妊娠期高血壓患者血清miR-15b、Zeste 同源物增強子-2 表達水平及臨床意義

王小鈺， 陳麗平， 湯衛春， 陸奕玲， 王 瑩

南通大學第二附屬醫院(南通市第一人民醫院) 婦產科，江蘇 南通 226001

妊娠期高血壓以高血壓、蛋白尿、水腫為主要癥狀，隨著病情發展，可誘發子癇，威脅母嬰生命安全[1-5]。 近年來，妊娠期高血壓的發病率呈逐漸上升趨勢，其已成為孕產婦、圍生兒病死率升高的主要原因之一[6]。 因此，早期預測和診斷妊娠期高血壓是婦產科的工作重點。 臨床上判定妊娠期高血壓多通過生化指標、臨床癥狀等，遺傳學及分子生物學等新技術也被逐漸應用[7-8]。 miR-15b 作為miRNA 家族的主要成員之一，其水平升高可反映機體的缺血缺氧狀態[9-13]，而胎盤缺血缺氧是妊娠期高血壓的發病原因之一。在多種疾病中，miRNA 可靶向調控Zeste 同源物增強子-2(enhancer of Zeste homolog-2，EZH2)[14-16]。 本研究旨在檢測妊娠期高血壓患者血清miR-15b、EZH2 的表達水平，并分析其臨床意義。 現報道如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選取南通大學第二附屬醫院自2020 年1 月至2021 年6 月收治的120 例孕婦為研究對象。 納入標準:年齡22 ~34 歲；分娩時孕周37 ~42 周；妊娠次數≤3 次；單胎足月分娩；妊娠前3 個月月經無異常；文化程度在小學以上。 排除標準:存在糖尿病、死胎或死產史；合并慢性血管性疾病；無法按時完成產檢；分娩后3 個月無法完成隨訪。妊娠期高血壓診斷標準:參考?婦產科學(8 版)?[17]，妊娠≥20 周首次出現高血壓，收縮壓≥140 mmHg(1 mmHg ＝0.133 kPa)和(或)舒張壓≥90 mmHg，產后12 周內恢復正常，尿蛋白檢測呈陰性。 輕度子癇:妊娠20 周后收縮壓≥140 mmHg 和(或)舒張壓≥90 mmHg，尿蛋白≥0.3 g/24 h，或尿蛋白/肌酐比值≥0.3，或隨機尿蛋白≥( ＋)。 重度子癇:子癇前期孕婦出現血壓和(或)尿蛋白水平持續升高，發生母體器官功能受損或胎盤-胎兒并發癥。 根據妊娠期情況，將孕婦分入A 組(妊娠期高血壓孕婦)、B 組(輕度子癇孕婦)、C 組(重度子癇孕婦)及D 組(健康孕婦)，每組各30 例。A 組平均年齡(28.48 ± 3.17)歲；初產17 例，經產13 例；孕前平均體質量指數(23.02 ±1.56)kg/m2。 B 組平均年齡(28.69 ±3.21)歲；初產19 例，經產11 例；孕前平均體質量指數(23.18 ±1.62)kg/m2。 C 組平均年齡(28.62 ±3.12)歲；初產20 例，經產10 例；孕前平均體質量指數(23.11 ±1.51)kg/m2。 D 組平均年齡(28.53 ±3.16)歲；初產16 例，經產14 例；孕前平均體質量指數(23.06 ±1.48)kg/m2。4 組研究對象一般資料比較，差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。 研究對象及其家屬均簽署知情同意書。 本研究經醫院倫理委員會批準。

1.2 研究方法 4 組孕婦均正常生產。 胎盤娩出后，將胎盤組織在液氮中研磨至粉末，提取胎盤總RNA。 留取孕婦血液標本，提取血漿總RNA。 采用紫外分光光度法測定RNA 濃度，采用反轉錄聚合酶鏈式反應和實時定量聚合酶鏈式反應技術檢測miR-15b、EZH2 在血漿和胎盤中的表達情況。

1.3 統計學方法 采用SPSS 22.0 統計學軟件對數據進行處理。 計量資料以均數±標準差(±s)表示，組間比較采用t 檢驗。 采用Spearman 法進行相關性分析。 以P <0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

D 組、A 組、B 組、C 組血漿miR-15b 分別為(1.42 ±0.35)、(1.68 ±0.41)、(2.59 ±0.58)、(3.82 ±0.67)，胎盤miR-15b 分別為(1.56 ± 0.37)、(1.74 ± 0.46)、(2.66 ±0.59)、(3.96 ±0.71)；D 組、A 組、B 組、C 組血漿EZH2 分別為(105.25 ± 16.87) Mr/103、 (95.33 ± 13.28) Mr/103、(82.69 ±12.74)Mr/103、(75.45 ±10.58)Mr/103，胎盤EZH2分別為(102.11 ±15.84)Mr/103、(90.65 ±13.19)Mr/103、(81.02 ±12.05)Mr/103、(73.15 ±10.08)Mr/103。 與D 組比較，A 組、B 組、C 組血漿和胎盤中的miR-15b 水平更高(P<0.05)，EZH2 水平更低(P < 0.05)；隨著病情加重，A 組、B 組、C 組血漿和胎盤中的miR-15b 水平呈逐漸升高趨勢(P <0.05)，EZH2 水平呈逐漸降低趨勢(P <0.05)。miR-15b 水平與妊娠期高血壓、輕度子癇、重度子癇呈正相關(r ＝0.385、0.428、0.518，P <0.05)，EZH2 水平與妊娠期高血壓、輕度子癇、重度子癇呈負相關(r ＝ － 0.316、－0.512、－0.568，P<0.05)。

3 討論

妊娠期高血壓是妊娠期特有的疾病，會引起血管痙攣、動脈血壓升高，導致臟器灌注不足，誘發相應病理生理改變，給孕婦和胎兒的生命安全構成極大威脅[18-19]。 妊娠期高血壓孕婦胎盤多伴有動脈硬化或梗死，使胎盤出現缺血缺氧癥狀，這主要與滋養層細胞浸潤、螺旋動脈生理改變密切相關，過程受基因調控[20-21]。

子癇前期的發生與胎盤滋養細胞氧化應激異常、炎癥免疫亢進、侵襲異常等密切相關，miRNA 在妊娠期高血壓前期可能通過作用于細胞凋亡、氧化應激及內皮細胞功能障礙分子通路相關蛋白來干預子癇的發生發展[9-10]。 miRNA 主要在細胞質、細胞核中合成，其在轉錄后基因的調控、表達中扮演重要角色[11]。 miR-15b 作為miRNA 家族的主要成員之一，在機體缺氧缺血時水平會明顯升高，并在血漿、胎盤組織中大量表達[9-13]。 這提示，miR-15b 水平升高可反映缺血缺氧狀態，而胎盤缺血缺氧是妊娠期高血壓的發病原因之一，因此，miR-15b 與妊娠期高血壓存在一定關系。 EZH2 是一種轉錄阻遏因子，參與染色質結構的形成基因表達調節及生長控制[22]，其與細胞過度增殖、腫瘤發生等密切相關。陳芳等[23]認為，EZH2 在宮頸癌患者病灶組織中的表達與臨床分期、淋巴結轉移、長期預后明顯相關。 在腫瘤性疾病中，miR-15b 可能為抑癌基因，其通過靶向作用調控EZH2 基因表達[24]；對于孕婦，miR-15b 通過作用于EZH2 來促進妊娠期高血壓的發生發展。

本研究結果顯示:與D 組比較，A 組、B 組、C 組血漿和胎盤中的miR-15b 水平更高(P <0.05)，EZH2 水平更低(P<0.05)；隨著病情加重，A 組、B 組、C 組血漿和胎盤中的miR-15b 水平呈逐漸升高趨勢(P<0.05)，EZH2 水平呈逐漸降低趨勢(P <0.05)。 這表明，與健康孕婦比較，妊娠期高血壓孕婦的miR-15b、EZH2 表達異常，且隨著病情加重，表達異常愈發明顯。 本研究結果還顯示:miR-15b 水平與妊娠期高血壓病情嚴重程度呈正相關(P <0.05)，EZH2 水平與妊娠期高血壓病情嚴重程度呈負相關(P<0.05)。

綜上所述，妊娠期高血壓孕婦血清miR-15b 處于高表達狀態，EZH2 處于低表達狀態，血清miR-15b、EZH2 可作為妊娠期高血壓早期預測的新型標志物。 但本研究樣本量較小，數據存在一定局限性，后續需加大樣本量對結論予以驗證。