動(dòng)物源性降糖肽的研究進(jìn)展

馬昕悅，劉鳴雨，李 熔，薛 勇,

（1.國(guó)家糧食產(chǎn)業(yè)（青稞深加工）技術(shù)創(chuàng)新中心，中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與營(yíng)養(yǎng)工程學(xué)院，北京 100083；2.國(guó)家果蔬工程技術(shù)加工中心，中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與營(yíng)養(yǎng)工程學(xué)院，北京 100083）

糖尿病是一組以高血糖為特征的代謝性疾病，由胰島素分泌缺陷或其作用受損，或兩者兼有引起。2019年全球約有4.63億糖尿病人，其中90%為2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus，T2DM）[1]。T2DM 在中國(guó)的發(fā)病率較高[2]，已成為我國(guó)主要的公共衛(wèi)生問(wèn)題之一。糖尿病會(huì)引起許多并發(fā)癥，如引發(fā)各種感染，誘發(fā)多器官功能障礙綜合征[3]、脊髓損傷[4]，還會(huì)引起脂代謝紊亂，增加腦卒中[5]、眼底視網(wǎng)膜病變[6]的風(fēng)險(xiǎn)。此外，T2DM還會(huì)造成抑郁、焦慮等心理疾病[7]。然而糖尿病暫無(wú)根治方法，患者需通過(guò)長(zhǎng)期服藥來(lái)控制[8]。近年來(lái)隨著食源性功能肽輔助治療慢性病的逐漸興起，大量研究發(fā)現(xiàn)動(dòng)物食品中廣泛存在降糖肽，這些肽未來(lái)可能用于糖尿病的輔助治療。基于此，本文對(duì)動(dòng)物源性降糖肽的現(xiàn)有成果進(jìn)行綜述，為預(yù)防和輔助治療糖尿病及相關(guān)功能性食品的開發(fā)提供理論依據(jù)。

1 食源性降糖肽

1.1 食源性降糖肽靶點(diǎn)

降糖肽主要的作用機(jī)理是抑制糖代謝過(guò)程中的關(guān)鍵酶，其中α-葡萄糖苷酶和DPP-4一直是關(guān)注的焦點(diǎn)。食源性活性肽主要通過(guò)氫鍵、極性和疏水性作用，與酶催化位點(diǎn)上的氨基酸結(jié)合，從而產(chǎn)生競(jìng)爭(zhēng)性抑制。α-葡萄糖苷酶可將食物中的大分子碳水化合物分解成單糖，單糖會(huì)進(jìn)入血液使血糖升高，故α-葡萄糖苷酶抑制劑通過(guò)抑制相應(yīng)酶的活性，延緩碳水化合物吸收，繼而減少葡萄糖的產(chǎn)生，達(dá)到降低餐后血糖的目的[9]。此外，腸促胰素分為胰高血糖素樣肽-1（glucagon-like peptide-1，GLP-1）和葡萄糖依賴性促胰島素分泌多肽（glucose-dependent insulinotropic polypeptide，GIP），兩者均能作用于胰島β細(xì)胞，促進(jìn)胰島素分泌、胰島β細(xì)胞再生和增殖[10]。而GLP-1會(huì)快速被機(jī)體中廣泛存在的DPP-4降解，半衰期僅為2 min[11]。因此，抑制DPP-4的活性可延緩GLP-1的降解，繼而改善胰島功能。對(duì)DPP-4的抑制主要通過(guò)活性肽與其催化活性位點(diǎn)D192、E192和R253結(jié)合，使酶結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，無(wú)法作用于GIP和GLP-1的二肽尾，從而提高內(nèi)源性GLP-1和GIP水平，最終達(dá)到降低血糖的效果[9]。

1.2 食源性肽制備方法

食源性降糖肽的制備方法有酶解法、微生物發(fā)酵法和人工合成法[12]，其中酶解法應(yīng)用最為廣泛。酶的專一性強(qiáng)，故水解時(shí)應(yīng)注意選擇適當(dāng)種類的酶，一般選擇一種酶進(jìn)行水解或多種酶復(fù)合水解。常用的有中性蛋白酶、堿性蛋白酶、胰蛋白酶、糜蛋白酶、木瓜蛋白酶、風(fēng)味蛋白酶等。此外，酶活性受環(huán)境條件影響較大，若要達(dá)到最佳的酶解效果，需將溫度和pH控制為最適條件。其他反應(yīng)條件如底物濃度、酶濃度、酶解時(shí)間、超聲輔助提取時(shí)間等會(huì)對(duì)多肽得率產(chǎn)生影響，由于酶解對(duì)象不同，這些條件的最佳值需要通過(guò)實(shí)驗(yàn)優(yōu)化得到。酶解過(guò)程中蛋白質(zhì)水解為短肽鏈，消化率提高，從而最大程度地保留食品的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，同時(shí)，酶解法具有反應(yīng)條件溫和、無(wú)不良副反應(yīng)、反應(yīng)進(jìn)程易控制等優(yōu)點(diǎn)[13]，故該方法在食源性肽的工業(yè)化生產(chǎn)中有良好應(yīng)用前景。

1.3 食源性肽降糖效果評(píng)價(jià)方法

評(píng)價(jià)食源性降糖肽降糖效果的常用方法有體外驗(yàn)證、體內(nèi)驗(yàn)證和分子對(duì)接等。體外驗(yàn)證一般選用α-葡萄糖苷酶、DPP-4試劑盒[14]。試劑盒工作原理多遵循酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法。微孔板上包被著純化的抗體，樣品被加入微孔后，與辣根過(guò)氧化物酶（horseradish peroxidase，HRP）標(biāo)記的抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺（3,3',5,5',-tetramethylbenzidine，TMB）顯色。TMB在HRP的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成黃色，顏色的深淺和樣品濃度呈正相關(guān)，根據(jù)試劑盒檢測(cè)結(jié)果可判斷樣品的降糖效果[15]。

體內(nèi)驗(yàn)證是以糖尿病大鼠、小鼠或者人為研究對(duì)象，采用口服給藥的方法，檢驗(yàn)降糖肽的有效性[16-17]。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)一般先建立糖尿病小鼠模型，經(jīng)過(guò)一定時(shí)間的灌胃給藥后，取血清對(duì)血糖、糖化血紅蛋白、胰島素、C肽等指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)[14]。人群研究通常招募糖尿病患者并將其隨機(jī)分組，分別給予降糖肽和安慰劑，對(duì)比不同組糖代謝指標(biāo)的差異。例如，有研究探究海洋魚膠原蛋白肽（marine collagen peptides，MCPs）對(duì)2型糖尿病患者的治療效果，實(shí)驗(yàn)招募了100名糖尿病患者，他們被隨機(jī)分為治療組和對(duì)照組。治療組連續(xù)3個(gè)月每天額外服用13 g MCPs，安慰劑組不服用。在治療前、治療后1.5和3個(gè)月采集血樣，結(jié)果顯示，治療組患者的空腹血糖、糖化血紅蛋白、空腹胰島素等指標(biāo)均有明顯改善，說(shuō)明了MCPs有利于調(diào)節(jié)糖尿病患者的糖代謝[18]。

分子對(duì)接技術(shù)篩選速度快，精度高，常用于降糖藥物的篩選。分子對(duì)接方法可以從天然產(chǎn)物小分子化合物庫(kù)中自動(dòng)篩選出與靶標(biāo)蛋白高度結(jié)合的天然小分子[19]。例如，在研究生物活性肽與α-葡萄糖苷酶之間的結(jié)合方式時(shí)，從RCSB Protein Data Bank數(shù)據(jù)庫(kù)下載α-葡萄糖苷酶三維結(jié)構(gòu)文件，利用Discovery Studio軟件包繪制多肽的三維結(jié)構(gòu)，并對(duì)多肽進(jìn)行能量最小化處理。然后利用Discovery Studio軟件處理α-葡萄糖苷酶分子，去除所有水分子，并給酶分子加氫。處理后的α-葡萄糖苷酶分子分別與多肽進(jìn)行分子對(duì)接，從而篩選出結(jié)合效果好的肽，即為潛在的抑制肽[20]。

2 動(dòng)物源性降糖肽

2.1 來(lái)源于畜禽肉的降糖肽

畜禽肉是優(yōu)質(zhì)的動(dòng)物性蛋白，其中豬肉和雞肉蛋白是降糖肽的潛在來(lái)源。K?ska等[21]通過(guò)胃腸道酶（胃蛋白酶、胰蛋白酶、糜蛋白酶）水解豬肉蛋白，并對(duì)釋放的短肽進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)所得序列以二肽為主，其中GF、MW、MF、PF、PW活性指數(shù)最高，表明F和W兩個(gè)疏水芳香氨基酸在抑制DPP-4活性上起著重要作用。已有資料表明，在食物蛋白衍生出的短肽中，二肽對(duì)DPP-4的抑制作用比三肽或氨基酸更明顯[22]。本研究的結(jié)果支持二肽對(duì)DPP-4抑制作用較強(qiáng)，同時(shí)研究要重點(diǎn)關(guān)注水解產(chǎn)物中含F(xiàn)或W的二肽。機(jī)體胃腸道環(huán)境比較復(fù)雜，體外實(shí)驗(yàn)的結(jié)果并不能簡(jiǎn)單推及到體內(nèi)。Sim等[23]給2型糖尿病KKAy小鼠和GK大鼠口服了一種以蛋白質(zhì)和肽為主要成分的液態(tài)商業(yè)雞肉提取物。8周后測(cè)定發(fā)現(xiàn)，糖尿病動(dòng)物的血糖水平顯著降低，而血液胰島素水平?jīng)]有明顯變化，進(jìn)一步分子層面的結(jié)果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)膜葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-4（GLUT4）和胞漿酪氨酸磷酸化的胰島素受體底物-1（IRS-1）顯著增加。可見雞肉提取物雖然不能改變胰島素的分泌情況，但能有效減輕胰島素抵抗，對(duì)2型糖尿病有良好的控制作用。目前從畜禽肉中水解得到降糖肽的研究相對(duì)有限，這些水解肽在體內(nèi)的穩(wěn)定性和降糖效果有待于進(jìn)一步研究。

2.2 來(lái)源于魚類的降糖肽

魚類是人體獲取動(dòng)物性蛋白的主要來(lái)源之一，流行病學(xué)調(diào)查資料顯示，適量攝入魚類能有效控制餐后血糖，降低罹患糖尿病的風(fēng)險(xiǎn)，魚類蛋白經(jīng)消化產(chǎn)生的水解肽可能是發(fā)揮降糖作用的物質(zhì)之一[24]。

近年來(lái)，魚肉中的降糖肽逐漸被發(fā)掘，其中鱒魚、鱸魚、鰱魚、鮭魚、方鯛、大比目魚、羅非魚等普遍存在降糖肽。Ketnawa等[25]用堿性蛋白酶水解鱒魚骨架并對(duì)蛋白水解物進(jìn)行體外測(cè)定，發(fā)現(xiàn)水解物對(duì)DPP-4的抑制活性為40.45%±0.48%，IC50為4.80±0.60 mg/mL。研究還發(fā)現(xiàn)，低分子量肽段比例增加會(huì)導(dǎo)致更高的DPP-4抑制活性，可見多肽分子量大小和DPP-4有關(guān)，但作者并未對(duì)具體多肽對(duì)DPP-4的抑制機(jī)制進(jìn)行進(jìn)一步探究。Wang等[26]將大口黑鱸蛋白模擬胃腸水解，構(gòu)建水解多肽數(shù)據(jù)庫(kù)，進(jìn)一步采用分子對(duì)接技術(shù)篩選和DPP-4結(jié)合能力最強(qiáng)的肽段。結(jié)果發(fā)現(xiàn)6種三肽對(duì)DPP-4表現(xiàn)較強(qiáng)的抑制活性，其中ICY活性最強(qiáng)（IC50=0.73 mmol/L），它能與DPP-4之間形成氫鍵、π鍵和靜電相互作用，并在DPP-4高度疏水的S1位點(diǎn)形成疏水相互作用。分子對(duì)接技術(shù)的引入，除了能明確多肽和關(guān)鍵蛋白的結(jié)合能力，還能進(jìn)一步預(yù)測(cè)結(jié)合位點(diǎn)和機(jī)理，同時(shí)能夠明確發(fā)揮關(guān)鍵作用的結(jié)構(gòu)特征。Zhang等[27]借助生物信息學(xué)技術(shù)，鑒定、分離、合成了鰱魚蛋白水解產(chǎn)物中有效的DPP-4抑制肽。其中中性蛋白酶產(chǎn)生的水解產(chǎn)物具有最大的DPP-4抑制作用（IC50=1.12 mg/mL），鑒定出的四種DPP-4抑制肽分別為AGPPGPSG、APGPAGP、LPIIDI和ALAPSTM。以往研究表明，肽抑制劑N端三肽序列決定其與DPP-4的結(jié)合，而P位于2位的序列由于其底物樣結(jié)構(gòu)，通常是DPP-4的競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑[28-29]。對(duì)本研究鑒定出的降糖肽的體外實(shí)驗(yàn)表明，P位于第二位的LPIIDI和APGPAGP有更高的DPP-4抑制活性，IC50分別為105.44和229.14 μmol/L，結(jié)果與既往報(bào)道相符。若某些氨基酸具有特定的活性，則含有此類殘基的短肽也可能具有類似的作用，比如GP和Q能夠有效促進(jìn)GLP-1分泌[30]，VLGP也被證實(shí)具有 DPP-4抑制活性[31]。Harnedy等[32]使用堿性蛋白酶和風(fēng)味蛋白酶酶解鮭魚明膠，其中AVLGPK和AVLGPQ中均含有VLGP的序列，體外實(shí)驗(yàn)表明二者均能抑制DPP-4活性。

以上研究表明魚類的蛋白水解產(chǎn)物在生物體外具有良好的降糖效果，然而生物體內(nèi)不同的環(huán)境會(huì)影響降糖肽的作用方式，可能導(dǎo)致降糖效果的改變，因此有必要進(jìn)行細(xì)胞實(shí)驗(yàn)或動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的進(jìn)一步驗(yàn)證。Harnedy等[33]用堿性蛋白酶和風(fēng)味蛋白酶水解方鯛蛋白，從水解物中鑒定出了22條DPP-4抑制肽和15條促胰島素肽，進(jìn)一步通過(guò)體外實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞實(shí)驗(yàn)對(duì)其評(píng)估。其中DPP-4抑制肽IPVDM在體外常規(guī)實(shí)驗(yàn)中 IC50為 21.72±1.08 μmol/L，在 Caco-2 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中 IC50為 44.26±0.65 μmol/L，均顯示出較強(qiáng)的DPP-4抑制活性，說(shuō)明該降糖肽在細(xì)胞內(nèi)確實(shí)能夠發(fā)揮抑制作用。此外，還發(fā)現(xiàn)IPVDM可刺激胰腺BRIN-BD11細(xì)胞的胰島素分泌活性。綜上可知，IPVDM能以完整的形式穿越人上皮細(xì)胞膜，并通過(guò)多種機(jī)制介導(dǎo)降糖作用。多肽在胃腸道系統(tǒng)里面可能會(huì)進(jìn)一步分解，細(xì)胞試驗(yàn)的結(jié)果并不能簡(jiǎn)單推及到體內(nèi)。Wang等[34]對(duì)大比目魚皮膚水解液和羅非魚皮膚明膠水解液進(jìn)行體外DPP-4抑制活性和大鼠體內(nèi)抗高血糖效果的研究，發(fā)現(xiàn)兩種水解液均具有較好的降糖活性，大鼠DPP-4的活性顯著降低，GLP-1的分泌明顯增加，說(shuō)明該蛋白水解肽在體內(nèi)仍能發(fā)揮明顯的DPP-4抑制效果。有研究進(jìn)一步采用人群干預(yù)實(shí)驗(yàn)探究鱈魚蛋白水解物的降糖效果，結(jié)果發(fā)現(xiàn)最高劑量的水解物與低劑量的相比，具有更好的降低餐后血糖水平的效果[35]。目前關(guān)于魚肉降糖肽的研究是熱點(diǎn)，但是多半停留在體外實(shí)驗(yàn)的階段，在體內(nèi)能否繼續(xù)發(fā)揮降糖作用是限制其應(yīng)用和推廣的關(guān)鍵因素。另外，目前關(guān)于魚肉降糖肽通過(guò)抑制α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶活性來(lái)發(fā)揮降糖作用的研究較少。

2.3 來(lái)源于血液的降糖肽

動(dòng)物血液是畜禽屠宰加工過(guò)程中的主要副產(chǎn)品，目前未能被充分利用，浪費(fèi)較為嚴(yán)重。動(dòng)物血液中含有豐富的蛋白質(zhì)和其他營(yíng)養(yǎng)素，已有的研究表明駝血、豬血、牛血可作為降糖肽的開發(fā)來(lái)源。劉麗君[36]利用酶解法制備駝血多肽，結(jié)果表明風(fēng)味蛋白酶酶解4 h，酶濃度為5 mg/100 mg，料液比為1:6時(shí)，駝血酶解產(chǎn)物的α-淀粉酶抑制活性及α-葡萄糖苷酶抑制活性最高。進(jìn)一步分離純化發(fā)現(xiàn)多肽YPGETR的α-淀粉酶抑制率最高（66.03%），YPWTRR 的α-葡萄糖苷酶抑制率最高（90.86%），說(shuō)明駝血多肽具有潛在降糖作用。Lafarga等[37]利用PeptideCutter軟件對(duì)豬和牛血液中已知序列的蛋白成分進(jìn)行模擬酶切，在豬和牛血清白蛋白中得到了一種新的DPP-4抑制肽PPL，體外實(shí)驗(yàn)表明其IC50為390.14±44.3 μmol/L。此外，在牛血紅蛋白亞基α中還鑒定出了多種DPP-4抑制肽 VA、KA、LA、FP、PA、LP、LL、HA，這些肽此前已被證明具有降糖活性。計(jì)算機(jī)模擬酶切避免了傳統(tǒng)酶解費(fèi)時(shí)且易受環(huán)境干擾的缺陷，能高效地鑒定并獲得降糖肽序列，這為降糖肽的開發(fā)提供了新方法，但這些肽必須在特定的位點(diǎn)被酶切下，才能正常發(fā)揮降糖活性，目前的酶解工藝還難以實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)。

2.4 來(lái)源于乳類的降糖肽

乳類是一種營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)高的蛋白質(zhì)，在乳中提取降糖肽作為功能性食品成分，是當(dāng)前的研究熱點(diǎn)之一。諸多研究表明，駱駝乳、牛乳、羊乳等乳類均具有降糖作用。Korish等[38]給鏈脲佐菌素誘導(dǎo)的糖尿病大鼠持續(xù)口服駱駝乳或牛乳，干預(yù)8周后二者均可使糖尿病大鼠體重增加，血糖水平下降，葡萄糖耐受性改善。可見駱駝乳和牛乳經(jīng)消化液酶解后的產(chǎn)物很可能含有降糖活性肽。Nongonierma等[39]研究了駱駝乳蛋白的水解物，在水解產(chǎn)物中檢測(cè)到來(lái)自于α-乳清蛋白的DPP-4抑制肽LAHKPL和ILDKEGIDY，以及來(lái)自于β-酪蛋白的DPP-4抑制肽VPV、YPI和 VPF，三者的IC50值分別為 6.6±0.5、35.0±2.0、55.1±5.8 μmol/L，表明駱駝乳中確實(shí)含有降糖肽。此外，駱駝乳中分離出的VPV是迄今為止發(fā)現(xiàn)的第二強(qiáng)DPP-4抑制肽，僅次于抑二肽素A，這提示駱駝乳可能具有良好的降糖作用。牛乳中的乳清中富含α-乳白蛋白，甲承立[40]對(duì)α-乳白蛋白水解產(chǎn)物進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)從水解物中分離出的活性肽LDQWLCEKL具有較高的DPP-4抑制活性，IC50為131.07 μmol/L，并能促進(jìn)GLP-1的分泌和表達(dá)，可見牛乳也能水解產(chǎn)生降糖肽。羊乳作為生活中常見的乳類之一，逐漸引起研究者的關(guān)注。Jan等[41]使用胰蛋白酶、胃蛋白酶和糜蛋白酶水解生羊奶和煮羊奶中的酪蛋白，并對(duì)水解產(chǎn)物進(jìn)行α-淀粉酶抑制實(shí)驗(yàn)。結(jié)果顯示，與煮沸羊乳酪蛋白水解物相比，不同酶解方式下生羊乳酪蛋白水解物對(duì)α-淀粉酶抑制效果均較強(qiáng)，提示食物熱處理引起的蛋白變性可能會(huì)影響到其水解多肽的功能。

2.5 來(lái)源于蛋類的降糖肽

蛋類也是日常生活中蛋白質(zhì)的主要來(lái)源，研究者對(duì)其降糖肽的研究主要集中于對(duì)不同部位蛋白的降糖效果進(jìn)行評(píng)價(jià)。Yu等[42]使用堿性蛋白酶對(duì)蛋清蛋白進(jìn)行酶解，并測(cè)定產(chǎn)物中多肽的抑制活性，體外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)RVPSLM、TPSPR、DLQGK、AGLAPY、RVPSL、DHPFLF、HAEIN、QIGLFα-葡萄糖苷酶抑制活性較強(qiáng)。其中，RVPSLM和TPSPR活性較高，IC50值分別為23.07和40.02 μmol/L。Zambrowicz等[43]用亞洲南瓜蛋白酶制備蛋黃蛋白副產(chǎn)物水解液，發(fā)現(xiàn)LAPSLPGKPKPD具有良好的α-葡萄糖苷酶抑制作用。Zambrowicz等[44]使用胃蛋白酶水解蛋黃蛋白，發(fā)現(xiàn)多肽YINQMPQKSRE、YINQMPQKSREA、VTGRFAGHPAAQ兼有抑制α-葡萄糖苷酶和DPP-4的效果，可見卵黃蛋白也可能是降糖肽的來(lái)源之一。綜上可知，蛋清和蛋黃蛋白中均可制備降糖肽，但是目前的研究并未深入解析潛在降糖肽和α-葡萄糖苷酶、DPP-4分子作用機(jī)制，更未評(píng)價(jià)其在體內(nèi)降糖效果。蛋類相對(duì)于其他動(dòng)物性食物蛋白，相對(duì)便宜、易得，深入解析降糖作用機(jī)理和明確體內(nèi)降糖效果，有助于基于蛋類的功能性食品的開發(fā)。

2.6 來(lái)源于其他動(dòng)物性食物的降糖肽

動(dòng)物源食物較為豐富，除了常見的畜禽、魚類、蛋類及其制品，蛋白質(zhì)含量豐富的海產(chǎn)品如蝦、海參等也是研究降糖肽的熱點(diǎn)。Ji等[45]對(duì)南極磷蝦蛋白水解物的DPP-4體外抑制活性進(jìn)行了評(píng)估，發(fā)現(xiàn)KVEPLP和PAL具有對(duì)DPP-4的抑制活性，IC50分別為 0.73±0.04 和 0.88±0.03 mg/mL，表明南極磷蝦蛋白水解物具有降糖的潛力。王美華等[46]研究了海參肽對(duì)正常小鼠糖耐量水平的影響，以及對(duì)皮下注射腎上腺素所致應(yīng)激性高血糖模型小鼠血糖水平的調(diào)節(jié)作用。與模型組相比，海參肽能顯著降低正常小鼠糖耐量試驗(yàn)中的血糖值，并能顯著降低腎上腺素所致高血糖小鼠的血糖值。此外，我國(guó)有傳統(tǒng)食用習(xí)慣的動(dòng)物性食物如蠶蛹、蜂王漿、馬鹿茸，也被證實(shí)具有良好的降糖效果。張玉等[47]使用酸性蛋白酶酶解蠶蛹蛋白粉，并研究不同劑量蠶蛹蛋白酶解肽對(duì)糖尿病小鼠的影響。連續(xù)給藥5周后，發(fā)現(xiàn)蠶蛹蛋白酶解肽可明顯降低小鼠糖化血清蛋白含量，改善糖尿病小鼠的心臟指數(shù)、腎臟指數(shù)和肝臟指數(shù)。朱作藝等[48]以酸性蛋白酶水解蜂王漿粗蛋白，測(cè)定結(jié)果顯示蜂王漿蛋白肽對(duì)α-葡萄糖苷酶的IC50為6.94 mg/mL，說(shuō)明蜂王漿蛋白肽具有一定的降糖活性。包美麗[49]采用雙酶法（堿性蛋白酶和風(fēng)味蛋白酶）以馬鹿茸為原料制備降血糖肽。當(dāng)水解終產(chǎn)物質(zhì)量濃度為3 mg/mL時(shí)，α-葡萄糖苷酶抑制率可達(dá)94.09%，IC50為1.82 mg/mL。以上研究表明降糖肽也可能廣泛存在于這些動(dòng)物性食品中，研究中不僅要關(guān)注主要?jiǎng)游镄允澄铮瑐鹘y(tǒng)功能性食材也值得探討研究。文中涉及到的動(dòng)物源性降糖肽總結(jié)如表1。

表1 動(dòng)物源性降糖肽Table 1 Animal-derived hypoglycemic peptides

3 結(jié)論與展望

隨著營(yíng)養(yǎng)與健康的觀念逐漸深入人心，消費(fèi)者越來(lái)越認(rèn)同這樣一個(gè)觀點(diǎn)：食物不僅提供營(yíng)養(yǎng)，同時(shí)也提供許多有益身體健康的功能成分。許多研究者已從體外測(cè)定、生物信息學(xué)技術(shù)、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)等多個(gè)方面證實(shí)了動(dòng)物食品中廣泛存在降糖活性肽，說(shuō)明動(dòng)物源性降糖肽具有很大的研究?jī)r(jià)值。目前，血液源降糖肽的數(shù)據(jù)較少，說(shuō)明血液源降糖肽可能還處在未被充分開發(fā)的階段，值得持續(xù)關(guān)注。來(lái)源于中國(guó)傳統(tǒng)食品的降糖肽為商業(yè)化產(chǎn)品的開發(fā)提供了一條新思路：我國(guó)糖尿病患者數(shù)量大，傳統(tǒng)食品又有著長(zhǎng)久以來(lái)的食用基礎(chǔ)，若能成功開發(fā)降糖功能食品，相較于其他動(dòng)物源產(chǎn)品將更易被消費(fèi)者接受，有著巨大的商業(yè)潛力。魚類和乳類是當(dāng)下降糖肽來(lái)源的研究熱點(diǎn)，其中許多降糖肽的序列已經(jīng)被鑒定出來(lái)，作用機(jī)制也逐步明晰，對(duì)于這些來(lái)源的降糖肽，應(yīng)重點(diǎn)關(guān)注這些肽在人體內(nèi)是否仍能保持原有的降糖活性，以及如何強(qiáng)化降糖肽在人體內(nèi)的功效。在目前動(dòng)物源性降糖肽的研究中，最明顯的不足是人體試驗(yàn)數(shù)據(jù)較為匱乏，且部分研究發(fā)現(xiàn)人群直接食用含降糖肽的動(dòng)物食品并不能有效地降低血糖，這可能是因?yàn)閯?dòng)物蛋白在體外與體內(nèi)消化的環(huán)境與方式存在較大差異。因此，在開發(fā)動(dòng)物源降糖肽的同時(shí)，也需要考慮如何使這些降糖肽更高效地在人體內(nèi)發(fā)揮作用，并對(duì)患者癥狀起到明顯的改善作用，這對(duì)動(dòng)物源降糖肽成功實(shí)現(xiàn)商業(yè)化以及有效輔助治療糖尿病有著重要意義。