乳腺癌T 淋巴細(xì)胞及CD68+腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞浸潤的臨床病理觀察

徐鋼

腫瘤微環(huán)境對乳腺癌發(fā)生、發(fā)展有重要作用,其中T 淋巴細(xì)胞、腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞(tumour-associated macrophages,TAM)一直備受關(guān)注［1］。T 淋巴細(xì)胞是主要免疫效應(yīng)細(xì)胞,TAM 是豐富的免疫細(xì)胞,可抑制T 細(xì)胞免疫功能［2］。本文就本院2019 年8 月～2020 年12 月初治乳腺癌患者為例,分析術(shù)后組織標(biāo)本檢測情況、T 淋巴細(xì)胞與CD68+TAM 浸潤等臨床病理價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 研究對象為2017 年8 月～2020 年12 月本院的60 例初治乳腺癌患者,患者中,年齡最小35 歲,最大73 歲,平均年齡(50.50±6.50)歲；腫塊直徑：≤3 cm 患者35 例,＞3 cm 患者25 例。

1.2 納入及排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：①患者未行新輔助治療；②倫理委員會批準(zhǔn)；③患者知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：①血液疾病患者；②其他惡性腫瘤患者［3］。

1.3 方法 免疫組織化學(xué)法檢測T 淋巴細(xì)胞、CD68+TAM、Ki-67 蛋白,組織標(biāo)本以多4%聚甲醛固定液固定、脫水、石蠟包埋,連續(xù)切片。二甲苯脫蠟,檸檬酸緩沖液進(jìn)行抗原修復(fù),3%過氧化氫溶液浸泡10 min,磷酸緩沖液(PBS)沖洗3 次,恒溫箱孵育30 min。分別滴加鼠抗人CD3、CD68 以及Ki-67 單克隆抗體,室溫孵育1 h。PBS 洗3 次后滴加二抗工作液,室溫20 min。PBS 洗3 次,DAB 顯色。評估染色結(jié)果,細(xì)胞膜上黃色、棕黃色T 淋巴細(xì)胞為陽性細(xì)胞。CD68+染色陽性,即細(xì)胞漿有黃色、棕黃色巨噬細(xì)胞。安排2 名經(jīng)驗(yàn)豐富、責(zé)任心強(qiáng)的病理科醫(yī)師,顯微鏡高倍鏡視野下選取表達(dá)集中視野計(jì)數(shù),取平均值,中位值為標(biāo)準(zhǔn),分為高于、低于中位值的高、低表達(dá)。Ki-67 結(jié)果評估,胞核染色呈棕黃色。選取高倍視野,顯微鏡下計(jì)數(shù)腫瘤細(xì)胞,計(jì)算胞核染色細(xì)胞占例。

1.4 觀察指標(biāo) 比較不同Ki-67 增殖指數(shù)患者的T 淋巴細(xì)胞、CD68+TAM 表達(dá)情況,分析T 淋巴細(xì)胞數(shù)和CD68+TAM 數(shù)與臨床特征的關(guān)系。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS21.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同Ki-67 增殖指數(shù)患者的T 淋巴細(xì)胞、CD68+TAM 表達(dá)情況比較 Ki-67 增值指數(shù)≥14%、≥20%、≥30%患者的T 淋巴細(xì)胞低表達(dá)率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；Ki-67 增殖指數(shù)≥50%患者的T 淋巴細(xì)胞低表達(dá)率85.71%高于Ki-67 增值指數(shù)≥14%患者,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；Ki-67 增殖指數(shù)≥14%、≥20%、≥30%、≥50% 患者 的CD68+TAM低表達(dá)率對比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。見表1。

表1 不同Ki-67 增殖指數(shù)患者的T 淋巴細(xì)胞、CD68+ TAM表達(dá)情況比較［n(%)］

2.2 T 淋巴細(xì)胞數(shù)和CD68+TAM 數(shù)與臨床特征的關(guān)系分析 不同年齡、組織學(xué)分級、HER2(-或+)患者的T 淋巴細(xì)胞數(shù)比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；腫塊直徑≤3 cm 患者的T 淋巴細(xì)胞數(shù)高于＞3 cm 患者,淋巴轉(zhuǎn)移陰性患者的T 淋巴細(xì)胞數(shù)高于陽性患者,ER+患者的T 淋巴細(xì)胞數(shù)高于ER-患者,PR+患者的T 淋巴細(xì)胞數(shù)高于PR-患者,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。不同腫塊直徑、ER(-或+)、PR(-或+)患者的CD68+TAM 數(shù)比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；年齡≤51 歲患者的CD68+TAM 數(shù)高于＞51 歲患者,組織學(xué)分級Ⅲ級患者的CD68+TAM 數(shù)高于Ⅰ～Ⅱ級患者,淋巴轉(zhuǎn)移陽性患者的CD68+TAM 數(shù)高于陰性患者,HER2+患者的CD68+TAM 數(shù)高于HER2-患者,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見表2。

表2 T 淋巴細(xì)胞數(shù)和CD68+ TAM 數(shù)與臨床特征的關(guān)系分析(±s,個/HPF)

表2 T 淋巴細(xì)胞數(shù)和CD68+ TAM 數(shù)與臨床特征的關(guān)系分析(±s,個/HPF)

注：與同項(xiàng)內(nèi)其他類別比較,aP＜0.05

3 討論

近幾年隨著生活、工作壓力加大等,導(dǎo)致乳腺癌的發(fā)病率呈遞增趨勢［4］。臨床工作中發(fā)現(xiàn),腫瘤免疫微環(huán)境會影響乳腺癌的進(jìn)展［5］。T 淋巴細(xì)胞是腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞的主要類型,可以直接殺死腫瘤細(xì)胞、改善免疫功能［6］。但于腫瘤微環(huán)境中處在被抑制狀態(tài),導(dǎo)致腫瘤浸潤T 淋巴細(xì)胞活性低,如何實(shí)現(xiàn)功能正常、數(shù)量穩(wěn)定是改善腫瘤微環(huán)境的重要條件。TAM 是腫瘤免疫微環(huán)境中最豐富的免疫細(xì)胞,可促進(jìn)腫瘤進(jìn)展、免疫逃逸［7］。TAM 表面表達(dá)多種特異抗原在乳腺癌浸潤免疫細(xì)胞中比例高,能促進(jìn)乳腺癌疾病進(jìn)展。CD3+是糖蛋白受體,表達(dá)于成熟T 細(xì)胞表面［8］。T 淋巴細(xì)胞是炎癥反應(yīng)、腫瘤免疫效應(yīng)細(xì)胞,具有殺傷腫瘤細(xì)胞的價(jià)值。乳腺癌情況下,腫瘤細(xì)胞啟動了細(xì)胞免疫應(yīng)答機(jī)制,阻礙了腫瘤細(xì)胞增殖,延緩腫瘤疾病惡化。CD68+表達(dá)于巨噬細(xì)胞表面,組織內(nèi)代表總TAM［9］。結(jié)合本文研究,乳腺癌浸潤T 淋巴細(xì)胞越少則Ki-67增值指數(shù)越高,CD68+TAM越多則Ki-67增值指數(shù)越高,Ki-67 是判斷腫瘤增殖的主要標(biāo)志。相關(guān)研究指出,乳腺癌浸潤C(jī)D68+TAM 與乳腺癌進(jìn)展關(guān)系密切,助于預(yù)測乳腺癌生物學(xué)行為、免疫治療潛干預(yù)靶點(diǎn),促進(jìn)乳腺癌患者早期治療、預(yù)后［10］。

綜上所述,乳腺癌浸潤C(jī)D68+TAM 與乳腺癌進(jìn)展具有密切關(guān)系,可以根據(jù)患者病情狀況開展治療,促進(jìn)患者預(yù)后。