肺炎支原體肺炎患兒血清及肺泡灌洗液MIF 水平與氣道黏液栓的關(guān)系探討

陽池嬌，陳進喜，林業(yè)輝，張潔妍，鄭 芬，馬玉花

（佛山市婦幼保健院兒科，廣東 佛山 528000）

肺炎支原體肺炎（mycoplasma pneumonia pneumonia，MPP）是社區(qū)獲得性肺炎（community-acquired pneumonia，CAP）中常見的一種非典型肺炎，占兒童CAP 病例的10%～40%[1，2]。臨床上，一些比較難治的MPP 患兒纖維支氣管鏡下氣道黏液呈現(xiàn)出一種高分泌狀態(tài)，甚至有一些會形成大量的氣道黏液栓或支氣管塑型，導(dǎo)致氣道狹窄或者阻塞，并最終導(dǎo)致嚴重后果。同時，由于缺乏特異性的臨床和影像學(xué)表現(xiàn)，MPP 形成氣道黏液栓早期很容易造成臨床誤診和漏診。因此，如何早期診斷并及時治療對改善患兒預(yù)后具有重要的臨床意義。巨噬細胞移動抑制因子（macrophage migration inhibitory factor，MIF）是一種前炎性因子，參與多種炎癥和免疫反應(yīng)，并參與了多種呼吸系統(tǒng)疾病的發(fā)生和發(fā)展[3-5]。因此，本研究通過探討MIF 與MPP 氣道黏液栓的關(guān)系，以期為臨床診斷及病情評估提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2019 年6 月-2021 年4 月佛山市婦幼保健院兒科收治的45 例2～6 歲MPP 患兒的肺泡灌洗液（BALF）及血液標本，其中根據(jù)纖維支氣管鏡下是否觀察到黏液栓堵塞氣道[6]將MPP 患兒分為黏液栓組（一個及一個以上肺段支氣管腔內(nèi)可見黏稠分泌物呈條塊狀堵塞管腔，甚至呈塑型，不易吸出，需要借助異物鉗或細胞刷）20 例及非黏液栓組（表現(xiàn)為黏膜充血水腫、黏膜糜爛、濾泡增生、少許稀薄分泌物未形成痰栓等）25 例。另收集同期因急性氣道異物行氣管鏡檢查的20 例患兒的肺泡灌洗液（BALF）及血液標本并將其設(shè)為對照組。納入標準:①MPP 診斷標準均符合第8 版《諸福棠實用兒科學(xué)》肺炎的診斷標準[7]；②對照組患兒為氣管鏡檢查明確診斷為氣道異物的患兒。排除標準：①病程遷延，入院時病程＞2 周；②合并有早產(chǎn)、先天性心臟病或免疫功能缺陷者。MPP 黏液栓組男13 例，女7例；年齡1 歲3 個月～6 歲5 個月，平均年齡（3.42±0.76）歲。MPP 非黏液栓組男15 例，女10 例；年齡8個月～6 歲8 個月，平均年齡（3.18±0.65）歲。對照組男10 例，女10 例；年齡1～4 歲，平均年齡（2.57±0.77）歲。三組性別、年齡比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。所有患兒均經(jīng)家屬知情同意，于病程2 周內(nèi)行支氣管鏡檢查及治療，且經(jīng)過醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準。

1.2 方法

1.2.1 血清標本采集 行纖維支氣管鏡檢查及肺泡灌洗術(shù)當天清晨空腹抽外周靜脈血3 ml，在室溫放置2 h，1000 r/min 離心10 min，取血清置于-20 ℃冰箱保存用于MIF 的測定。

1.2.2 BALF 標本采集 使用纖維支氣管鏡前端插入病變管腔內(nèi)，37 ℃9 g/L 生理鹽水灌洗病變肺段（10 ml/次，總量2～5 ml/kg）3 次。隨即進行抽吸以獲取灌洗液標本入滅菌痰液收集器。灌洗液全部分裝成1.5 ml 于離心管中，3000 r/min 離心10 min，留取上清液，并將處理后標本保存于-20 ℃冰箱用于MIF 測定。

1.2.3 血清及BALF MIF 檢測 采用雙抗體夾心ELISA 法檢測血清、肺泡灌洗液MIF 水平，試劑盒由上海通蔚生物技術(shù)有限公司提供，由專人嚴格按試劑盒說明書進行操作。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 22.0 統(tǒng)計學(xué)軟件進行數(shù)據(jù)處理，計量資料采用（）表示，組間比較采用獨立樣本t檢驗或單因素方差分析，組間兩兩比較采用LSD 法；計數(shù)資料以（n）表示，組間比較采用χ2檢驗；采用Pearson 相關(guān)性分析MPP 患兒血清MIF水平與BALF MIF 水平的關(guān)系。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組血清、BALF MIF 水平比較 MPP 黏液栓組血清及BALF MIF 水平均高于MPP 非黏液栓組及對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；MPP 非黏液栓組血清及BALF MIF 水平均高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

表1 三組血清、BALF MIF 水平比較（，ng/L）

表1 三組血清、BALF MIF 水平比較（，ng/L）

2.2 MPP 患兒血清MIF 水平與BALF MIF 水平的關(guān)系 Pearson 相關(guān)性分析顯示，MPP 黏液栓組血清MIF 水平與BALF MIF 水平呈正相關(guān)（r=0.675，P＜0.05）；MPP 非黏液栓組血清MIF 水平與BALF MIF水平亦呈正相關(guān)（r=0.814，P＜0.05），見圖1、圖2。

圖1 MPP 黏液栓組血清MIF 水平與BALF MIF 水平的關(guān)系

圖2 MPP 非黏液栓組血清MIF 水平與BALF MIF 水平的關(guān)系

3 討論

氣道黏液栓是由支氣管黏膜的炎癥、壞死、出血及支氣管黏液分泌異常而致黏液排除障礙，導(dǎo)致黏液在支氣管內(nèi)積聚、結(jié)塊而形成[8]，嚴重者可發(fā)生肺不張、閉塞性細支氣管炎、支氣管擴張等并發(fā)癥，嚴重危害患兒的身體健康[9-11]。MPP 發(fā)病機制主要為病原直接損傷和其導(dǎo)致過強的免疫炎癥反應(yīng)[12，13]，首先，肺炎支原體進入呼吸道后主要通過P1 蛋白等結(jié)構(gòu)與氣道上皮細胞膜上的受體相結(jié)合，釋放毒性代謝產(chǎn)物引起氧化應(yīng)激反應(yīng)，造成黏液分泌過多及上皮細胞損傷、壞死[14，15]；其次，肺炎支原體感染機體后，引起炎性細胞浸潤和細胞因子釋放，導(dǎo)致氣道上皮細胞通透性增加及氣道壁水腫狹窄，同時促進黏液蛋白的表達[14，16]，致使分泌物增多不易排出，最終容易導(dǎo)致黏液栓堵塞氣道[17]。

MIF 是一種具有趨化功能的多效免疫調(diào)節(jié)細胞因子，參與炎癥級聯(lián)反應(yīng)。它是一種含115 個氨基酸的蛋白質(zhì)，最早在活化的T 淋巴細胞中發(fā)現(xiàn)，淋巴細胞、單核巨噬細胞是MIF 的重要來源[18，19]。MIF作為一種前炎性因子，主要作用是巨噬細胞活化功能，包括巨噬細胞的粘附、遷移、吞噬作用，還具有促炎癥反應(yīng)并促進細胞的定向遷移及其他促炎因子的釋放等功能。有研究表明[3-5]，MIF 參與了多種呼吸系統(tǒng)疾病的發(fā)生和發(fā)展，特別是炎癥的初始階段。但關(guān)于MIF 與兒童MPP 氣道黏液栓關(guān)系的研究報道甚少。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，MPP 黏液栓組血清及BALF中MIF 水平高于MPP 非黏液栓組及對照組，MPP非黏液栓組高于對照組（P＜0.05），與既往研究結(jié)果類似[20]，提示MIF 在MPP 所致的強烈炎癥反應(yīng)中發(fā)揮重要作用。同時，本研究Pearson 相關(guān)性分析顯示，MPP 黏液栓組血清MIF 水平與BALF MIF 水平呈正相關(guān)（r=0.675，P＜0.05）；MPP 非黏液栓組血清MIF 水平與BALF MIF 水平亦呈正相關(guān)（r=0.814，P＜0.05），提示血清MIF 水平有可能作為MPP 黏液栓形成早期診斷的較敏感指標應(yīng)用于臨床。

綜上所述，MIF 可能參與MPP 發(fā)病過程，特別是MPP 黏液栓的形成，早期檢測血清MIF 水平對MPP 黏液栓形成的判斷及治療決策具有重要的參考價值。