輔助性T細胞亞群、超敏C-反應蛋白和免疫球蛋白E對患兒哮喘急性發作合并呼吸道病毒感染的診斷價值

寧利佳，任曉紅

(1.楊凌示范區醫院兒科，陜西 楊凌 712100；2.寶雞市婦幼保健院兒童呼吸科，陜西 寶雞 721000)

哮喘是兒童常見呼吸道疾病之一，其本質是多種細胞及其組分參與的慢性非特異性炎癥性疾病。呼吸道病毒感染是以噴嚏、咽痛、發熱、鼻塞、流涕等為主要臨床表現的外感疾病，是兒科發病率最高的疾病之一，可通過含有病原體的飛沫等進行傳播[1-2]。哮喘急性發作合并呼吸道病毒感染患兒在臨床上比較常見，其病情進展迅速，嚴重者可導致死亡，更需及早防治[3]。研究表明哮喘是一種免疫失衡性疾病，其發病的關鍵機制普遍認為是輔助性T淋巴細胞(Th1/Th2)平衡失調，外周血CD4+輔助性T細胞可調控淋巴細胞發揮免疫作用，反映人體免疫系統功能狀態[4-5]。超敏C-反應蛋白(Hight-sensitivity C-reactive protein，hs-CRP)是一種主要由肝臟合成的蛋白質，正常條件下處于極低水平，而炎癥、感染以及創傷等發生可導致其水平劇增[6]。IgE是機體免疫反應中重要因子，可作為臨床檢測標志物，可輔助判斷患兒的病情與預測預后[7-8]。本文具體探討了CD4+輔助性T細胞、hs-CRP和IgE在哮喘急性發作合并呼吸道病毒感染患兒中的診斷價值及預后價值，以明確單項指標檢測與多項指標聯合檢測的價值，促進哮喘急性發作合并呼吸道病毒感染的早期檢出。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2017—2020年接診的72例哮喘急性發作合并呼吸道病毒感染患兒(合并組)，同期選擇72例單純哮喘急性發作患兒(對照組)。病例納入標準：①年齡4～10歲；②均確診為哮喘急性發作和(或)呼吸道病毒感染患兒；③患兒家屬均知情同意且經本院倫理委員會批準。排除標準：①嚴重并發癥(心力衰竭、呼吸衰竭等)患兒；②家族特異性疾病史患兒；③免疫功能低下或嚴重佝僂病等患兒；④慢性肺疾病、先天性氣道畸形患兒。兩組一般資料比較無統計學差異(均P>0.05)，具有可比性。見表1。本研究患者及家屬簽署知情同意書且經醫院倫理委員會批準。

表1 兩組患兒一般資料比較

1.2 檢測方法

1.2.1 CD4+輔助性T細胞檢測：采集患兒空腹靜脈血3～5 ml，抗凝管中保存。分離外周血單個核細胞，陰性分選CD4+輔助性T細胞。將100 μl CD4+輔助性T細胞加入流式細胞管，加入1 μl抗人CD28抗體，避光孵育30 min，采用PBS洗滌后進行重懸，采用流式分析儀檢測CD4+輔助性T細胞占比。

1.2.2 血清hs-CRP和IgE檢測:取1.2.1中的血液學樣本，不抗凝，常規分離血清，采用超敏C反應蛋白(hs-CRP)測定試劑盒(膠乳增強免疫比濁法)(北京百奧泰康有限公司)檢測血清中hs-CRP含量，IMMAGE 800特種蛋白分析儀及配套試劑[貝克曼庫爾特(美國)股份有限公司]檢測血清IgE含量。

2 結 果

2.1 兩組CD4+輔助性T細胞比例、血清hs-CRP和IgE含量比較 合并組的CD4+輔助性T細胞比例、IgE含量低于對照組(P<0.05)，血清hs-CRP含量高于對照組(P<0.05)，見表2。

表2 兩組CD4+輔助性T細胞比例、血清hs-CRP和IgE含量比較

2.2 相關性分析 兩組患兒中，Pearson分析顯示CD4+輔助性T細胞比例、hs-CRP、IgE含量與呼吸道病毒感染存在相關性(均P<0.05)，見表3。

表3 CD4+輔助性T細胞比例、hs-CRP、IgE含量與哮喘急性發作合并呼吸道病毒感染的相關性(n=144)

2.3 預測效能 ROC曲線顯示CD4+輔助性T細胞比例、hs-CRP、IgE與聯合檢測預測復發的曲線下總面積為0.742、0.766、0.797、0.876，見表4。

表4 三者單項及聯合檢測對哮喘急性發作合并呼吸道病毒感染的預測效能

3 討 論

哮喘是一種以肥大細胞、T淋巴細胞和嗜酸性粒細胞浸潤為主的慢性反復發作性疾病，伴有巨噬細胞、淋巴細胞等參與的氣道慢性炎癥性疾病。呼吸道病毒感染是常見的外感疾病，氣候驟變及冬春季節發病率較高。該病多為自限性疾病，如防治不及時，很多患兒可伴隨有疾病惡化，部分患兒也可病情變化迅速，導致嚴重的預后，為此加強早期診治具有的價值[9-10]。本研究顯示合并組的CD4+輔助性T細胞比例、血清IgE含量低于對照組，血清hs-CRP含量高于對照組(均P<0.05)。輔助性T細胞具免疫調節功能，可維持機體的免疫穩態和控制自身免疫病進展[11]。CD4+輔助性T細胞具有細胞毒性T細胞效應，可調控免疫應答及免疫耐受[12]。hs-CRP是由肝臟、肺泡巨噬細胞以及腎臟等器官合成或誘導表達的一種急性期反應物。hs-CRP可通過與凋亡細胞膜磷脂或炎癥因子結合，發揮激活補體以及調理吞噬等功能。相關研究顯示：hs-CRP在呼吸道病毒感染發病初期其水平顯著升高，而隨著病情好轉，其水平可快速恢復至正常水平[13]。

臨床上哮喘與呼吸道病毒感染是常見的聯合病，流行病學調查證實50%左右的哮喘患兒伴有呼吸道感染[14]。本研究顯示，Pearson分析顯示CD4+輔助性T細胞比例、hs-CRP、IgE含量與呼吸道病毒感染存在相關性(P<0.05)。從機制上分析，CD4+占比下降，可導致T細胞平衡及調控功能異常，從而影響機體正常免疫功能，可誘發呼吸道病毒感染的發生[15]。hs-CRP可增強機體吞噬細胞的吞噬作用，對中性粒細胞具有調節作用，并誘導內皮細胞促炎因子的表達。IgE含量下降可誘導嗜酸性粒細胞的增殖與激活，能降低Th2淋巴細胞介導的特異性免疫反應，從而加重患兒的病情[16]。現代研究表明哮喘是一種慢性氣道炎癥疾病，其發病與呼吸道病毒感染、遺傳、過敏性體質、環境因素等存在相關性。特別是學齡前兒童的哮喘發作與呼吸道病毒感染有關，呼吸道合胞病毒是呼吸道感染常見的病毒之一，也是兒童、老年人和免疫功能低下患者患病和死亡的重要誘因之一。特別是在空調環境下，室內各種致病原、空氣不流通可使得一些呼吸道病毒被患兒吸入呼吸道，造成呼吸道感染，導致氣道反應性增高，誘發哮喘。鼻病毒是當前比較常見的呼吸道病原體，可導致上呼吸道感染與下呼吸道感染的發生，并引起喘息、哮喘加重和肺炎的發生，也是導致兒童出現哮喘急性發作。盡管呼吸道的核心溫度為37.0 ℃，但是鼻病毒在33.0～35.0 ℃時復制效果最佳，尤其下呼吸道可為鼻病毒繁殖發展提供了理想的環境。尤其是在鼻病毒感染過程中，病毒會在15 min內黏附到呼吸道的細胞表面受體，從而誘發呼吸道感染的發生，最終誘發哮喘的發生[17]。

呼吸道病毒感染是哮喘患兒的常見合并疾病，若發病患兒在早期診治不當，可導致機體出現心肌炎、支氣管炎、肺炎等嚴重并發癥[18]。由于該病進展迅速且缺乏特異性的臨床特征，因此血清學檢測對該疾病診斷及預后評估具有重要意義[19-20]。本研究ROC曲線顯示CD4+輔助性T細胞比例、hs-CRP、IgE與聯合檢測預測復發的曲線下總面積為0.742、0.766、0.797、0.876，表明CD4+輔助性T細胞比例、hs-CRP、IgE與聯合檢測在哮喘急性發作合并呼吸道病毒感染患兒中的診斷具有很好的價值。本研究的不足之處在于所納入樣本數量較少，且本單位開展檢測的該疾病血清特異性指標有限，未能對所研究指標在哮喘急性發作合并呼吸道病毒感染患兒中的變化機制進行探討，將在后續研究中延長納入樣本年限擴大樣本量，并對其他相關指標展開深入分析。

總之，CD4+輔助性T細胞、hs-CRP和IgE在哮喘急性發作合并呼吸道病毒感染患兒中呈現異常表達情況，與呼吸道病毒感染的發生顯著相關。