微/納米氣泡水對鹽脅迫下水稻幼苗的影響

李麗芳，許江環，袁啟東，梁均業，何梓峰，謝 平，周鴻凱

(廣東海洋大學濱海農業學院，廣東湛江 524088)

目前，土壤鹽堿化越來越嚴重，亞洲鹽堿地面積約為2.9×108hm2，中國鹽漬土壤約有3 333萬hm2，約占耕地面積的10%[1]。水稻是重要的糧食作物，全世界近1/2的人口以稻米為主食，中國以稻米為主糧的人約占總人口的2/3，水稻播種面積占糧食種植面積的27%左右[2]，土壤鹽堿化影響我國水稻種植，也威脅糧食安全。鹽脅迫會導致植物植株高度變矮、葉面積變小、分蘗減少，從而降低光合效率[1-2]，所以大多數植物不能生長在鹽堿土壤上。水稻為不耐鹽作物，但科學家通過不懈努力，培育出耐鹽水稻品種。耐鹽水稻可作為先鋒作物，修復與改良鹽堿農田，所以對耐鹽水稻進行研究有重要意義[3]。為了在鹽堿土壤上種水稻，前人在育種、土壤改良等方面做了多種研究，結果表明添加某些試劑進行灌溉，可以緩解鹽脅迫下水稻的鹽漬毒害作用[4-6]，獲得較好的收成。

微/納米氣泡水是近年日本開發的一項新技術，通過特定裝置使氣體(根據需要可以是空氣、O2、O3、N2、CO2)以微米或納米級直徑的氣泡溶解于水中，形成的“溶液”為微/納米氣泡水。微米氣泡的直徑在1～50 μm，納米氣泡直徑在1 μm 以下，兩者統稱為微/納米氣泡。微/納米氣泡粒徑小、比表面積超大、氣體溶解能力強，能夠提高氣液之間的反應速度[7]，微/納米氣泡水氧含量增加且氣泡分布均勻，保持時間較長，可以增加水中生物體的活性。微/納米氣泡水的應用首先是在海水養殖上，研究表明通過使用充氧微/納米氣泡水，可以解決水體缺氧問題，有效降低魚類死亡率，提高抵抗力[7]。在作物栽培領域，研究表明用微/納米氣泡水浸種可以提高發芽率，進行灌溉可以提高農產品的產量與品質[8-13]。

若給鹽脅迫下水稻幼苗使用微/納米氣泡水增氧，也可能提高水稻幼苗生理活性，增加耐鹽性。目前鮮見有關微/納米氣泡水增氧對鹽脅迫下水稻幼苗生長影響的報道。鑒于此，筆者選用1個模式水稻品種和1個耐鹽水稻品種進行增氧和非增氧培育，進行鹽脅迫和非鹽脅迫處理，研究微/納米氣泡水增氧對水稻幼苗的影響，探究緩解鹽脅迫對水稻幼苗毒害的方法。

1 材料與方法

1.1 試驗材料供試水稻品種為9311和JX99，由廣東海洋大學濱海農業學院提供。微/納米氣泡水使用禹創環境科技(濟南)有限公司生產的納米氣泡發生裝置(YC-MNB-Ⅲ-1)制作。

1.2 試驗方法試驗共設4個處理：處理1(T1)為Yoshida營養液+蒸餾水；處理2(T2)為Yoshida營養液+微/納米氣泡水；處理3(T3)為0.6% NaCl+ Yoshida營養液+蒸餾水；處理4(T4)：0.6% NaCl + Yoshida營養液+微/納米氣泡水，每處理3次重復。

試驗于2020年9月在廣東海洋大學濱海農業學院110實驗室進行。選取籽粒飽滿、大小一致的種子，用3%的過氧化氫溶液浸泡消毒30 min，用蒸餾水反復沖洗后置于培育盆中催芽。種子露白，胚根大約長至3 cm時，播于水稻專用水培盆(每盆有6個小板，每一小板可種96株)中，萌發后用Yoshida營養液+蒸餾水或者Yoshida營養液+微/納米氣泡水培育，每3 d更換1次培育液，用1.0和0.1 mol/L的H2SO4和KOH調節pH至5.5～5.8，每盆使用2 L配置的混合液進行處理，在使用營養液培育12 d后，加0.6% NaCl處理3 d后取樣、測定。

1.3 測定項目與方法測定項目包括幼苗生長性狀指標與生化指標，幼苗生長性狀指標包括莖長、根長、莖鮮重、根鮮重、葉片數、莖基寬，生化指標有脯氨酸含量、丙二醛(MDA)含量。每處理取10株幼苗測量幼苗生長性狀指標，每處理取6張幼苗葉片，測量幼苗生化指標。莖長、根長用直尺測定；鮮重用天平稱重；莖基寬采用數顯卡尺(美耐特公司制造)測量；脯氨酸含量采用磺基水楊酸法測定；丙二醛(MDA)含量采用硫代巴比妥酸法測定。

1.4 數據處理方法采用Excel 2010進行數據統計與繪畫；采用SPSS 22.0軟件進行顯著性分析；采用最小顯著極差法(LSD)進行差異顯著性檢驗(P<0.05)。

2 結果與分析

2.1 微/納氣泡水對鹽脅迫下水稻幼苗性狀的影響

2.1.1對水稻品種9311幼苗性狀的影響。從表1可以看出，T2處理的根長、莖鮮重、莖基寬顯著小于T1處理，分別減少24.87%、12.20%和12.50%。T1和T2處理間的莖長、根鮮重、葉片數沒有顯著差異，說明在無鹽脅迫下，微/納米氣泡水增氧顯著抑制9311幼苗根的伸長和莖的生長。

從表1可以看出，T3處理的根長、莖鮮重、莖基寬顯著小于T1處理，分別減少18.56%、42.68%和17.65%。T1和T3處理間莖長、根鮮重、葉片數沒有顯著差異。這說明鹽脅迫下，9311幼苗的根長、莖鮮重和莖基寬顯著減小。

表1 不同處理對9311幼苗的性狀指標的影響

T4處理的根長、莖鮮重、根鮮重顯著小于T3處理，分別減少45.16%、46.81%和38.64%。T3和T4處理間的莖長、葉片數、莖基寬沒有顯著差異。這說明鹽脅迫下，微/納米氣泡水增氧使9311幼苗的根長、莖鮮重和根鮮重顯著減小。

2.1.2對水稻品種JX99幼苗性狀的影響。從表2可以看出，T2處理的根長、葉片數顯著大于T1處理，分別增加31.76%、21.88%。T1和T2處理間莖長、根鮮重、莖鮮重、莖基寬間沒有顯著差異，說明無鹽脅迫下，微/納米氣泡水增氧使JX99幼苗(幼苗)的根長、葉片數顯著增大。

表2 不同處理對JX99幼苗的性狀指標的影響

T3處理的根長顯著小于T1處理，減小10.94%。T1和T3處理間莖鮮重、根鮮重、葉片數、莖基寬沒有顯著差異，說明鹽脅迫下，JX99幼苗的根長顯著減小。

T4處理的莖長、根長、莖鮮重、根鮮重顯著小于T3處理，分別減少28.09%、35.67%、67.97%和55.43%。T4和T3處理間葉片數、莖基寬沒有顯著差異，說明鹽脅迫下，微/納米氣泡水增氧使JX99幼苗的根長、莖長、莖鮮重和根鮮重顯著減小。

品種9311與JX99幼苗的性狀在各種處理中表現有相同之處也有不同之處。相同之處是在鹽脅迫下使用微/納米氣泡水增氧，2個品種幼苗的生長指標(根長、莖鮮重、根鮮重)顯著變小；不同之處是在無鹽脅迫下，微/納米氣泡水增氧使JX99幼苗有些生長指標(根長、葉片數)顯著增大，而9311幼苗有些生長指標(根長、莖鮮重和莖基寬)顯著變小，說明在無鹽脅迫下，微/納米氣泡水增氧對不同品種水稻幼苗生長指標的影響不同。

注：每盆左邊1列為9311,右邊1列為JX99

2.2 微/納氣泡水與鹽脅迫對水稻幼苗丙二醛(MDA)含量的影響一般植物在逆境條件下會產生膜質過氧化，細胞膜受傷害，丙二醛(MDA)含量表示細胞膜受傷害程度[14]。由圖2可知，品種9311與JX99在各處理中，MDA含量有相同的變化也有不同的變化。與T1處理相比，T2處理2個品種的MDA含量都顯著降低，分別減少41.19%、15.85%。與T1處理相比，T3處理2品種的MDA含量變化不同，9311減少7.61%，但差異不顯著；JX99增加20.19%，兩者差異顯著。與T3處理相比，T4處理2個品種的MDA含量都顯著增加，分別增加46.25%、36.11%。這說明在鹽脅迫下，用微/納米氣泡水增氧，2個品種幼苗的細胞膜質過氧化程度增高，活性氧的傷害增大。

注: 不同小寫字母表示在0.05水平差異顯著

2.3 微/納氣泡水與鹽脅迫對水稻幼苗脯氨酸含量的影響在干旱、鹽漬等脅迫條件下，許多植物體內脯氨酸大量積累[15]。由圖3可知，品種9311與JX99在各處理中，幼苗脯氨酸含量的變化相近，都是T4處理最大，T3處理次之，兩者間差異顯著；T1與T2處理較小，兩者間無顯著差異。與T1處理相比，T3處理2個品種的脯氨酸含量顯著增加，分別增加102.75%、60.72%。與T3處理相比，T4處理2個品種的脯氨酸含量都顯著增加，分別增加85.63%、131.64%，說明在鹽脅迫下，用微/納米氣泡水增氧，水稻幼苗所處的脅迫環境加劇，對幼苗的傷害也加大。

注：不同小寫字母表示在0.05水平差異顯著

2.4 微/納氣泡水與鹽脅迫下水稻幼苗指標的相關性

2.4.1水稻品種9311幼苗指標的相關性。由表3可知，9311幼苗的性狀指標中，莖長、根長、莖基寬、根鮮重、莖鮮重間都呈正相關，其中根長與莖長、莖基寬、根鮮重、莖鮮重間都呈極顯著正相關，莖鮮重與莖長、莖基寬呈極顯著正相關。

表3 微/納氣泡水與鹽脅迫下9311幼苗指標的相關系數

MDA和脯氨酸含量與幼苗的生長性狀指標間都呈負相關，說明水稻幼苗體內的MDA和脯氨酸含量增加，莖長、根長、莖基寬、根鮮重、莖鮮重等生長性狀指標減小。脯氨酸含量與莖長、莖基寬間呈顯著負相關，與根長、莖鮮重間呈極顯著負相關；MDA含量與莖長、莖鮮重間呈顯著負相關。MDA含量與脯氨酸含量間呈極顯著正相關。

2.4.2水稻品種JX99幼苗指標的相關性。由表4可知，JX99幼苗的性狀指標中，莖長、根長、莖基寬、根鮮重、莖鮮重間都呈正相關，其中根鮮重、莖鮮重與根長、莖長呈極顯著正相關，根鮮重與莖鮮重間呈極顯著正相關。

表4 微/納氣泡水與鹽脅迫下JX99幼苗指標的相關系數

MDA和脯氨酸含量與幼苗的性狀指標都呈負相關，說明水稻幼苗體內的MDA和脯氨酸含量增加，莖長、根長、莖基寬、根鮮重、莖鮮重等性狀指標減小。脯氨酸和MDA含量與莖長、根長、莖鮮重間呈極顯著負相關。MDA含量與脯氨酸含量間呈極顯著正相關。

3 結論與討論

正常情況下，植物的根進行有氧呼吸，若在富氧環境下對改善植物根的功能、促進微生物活動以及礦物質的轉化、提高對營養物質的吸收都有重要意義[8]。水稻的根進行有氧呼吸，主要是吸收溶解在水中的氧，增氧灌溉提高水稻產量[13]。該研究用微/納米氣泡水與營養液對水稻幼苗進培育，使JX99幼苗根長、葉片數顯著增大，部分生長性狀指標更優，與其他研究一致，但使9311水稻幼苗的根長、莖鮮重和莖基寬顯著減小，部分性狀變差，說明微/納米氣泡水增氧時，不同的水稻品種幼苗表現不同，也可能是不同的水稻品種幼苗對微/納米氣泡水增氧濃度有不同的反應，因此需進一步研究。

在鹽脅迫時，植物體內會產生大量的活性氧，促進植物膜脂過氧化作用，增加MDA含量[14]。在鹽脅迫下產生滲透脅迫，植物為了維持較高的細胞質滲透壓以便吸水，積累一定數量的可溶性有機物，如脯氨酸。因此在鹽分脅迫下脯氨酸含量增加[15]。該研究中在0.6% 鹽脅迫下，9311的MDA含量沒有顯著變化，但JX99顯著增加，說明不同品種有不同的反應。2個品種的脯氨酸含量顯著增加，與其他研究一致。

該研究試圖通過微/納米氣泡水增加水稻幼苗根際的氧含量，提高根活力來提高幼苗的耐鹽性。但研究結果顯示，在鹽脅迫下，微/納米氣泡增氧使9311水稻幼苗根長、莖鮮重、根鮮重顯著減小，使JX99水稻幼苗的根長、莖長、莖鮮重、根鮮重顯著減小，2個品種水稻幼苗生長指標均變差。2個品種水稻幼苗MDA含量都顯著增大，水稻幼苗的脯氨酸含量都顯著增大。生化指標也反映微/納米氣泡增氧使細胞膜質過氧化程度加大，加劇滲透脅迫。鹽脅迫下，用微/納米氣泡水增氧培育加劇水稻幼苗傷害的原因，需今后進一步研究。