜紋夜蛾的飼養與生長發育的調查收集同一天所產的新鮮卵塊，放入溫度為（26±1）℃、濕度為（70±5）%、光周期控制為L∶D=14 h∶10 h的人工氣候箱中，待有幼蟲孵化后，將配好的含有不同葉粉成分的人工飼料切割成塊狀，均勻攤放在養蟲盒底部，將初孵幼蟲用柔軟毛筆輕挑置于養蟲盒內的飼料上，每盒接入20頭幼蟲，每組處理重復3次，以飼喂新鮮白菜葉為對照（CK）。統計斜紋夜蛾幼蟲存活率，待化蛹完成后稱量蛹重，將其轉入覆有濕潤滅菌細土的養蟲盒中。羽化后將成蟲成對放入塑料產卵罐中，用10%蜂蜜水補充營養。用此飼養和調查方法在實驗室連續飼養5代。

1.3 數據的統計分析

本試驗所得各組數據間的差異性比較，采用DPS V 7.05軟件進行Duncan’s新復極差法差異顯著性檢驗。

2 結果與分析

2.1 對斜紋夜蛾幼蟲存活率的影響

在室內用不同飼料繼代飼養斜紋夜蛾，世代間幼蟲存活率的變化如表2所示。飼養第二代斜紋夜蛾時，其幼蟲存活率與第一代均無顯著差異；飼養第三代時，幼蟲存活率出現明顯下降，均顯著低于第一代幼蟲存活率；第三代至第五代幼蟲存活率之間無顯著差異。添加白菜葉粉（A3）的人工飼料第五代幼蟲存活率較第一代下降15.08個百分點，添加灰菜葉粉（A4）的人工飼料第五代幼蟲存活率較第一代下降17.06個百分點，其余組均下降18個百分點以上。

表2 斜紋夜蛾的幼蟲存活率 （單位：%）

如表3所示，取食添加不同“葉粉因子”成分人工飼料的斜紋夜蛾幼蟲的存活率5代均值均顯著高于對照。其中，添加白菜葉粉（A3）的人工飼料均值最高，為85.35%，較對照高15.02個百分點，添加灰菜葉粉（A4）的人工飼料5代幼蟲平均存活率為81.75%，與A3人工飼料無顯著差異，其余人工飼料5代幼蟲平均存活率均顯著低于A3。

表3 取食不同飼料的斜紋夜蛾5代幼蟲存活率均值

2.2 對斜紋夜蛾化蛹率及蛹重的影響

在室內用不同人工飼料繼代飼養斜紋夜蛾，各世代化蛹率的變化如表4所示，隨著飼養代數的增加，化蛹率均有所下降，飼養第五代時，化蛹率與第一代均呈顯著差異；添加白菜葉粉（A3）的人工飼料下降幅度最小，為7.70個百分點，其余處理組均下降15個百分點以上。用不同人工飼料飼養第四代和第五代斜紋夜蛾，2代間化蛹率均無顯著差異。

表4 斜紋夜蛾的化蛹率 （單位：%）

如表5所示，添加白菜葉粉（A3）的人工飼料斜紋夜蛾5代化蛹率均值最高，為79.99%，與取食其他人工飼料和對照的5代化蛹率均值均呈顯著差異。添加甘藍葉粉（A2）、灰菜葉粉（A4）、玉米葉粉（A5）、大豆葉粉（A6）和未添加葉粉（A1）的人工飼料5代化蛹率均值分別為74.69%、74.88%、72.74%、72.95%、70.68%，均與對照無顯著差異。

表5 取食不同人工飼料的斜紋夜蛾5代化蛹率均值 （單位：%）

5代蛹重均值如表6所示，添加白菜葉粉（A3）的人工飼料5代蛹重均值最高，為0.33 g，與其他處理均呈顯著差異。添加灰菜葉粉（A4）的人工飼料5代蛹重均值為0.32 g，與其他處理均呈顯著差異。添加甘藍葉粉（A2）、添加玉米葉粉（A5）和添加大豆葉粉（A6）的人工飼料與未添加葉粉（A1）和對照均無顯著性差異。說明在人工飼料中添加白菜葉粉，更有利于斜紋夜蛾蛹的發育。

表6 不同人工飼料的斜紋夜蛾5代蛹重均值 （單位：g）

2.3 對斜紋夜蛾羽化率的影響

隨著飼養代數的增加，飼喂不同人工飼料斜紋夜蛾的羽化率如表7所示，其中只有添加白菜葉粉（A3）的人工飼料斜紋夜蛾羽化率各世代間無顯著差異，其余飼料飼養到第五代時羽化率均與第一代呈顯著差異。如表8所示，A3的人工飼料斜紋夜蛾羽化率均值最高，為80.39%。添加灰菜葉粉（A4）的人工飼料斜紋夜蛾羽化率均值為79.49%，與A3無顯著差異，顯著高于其他處理。添加白菜葉粉的人工飼料各世代的羽化率最高，5代斜紋夜蛾羽化率均值也顯著高于其他處理，且隨著飼養代數的增加，羽化率無顯著變化，無退化現象。

表7 斜紋夜蛾的羽化率 （單位：%）

表8 取食不同人工飼料的斜紋夜蛾5代羽化率均值 （單位：%）

3 討論

人工飼料的配制必須得滿足昆蟲正常生長發育所需要的所有營養物質和保持代謝所需要的量的比例。研究表明，人工飼料的配比和成分會對昆蟲飼養產生影響，并且飼料的含水量、物理性狀、飼養密度、添加飼料次數、飼料pH等會對昆蟲的生長發育造成影響［7，8］，同樣，在人工飼料中添加植株的種類和植株葉片的干燥法，也會對昆蟲的生長發育起到不同程度的影響［9］。本試驗添加了山梨酸和具有廣譜抗菌效果的抗生素藥物［10］，研究發現，在室溫下，試驗用飼料無霉菌滋生，可以長時間保存，保障了人工飼料的新鮮度。幼蟲孵化后可直接接種在飼料上，解決了楊江福等［11］提出的人工飼料不適合飼養低齡斜紋夜蛾幼蟲的問題。在室內連續飼養昆蟲，無論是用天然食料還是人工飼料，昆蟲種群的生命活力都會因為遺傳因素出現不同程度的衰退現象。本研究所采用斜紋夜蛾人工飼料的配方中與孫庚等［12］的研究相比，大大減少了玉米粉、麥麩粉、大豆粉和酵母浸粉的含量，去除了乙酸和氫氧化鉀的添加，增加了膽固醇和抗壞血酸，添加了不同含量的天然植株葉粉，大大降低了飼料的合成成本。研究結果中添加白菜葉粉的人工飼料，斜紋夜蛾的化蛹率和羽化率均優于曹利軍等［13］通過正交試驗篩選出添加氯化膽堿和肌醇的最優配方。本試驗所得到斜紋夜蛾蛹的平均重量最高為0.33 g，較黃艷君等［14］所配制的人工飼料低0.14 g，這可能與飼料中添加蛋白源和糖分的含量有關。在今后的研究中可以針對飼料所含成分的比例開展進一步篩選與優化，以獲得更好的飼育效果。對于人工飼料配方的篩選，本試驗結果與張英春等［15］的飼料成分相近，可以適度推廣或在飼料中添加復合“葉因子”成分，以配制出可同時飼育多種昆蟲的人工飼料。