誘導(dǎo)性抗-S聯(lián)合抗-Wra抗體致疑難配血分析*

熊玉琪，董 珀，鄒 昕，虞 茜，楊紅梅△

江蘇省常州市中心血站：1.檢測(cè)中心；2.輸血研究室，江蘇常州 213003

天然產(chǎn)生的抗-A和抗-B是人血清或血漿中唯一規(guī)則存在的紅細(xì)胞抗體，其他所有抗體均稱為“紅細(xì)胞意外抗體”(不規(guī)則抗體)。紅細(xì)胞不規(guī)則抗體已成為影響輸血安全、血型鑒定及交叉配血不合的重要原因之一。我國(guó)僅少數(shù)血站將獻(xiàn)血者不規(guī)則抗體篩查列為常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目。本文對(duì)1例誘導(dǎo)性抗-S聯(lián)合抗-Wra抗體致疑難配血進(jìn)行了分析。

1 資料與方法

1.1一般資料 患者，男，年齡65歲，無(wú)輸血史及藥物史，因肝門膽管惡性腫瘤、梗阻性黃疸入院，入院查體血紅蛋白80 g/L，總膽紅素208.1 μmol/L，直接膽紅素179.6 μmol/L。交叉配血不合、直接抗人球蛋白試驗(yàn)陽(yáng)性送至本血站進(jìn)行特殊配血；兩個(gè)月后因嚴(yán)重貧血，血紅蛋白47 g/L再次送檢，申請(qǐng)?zhí)厥馀溲?/p>

1.2儀器與試劑 久保田KA-2200血清學(xué)專用離心機(jī)，37 ℃恒溫水浴箱。單克隆抗-A、抗-B(批號(hào)：20190814)，抗-C(批號(hào)：20193001)，抗-c(批號(hào)：20193101)，抗-E(批號(hào)：20203201)，抗-e(批號(hào)：20193301)，抗-S(批號(hào)：20191102)，抗-IgG+C3d(批號(hào)：20195001)，抗-IgG(批號(hào)：20195101)，抗-C3d(批號(hào)：20195201)，國(guó)產(chǎn)譜細(xì)胞(批號(hào)：20207011)，以上試劑均來(lái)自上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司；酸放散試劑(上海申型醫(yī)學(xué)科技公司，批號(hào)：20192103)，抗人球蛋白檢測(cè)卡(強(qiáng)生公司，批號(hào)：AHC156H)，進(jìn)口抗篩細(xì)胞(匈牙利REAGENS，批號(hào)：702007)，進(jìn)口譜細(xì)胞1(匈牙利REAGENS，批號(hào)：732007)，進(jìn)口譜細(xì)胞2(Sanquin，批號(hào)：8000450711)，凝聚胺試劑盒(珠海貝索，批號(hào)：A191003)。

1.3方法 采用試管法進(jìn)行ABO及Rh分型鑒定，Coombs試驗(yàn)，抗體鑒定試驗(yàn)及酸放散試驗(yàn)進(jìn)行特異性抗體鑒定，在鹽水、凝聚胺介質(zhì)和經(jīng)典抗人球法進(jìn)行交叉配血，所有實(shí)驗(yàn)嚴(yán)格按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》及試劑說(shuō)明書進(jìn)行。

2 結(jié) 果

2.1血型鑒定及抗人球?qū)嶒?yàn)結(jié)果 患者血型為O型，Rh表型為CcDEe。Coombs實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1，患者血清中含有IgG類不規(guī)則抗體，其特異性有待進(jìn)一步鑒定。

表1 Coombs實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.2抗體鑒定

2.2.1初次鑒定 使用進(jìn)口譜細(xì)胞1進(jìn)行初次不規(guī)則抗體鑒定。受自身抗體影響，凝聚胺介質(zhì)下及放散液與各譜細(xì)胞均有強(qiáng)凝集；強(qiáng)生卡中各細(xì)胞反應(yīng)凝集強(qiáng)弱不同，但無(wú)清晰格局，無(wú)法確認(rèn)不規(guī)則抗體類型。考慮本站實(shí)驗(yàn)條件有限，將患者標(biāo)本送至上海市血液中心檢測(cè)，結(jié)果反饋不規(guī)則抗體無(wú)特異性。

2.2.2再次鑒定 兩個(gè)月后再次送檢，抗體特異性鑒定使用進(jìn)口譜細(xì)胞2。患者血清在抗人球介質(zhì)中1、3、5、7、10、11、12、15號(hào)細(xì)胞反應(yīng)，對(duì)照格局表分析得出患者血清存在IgG和IgM類抗-S抗體，同時(shí)5號(hào)和16號(hào)細(xì)胞反應(yīng)陽(yáng)性說(shuō)明患者血清同時(shí)存在抗-Wra抗體。

2.3配血方案 首次鑒定不規(guī)則抗體無(wú)特異性，進(jìn)行同型配血。選取O型，Rh分型為CcDEe血液進(jìn)行鹽水、凝聚胺和抗人球介質(zhì)配血，結(jié)果均有凝集(強(qiáng)度1+)，配血不合；進(jìn)一步分析反應(yīng)格局表，抗人球介質(zhì)中有部分反應(yīng)較強(qiáng)的篩選細(xì)胞，選取與上述篩選細(xì)胞無(wú)反應(yīng)或反應(yīng)弱的ccDEE表型O型紅細(xì)胞進(jìn)行交叉配血，鹽水、抗人球介質(zhì)下配血反應(yīng)均為陰性，凝聚胺介質(zhì)下為陽(yáng)性(強(qiáng)度1+)。因抗體特異性不明，鹽水和抗人球介質(zhì)相合的血液僅供緊急輸血(首次鑒定獻(xiàn)血者未輸注紅細(xì)胞)。再次送檢時(shí)不規(guī)則抗體鑒定格局清晰，選取抗-S陰性、ABO、Rh同型紅細(xì)胞進(jìn)行配血。雖存在自身抗體干擾使凝聚胺介質(zhì)下反應(yīng)呈陽(yáng)性(強(qiáng)度2+)，排除特異性抗體的同型血液可應(yīng)用于糾正患者貧血。

3 討 論

MNSs血型是臨床重要性僅次于Rh的血型系統(tǒng)。有研究報(bào)道，在中國(guó)S抗原的陰性率為93.44%，為多態(tài)性抗原[1]。抗-S抗體大多為免疫產(chǎn)生，與輸血、妊娠相關(guān)，是經(jīng)抗原刺激后產(chǎn)生的同種抗體[2]，很少為自然產(chǎn)生。抗-S引起輸血性溶血和新生兒溶血均有報(bào)道，臨床意義較大[3]。Wra屬于Digeo血型系統(tǒng)，在中國(guó)人中陽(yáng)性率<0.01%，且與對(duì)偶抗原Wrb無(wú)多態(tài)性分布，均為Wrb純合子。Wra雖為低頻抗原但其抗體為常見抗體，且多為非免疫性抗體。既往文獻(xiàn)報(bào)道中抗-Wra多與其他不規(guī)則抗體共同出現(xiàn)，自身溶血性貧血患者約1/3含有抗-Wra抗體，也可單獨(dú)引起輸血性溶血和新生兒溶血反應(yīng)[4-5]。這提示，即使為低頻抗原在臨床輸血及鑒定中也應(yīng)高度重視。

不規(guī)則抗體的產(chǎn)生和鑒定一直是輸血安全的重要課題。除妊娠、異體輸血等免疫途徑外，也有部分不規(guī)則抗體為自然產(chǎn)生。此外，部分疾病患者可因病毒感染、藥物治療或免疫性疾病進(jìn)展產(chǎn)生不規(guī)則抗體。病程進(jìn)展與不規(guī)則抗體的產(chǎn)生、鑒定的相關(guān)性目前尚無(wú)研究。本文患者無(wú)明顯的輸血史等免疫刺激，血清中檢測(cè)出IgM和IgG型抗-S和抗-Wra抗體，推測(cè)患者可能受環(huán)境中類似抗原刺激，機(jī)體在免疫亢進(jìn)狀態(tài)下產(chǎn)生相應(yīng)抗體；也可能是疾病導(dǎo)致患者S抗原減弱。患者首次進(jìn)行抗體鑒定時(shí)，檢測(cè)出自身抗體及未知同種抗體，可能是患者免疫調(diào)節(jié)異常導(dǎo)致。此外，因?qū)嶒?yàn)方法對(duì)抗體濃度的要求無(wú)法排除首次鑒定時(shí)抗-S及抗-Wra抗體并未產(chǎn)生[6]。再次檢測(cè)時(shí)，抗體反應(yīng)格局清晰，且反應(yīng)強(qiáng)度增強(qiáng)。對(duì)比前后兩次的實(shí)驗(yàn)結(jié)果不難發(fā)現(xiàn)抗體檢測(cè)濃度與患者疾病的進(jìn)展相關(guān)，其是否有助于判斷疾病的進(jìn)程需要進(jìn)一步的擴(kuò)大樣本研究。同時(shí)，建議臨床患者的不規(guī)則抗體鑒定可通過(guò)不同間隔期抗體鑒定進(jìn)行明確。

為保障輸血安全，不規(guī)則抗體篩查是必不可少的環(huán)節(jié)。有研究報(bào)道，不規(guī)則抗體多見于實(shí)體瘤和血液病患者，可能與異體輸血、藥物治療及免疫功能紊亂有關(guān)[7-9]。對(duì)于不規(guī)則抗體篩查陽(yáng)性患者，部分明確抗體類型的應(yīng)使用同型無(wú)相應(yīng)抗原且配血相合的紅細(xì)胞；部分未知同種抗體的患者則盡量不輸血。確實(shí)需要輸血治療的患者在配血時(shí)建議ABO、Rh(D、C、E、c、e)同型配血，可規(guī)避絕大多數(shù)同種抗原[10]。同時(shí)結(jié)合譜細(xì)胞反應(yīng)格局，規(guī)避與格局相近抗原，為疑難配血的緊急用血配合積累經(jīng)驗(yàn)。

綜上所述，對(duì)擬行輸血治療患者開展不規(guī)則抗體篩查十分重要，尤其是實(shí)體瘤、血液病等患者。在遇到低頻抗體時(shí)，需評(píng)估其臨床意義盡量規(guī)避抗原輸注。實(shí)體瘤等免疫功能異常患者的不規(guī)則抗體鑒定時(shí)間和間隔期值得進(jìn)一步研究。遇到未知抗體的疑難配血，可緊密結(jié)合譜細(xì)胞反應(yīng)格局多做分析嘗試。