糖尿病足患者FGF-2、Lp-PLA2及IGF-1水平與病情的 相關性分析

張 城， 費春霞， 付 琳， 高辰飛， 倪冬英

（浙江中醫藥大學附屬嘉興中醫院檢驗科，浙江 嘉興 314001）

2型糖尿?。╰ype 2 diabetes mellitus，T2DM）是一種慢性代謝性疾病，主要由胰島素分泌不足或胰島素抵抗所致。當T2DM患者周圍神經及外周血管發生病變后，會引發足部感染、潰瘍或深層組織破壞等一系列癥狀，稱為糖尿病足[1]，其主要臨床表現為足部疼痛、行走困難及足部畸形等，嚴重時可導致截 肢[2]。因此，早期診治對于改善糖尿病足患者預后意義重大。有研究結果顯示，血清成纖維細胞生長因子2（fibroblast growth factor 2，FGF-2）、脂蛋白相關磷脂酶 A2（lipoproteinrelated phospholipase A2，Lp-PLA2）及胰島素樣生長因子-1（insulin-like growth factor-1，IGF-1）與胰島素抵抗、炎癥反應等病理變化密切相 關[3-4]，但目前尚缺乏FGF-2、Lp-PLA2、IGF-1與糖尿病足病情嚴重程度相關性的研究。為此，本研究擬探討糖尿病足患者FGF-2、Lp-PLA2及IGF-1水平變化，及其與病情嚴重程度的相關性，為糖尿病足的診治提供參考。

1 材料和方法

1.1 研究對象

選取2019年1月—2020年12月浙江中醫藥大學附屬嘉興市中醫院收治的糖尿病足患者120例（糖尿病足組），其中男69例、女51例，年齡32～79歲。參照Wagner分級標準[0級為皮膚完整，存在足潰瘍危險；1級為皮膚表面潰瘍；2級為潰瘍程度加深，可至肌腱或韌帶；3級為伴有深度感染，累及骨組織發生病變或膿腫；4級為局部（足前端或足趾端）壞疽；5級為全足或足中后部分壞疽][5]將糖尿病足患者分為0～1級組（40例）、2～3級組（48例）、4～5級組（32例）。另選取同期浙江中醫藥大學附屬嘉興市中醫院確診的單純T2DM患者60例（T2DM組），其中男34例、女26例，年齡36～80歲。以同期浙江中醫藥大學附屬嘉興市中醫院體檢健康者60名作為正常對照組，其中男31名、女29名，年齡37～76歲。各組之間年齡、性別差異均無統計學意義（P＞0.05）。本研究經浙江中醫藥大學附屬嘉興中醫院倫理委員會批準（批準號：2018-JZLK-119），所有對象均簽署知情同意書。

1.2 納入和排除標準

1.2.1 納入標準 （1）糖尿病足依據《糖尿病足診治指南》[6]中的診斷標準確診；（2）單純T2DM患者依據2013年版《中國2型糖尿病防治指南》[7]確診；（3）臨床資料完整。

1.2.2 排除標準 （1）近1個月內有抗菌藥物治療史；（2）合并嚴重心、肝、腎、肺功能不全；（3）凝血功能異常；（4）患有其他感染性疾?。唬?）患有惡性腫瘤；（6）患有精神疾?。唬?）無法配合本研究實驗方案。

1.3 方法

記錄所有對象年齡、性別、身高、體質量、糖尿病病程等一般資料，計算體質量指數（body mass index，BMI）。

采用促凝管采集所有患者入院當天或次日清晨、正常對照者體檢當天清晨的空腹靜脈血 5 mL，2 200×g離心10 min，分離血清，置于-20 ℃ 冰箱保存。樣本從采集至保存在4 h內完成。

采用cobas 8000 C702全自動生化分析儀（瑞士羅氏公司）及配套試劑檢測總膽固醇（total cholesterol，TC）、低密度脂蛋白膽固醇（low-density lipoprotein cholesterol，LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（high-density lipoprotein cholesterol，HDL-C）。

采用D100全自動糖化血紅蛋白分析儀（美國伯樂公司）檢測糖化血紅蛋白（glycated hemoglobin A1c，HbA1c）水平。采用酶聯免疫吸附試驗檢測血清FGF-2、Lp-PLA2及IGF-1水平，試劑盒購自上海邦景實業有限公司，檢測儀器為ST-360型酶標儀（上?？迫A公司）。

1.4 統計學方法

使用SPSS 20.0軟件進行統計分析。呈正態分布的計量資料以x±s表示，2個組之間比較采用t檢驗，多組間比較采用方差分析，兩兩比較采用LSD-t檢驗。計數資料以例或率表示，組間比較采用χ2檢驗。采用Spearman相關分析評價FGF-2、Lp-PLA2及IGF-1與Wagner分級的相關性。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 糖尿病足組、T2DM組和正常對照組一般資料比較

糖尿病足組和T2DM組HbAlc、LDL-C水平顯著高于正常對照組（P＜0.05），HDL-C水平顯著低于正常對照組（P＜0.05）。糖尿病足組糖尿病病程顯著長于T2DM組（P＜0.05），HDL-C水平顯著低于T2DM組（P＜0.05）。各組之間BMI、TC差異均無統計學意義（P＞0.05）。見表1。

表1 糖尿病足組、T2DM組和正常對照組一般資料比較

2.2 糖尿病足組、T2DM組及正常對照組血清FGF-2、Lp-PLA2及IGF-1水平比較

正常對照組、T2DM組及糖尿病足組血清FGF-2、Lp-PLA2水平依次升高（P＜0.05），血清IGF-1水平依次降低（P＜0.05）。見表2。

2.3 不同Wagner分級各組FGF-2、Lp-PLA2及IGF-1水平比較

0～1級組、2～3級組、4～5級組血清FGF-2、 Lp-PLA2水平依次升高（P＜0.05），血清IGF-1水平依次降低（P＜0.05）。見表3。

表2 糖尿病足組、T2DM組和正常對照組血清FGF-2、Lp-PLA2及IGF-1水平比較

表3 不同Wagner分級各組血清FGF-2、Lp-PLA2及IGF-1水平比較

2.4 糖尿病足患者血清FGF-2、Lp-PLA2及IGF-1水平與Wagner分級的相關性

血清FGF-2、Lp-PLA2水平與Wagner分級呈正相關（r值分別為0.652、0.665，P＜0.05），血清I G F-1水平與Wa g n e r分級呈負相關 （r=-0.643，P＜0.05）。見圖1～圖3。

圖1 糖尿病足患者血清FGF-2水平與Wagner分級的相關性

圖2 糖尿病足患者血清Lp-PLA2水平與Wagner分級的相關性

圖3 糖尿病足患者血清IGF-1水平與Wagner分級的相關性

3 討論

近年來，隨著人們生活方式及飲食結構的變化，T2DM發生率呈持續上升趨勢，其主要并發癥糖尿病足的發生率也隨之升高[8]。目前，糖尿病足的發病機制仍不完全明確，可能與糖脂代謝障礙、炎癥反應、血管內皮功能受損等病理改變有關[9]。

FGF-2具有促進血管新生、內皮細胞分化的作用。PUSPASARI等[10]的研究結果顯示，FGF-2表達增加可促進糖尿病創傷性潰瘍小鼠傷口愈合，可能與FGF-2可促進有絲分裂，激活絲裂原蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MEK）/細胞外信號調節激酶（extracellular regulated protein kinase，ERK）信號通路和磷酸肌醇-3（phosphatidylin-ositol-3-kinase，PI3K）/蛋白激酶B（protein kinase B，PKB；又稱Akt）信號通路有關。Lp-PLA2是由成熟單核細胞和巨噬細胞合成、分泌的新型炎癥標志物，可通過水解低密度脂蛋白生成游離脂肪酸、溶血卵磷脂，刺激機體內皮細胞生成炎癥細胞因子，導致血管內皮功能受損，誘導脂肪、肌肉組織產生胰島素抵抗。錢超等[11]的研究結果顯示，糖尿病足潰瘍患者Lp-PLA2、白細胞介素18水平顯著升高，動態檢測Lp-PLA2、白細胞介素18水平對了解糖尿病足的疾病進展有重要意義。IGF-1是一種單鏈多肽類生長因子，具有參與新生血管形成及胰島素代謝等生物學作用[12]。IGF-1受體是一種跨膜受體酪氨酸激酶，LIN等[13]的研究結果顯示，IGF-1受體被IGF-1激活時可表現出自我磷酸化活性，導致胰島素受體底物磷酸化，啟動細胞增殖途徑；同時，IGF-1可刺激Akt信號通路，促進角膜上皮細胞生長，有助于眼部創傷愈合。由此可見，FGF-2、Lp-PLA2、IGF-1可能與糖尿病足潰瘍的嚴重程度有關。

本研究結果顯示，正常對照組、T2DM組及糖尿病足組血清FGF-2、Lp-PLA2水平依次升高（P＜0.05），血清IGF-1水平依次降低（P＜0.05）。提示FGF-2、Lp-PLA2、IGF-1可能參與了糖尿病足的發生。原因可能是：因糖尿病足患者機體長期處于高糖環境，導致晚期糖基化終末產物（advanced glycation endproduce，AGE）翻譯后修飾FGF-2，使其轉變為糖化FGF-2，且糖化FGF-2絲裂原活性降低，會導致下游ERK1/2信號通路被過度激活，細胞增殖與凋亡進程異常，最終導致血清FGF-2水平上升[13]；另外，血清FGF-2水平上升還可能與糖尿病足創面愈合過程中自身保護性反饋機制有關[14]。有研究發現，Lp-PLA2水平變化與胰島素抵抗密切相關，是胰島素抵抗的獨立危險因 素[15]。在炎癥狀態下，Lp-PLA2水平升高，可加快低密度脂蛋白水解，刺激內皮細胞分泌炎癥因子，發揮促凋亡作用，造成血管內皮損傷，誘發胰島素抵抗。作為一種慢性炎癥，糖尿病足患者機體Lp-PLA2水平顯著升高，由此推斷Lp-PLA2可能通過參與增強機體胰島素抵抗等機制來參與糖尿病足的發生、發展。尚濤等[16]的研究結果顯示，糖尿病足患者血清IGF-1水平下降可能與高血糖的抑制作用有關。IGF-1可通過促進機體攝取葡萄糖，抑制糖原分解，并阻礙肝臟糖異生；IGF-1水平過低，會造成機體血糖水平升高，兩者相互影響，形成惡性循環；同時，IGF-1水平下降可能會影響神經細胞正常生理再生和病理損傷修復進程，導致糖尿病足患者創面愈合過程受到阻礙，在一定程度上加快了糖尿病足病情進展[17]。

本研究結果顯示，隨著糖尿病足患者病情的加重，FGF-2、Lp-PLA2水平顯著升高，IGF-1水平顯著降低；FGF-2、Lp-PLA2水平與Wagner分級呈正相關（r值分別為0.652、0.665，P＜0.05），血清IGF-1水平與Wagner分級呈負相關（r=-0.643，P＜0.05）。提示FGF-2、Lp-PLA2及IGF-1與糖尿病病情進展密切相關，隨著糖尿病病情的加重，高血糖、炎癥環境可持續刺激機體FGF-2、Lp-PLA2水平升高，IGF-1水平下降，導致胰島素抵抗、炎癥反應和內皮功能受損程度加劇，進一步加重病情。

綜上所述，FGF-2、Lp-PLA2及IGF-1水平與糖尿病足疾病進展密切相關，可能參與了糖尿病足的發生、發展。檢測血清FGF-2、Lp-PLA2及IGF-1水平有助于判斷糖尿病足病情的嚴重程度。