血清Dickkopf-1、血管內皮生長因子水平對非小細胞肺癌的診斷效能及與患者臨床特征的關系

聶鳳英，焦曉寧，王偉

1 濮陽市中醫醫院檢驗科，河南 濮陽 457000

2 河南省胸科醫院檢驗科，鄭州 450000

非小細胞肺癌（non-small cell lung carcer， NSCLC）是常見的肺癌類型，因該病早期無特異性臨床癥狀，超過70%的患者確診時病情已進展至中晚期，術后復發和轉移風險隨病情進展逐漸升高，總生存率也逐漸降至20%，嚴重威脅患者的生命健康[1]。早期診斷NSCLC，明確疾病嚴重程度及轉移情況，并采取合適的措施有效控制，才能進一步提高治療效果，從而改善患者的預后[2]。目前，臨床主要通過檢測血清腫瘤標志物診斷NSCLC，但血清腫瘤標志物檢測存在靈敏度、特異度低等不足，在NSCLC的早期診斷中的效果不明顯[3]。因此，找到理想的NSCLC診斷、療效和預后評估的指標成為臨床研究的重點。血清Dickkopf-1（DKK1）為DKK家族成員之一，是臨床近年來發現的一種抑癌基因，可直接參與腫瘤的發生、發展過程[4]。血管內皮生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）是促腫瘤血管生成的因子之一，目前已有大量研究證實，VEGF與腫瘤的發生、發展、轉移和新生血管生成有關[5]。基于此，本研究探討血清DKK1、VEGF水平對NSCLC的診斷效能及與患者臨床特征的關系，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年10月至2021年10月濮陽市中醫醫院收治的NSCLC患者。納入標準：①符合《中國臨床腫瘤學會（CSCO）：非小細胞肺癌診療指南2020》[6]中關于NSCLC的診斷標準；②經病理學檢查證實為NSCLC；③TNM分期為Ⅰ~Ⅳ期；④臨床資料完整。排除標準：①合并其他惡性腫瘤；②合并免疫性或代謝性疾病；③因嚴重精神疾病存在認知功能障礙。根據納入和排除標準，本研究共納入136例NSCLC患者作為觀察組，其中男70例，女66例；年齡26~86歲，平均（53.87±5.34）歲；TNM分期：Ⅰ期42例，Ⅱ期38例，Ⅲ期36例，Ⅳ期20例；病理類型：鱗狀細胞癌60例，腺癌64例，腺鱗癌12例；分化程度：低分化50例，中分化42例，高分化44例。另選取同期濮陽市中醫醫院收治的100例肺部結節患者作為對照組，其中男52例，女48例；年齡25~87歲，平均（54.12±5.13）歲。兩組患者性別、年齡比較，差異均無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。本研究經醫院倫理委員會批準通過，所有患者均知情同意并簽署知情同意書。

1.2 檢測方法

抽取兩組患者空腹肘靜脈血5 ml，靜置30 min后3000 r/min離心15 min，取上清液后-70℃保存待檢，采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附試驗檢測DKK1和VEGF水平，操作步驟嚴格遵守試劑盒說明書。DKK1水平＞119.56 pg/L判定為陽性，VEGF水平＞142 pg/ml判定為陽性。

1.3 統計學方法

采用SPSS 20.0軟件對所有數據進行統計分析，正態分布計量資料以均數±標準差（±s）表示，組間比較采用兩獨立樣本t檢驗，組內比較采用配對t檢驗；計數資料以例數和率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗；繪制受試者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲線，計算曲線下面積（area under the curve，AUC），評估血清DKK1、VEGF單獨及聯合檢測對NSCLC的診斷效能；以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 血清DKK1、VEGF陽性表達情況的比較

觀察組患者血清DKK1、VEGF陽性表達率均明顯高于對照組，差異均有統計學意義（P＜0.01）。（表1）

表1 兩組患者血清DKK1、VEGF陽性表達情況的比較[n（%）]

2.2 血清DKK1、VEGF單獨及聯合檢測對NSCLC的診斷效能

血清DKK1+VEGF檢測診斷NSCLC的AUC為0.832（95%CI：0.289~0.846），此時的靈敏度、特異度分別為98.21%、91.67%。（表2）

表2 血清DKK1、VEGF單獨及聯合檢測對NSCLC的診斷效能

2.3 不同臨床特征NSCLC患者血清DKK1、VEGF陽性表達情況的比較

不同性別、年齡、病理類型、腫瘤直徑NSCLC患者血清DKK1、VEGF陽性表達率比較，差異均無統計學意義（P＞0.05）。分化程度為低分化、TNM分期為Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴結轉移、有骨轉移的NSCLC患者血清DKK1、VEGF陽性表達率分別明顯高于分化程度為中高分化、TNM分期為Ⅰ~Ⅱ期、無淋巴結轉移和無骨轉移患者，差異均有統計學意義（P＜0.01）。（表3）

表3 不同臨床特征NSCLC患者血清DKK1、VEGF陽性表達情況的比較（n=136）

3 討論

中晚期NSCLC患者的5年生存率隨著病情進展而降低，這可能是因為中晚期NSCLC已出現侵襲轉移，而腫瘤的侵襲轉移主要由多種抑癌基因和致癌基因共同參與調控[7]。因此，尋找預測NSCLC侵襲轉移的分子標志物，明確NSCLC的發生、發展和轉移機制，可有效抑制疾病進展，提高生存率。但癌胚抗原、細胞角質蛋白19片段抗原21-1（cyto-keratin 19 fragment antigen 21-1，CYFRA21-1）等血清腫瘤標志物預測NSCLC發生、發展和轉移的靈敏度和特異度均低于80%，預測結果可信度較低，無法滿足臨床需求[8-9]。

研究認為，腫瘤的生長對血管存在依賴性，VEGF作為促新生血管生成的細胞因子之一，逐漸成為臨床研究的熱點[10-11]。也有研究認為，DKK1在肺癌中高表達，有望為肺癌早期診斷、治療及預后的預測提供參考[12-13]。本研究結果顯示，觀察組患者血清DKK1、VEGF陽性表達率均明顯高于對照組，提示血清DKK1、VEGF陽性表達與NSCLC的發生存在一定關聯。與黃麗珍等[14]的研究結果一致，該研究顯示，NSCLC患者血清VEGF水平明顯高于肺部良性疾病患者，表明NSCLC的發生與新生血管生成有關。這可能是因為，VEGF可刺激血管內皮細胞增殖和移行，促進血管內皮細胞有絲分裂和轉移，重塑細胞外基質，增加血管通透性，促使大量腫瘤血管新生，加速腫瘤的發生發展[15-16]。DKK1作為分泌型糖蛋白，可阻斷WNT/β-catenin信號轉導通路，調控細胞分化、增殖和遷移過程，促使腫瘤細胞迅速增殖[17-18]。

此外，TNM分期、分化程度、淋巴結轉移和骨轉移情況等均與腫瘤進展密切相關，TNM分期越高、分化程度越低，腫瘤進展的越快，隨之出現淋巴結轉移或骨轉移，而腫瘤進展過程中常會分泌大量的細胞因子和促血管生成因子，導致腫瘤細胞異常增殖，且DKK1對WNT/β-catenin信號通路的阻斷可直接參與腫瘤細胞增殖和侵襲過程，因此NSCLC患者分期越高、分化程度越低、存在淋巴結轉移和骨轉移等，均會導致血清DKK1、VEGF異常表達。本研究結果顯示，分化程度為低分化、TNM分期為Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴結轉移、有骨轉移的NSCLC患者血清DKK1、VEGF陽性表達率分別明顯高于分化程度為中高分化、TNM分期為Ⅰ~Ⅱ期、無淋巴結轉移和無骨轉移患者。與李銀鵬等[19]、王林輝等[20]的研究結果相似，李銀鵬等[19]研究發現，不同TNM分期、淋巴結轉移和骨轉移情況肺癌患者血清DKK1水平存在差異。王林輝等[20]研究發現，不同分化程度、淋巴結轉移、器官轉移和臨床分期NSCLC患者的血清VEGF水平存在顯著差異。表明血清DKK1、VEGF水平與NSCLC嚴重程度、器官轉移情況密切相關，可通過檢測血清DKK1、VEGF水平對NSCLC患者的預后進行評估。但葉颯等[21]的研究發現，NSCLC高分化和中低分化患者的血清VEGF水平無明顯差異，與本研究結果相反，這可能與本研究納入的樣本量較少有關。

目前臨床對DKK1+VEGF聯合檢測對NSCLC診斷價值的研究較少，本研究結果發現，血清DKK1+VEGF檢測 診 斷NSCLC的AUC為0.832（95%CI：0.289~0.846），此時的靈敏度、特異度分別為98.21%、91.67%，高于二者單獨檢測。提示血清DKK1、VEGF聯合檢測對NSCLC的診斷價值較高，可在一定程度上提高診斷準確度，在早期NSCLC中發揮十分重要的作用。

本研究尚存在一些不足，如樣本量較少，且為單中心回顧性研究。建議后續開展大樣本量、多中心的前瞻性研究，進一步驗證本研究結果。

綜上所述，NSCLC患者血清DKK1、VEGF的陽性表達率較高，且與NSCLC患者臨床分期、分化程度、淋巴結轉移情況和骨轉移情況有關，血清DKK1、VEGF聯合檢測對NSCLC患者的診斷價值較高。