蔬菜中農(nóng)藥殘留檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)和前處理技術(shù)研究進(jìn)展

張昊翔

（和縣市場(chǎng)監(jiān)督檢驗(yàn)所，安徽馬鞍山 238200）

食品是人類生存發(fā)展的最基本物質(zhì)，也會(huì)直接或間接地影響經(jīng)濟(jì)發(fā)展與社會(huì)穩(wěn)定。蔬菜作為食品中重要的組成部分之一，其安全問(wèn)題關(guān)系到整個(gè)國(guó)民的健康。目前，蔬菜在種植過(guò)程中容易遭受病蟲(chóng)害，蔬菜病蟲(chóng)害的防治主要還是依靠化學(xué)防治[1]。一些農(nóng)業(yè)設(shè)施發(fā)達(dá)地區(qū)也有使用物理防治、生物防治等方法，但高毒、高殘留的農(nóng)藥仍然屢禁不止。在蔬菜上市季節(jié)，有些農(nóng)民在蔬菜生產(chǎn)中雖然沒(méi)有使用“雙高”和禁限農(nóng)藥，但將未過(guò)安全期的蔬菜采收上市，同樣會(huì)導(dǎo)致銷售的蔬菜農(nóng)殘超標(biāo)。此外，在監(jiān)管力度不夠的部分地區(qū)沒(méi)有禁止銷售和使用“雙高”農(nóng)藥，導(dǎo)致稻、棉田農(nóng)藥進(jìn)入蔬菜區(qū)，農(nóng)殘超標(biāo)時(shí)有發(fā)生。蔬菜農(nóng)藥殘留超標(biāo)問(wèn)題已引起人們的普遍關(guān)注，必須加強(qiáng)農(nóng)藥殘留檢測(cè)技術(shù)的研究，以保障人們的生活食用物資安全[2-4]。蔬菜的種類繁多，所用農(nóng)藥種類各不相同，化學(xué)性質(zhì)各異，這樣就需要不同的檢測(cè)技術(shù)和標(biāo)準(zhǔn)。本文對(duì)蔬菜中農(nóng)藥殘留檢測(cè)的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)以及檢測(cè)檢測(cè)過(guò)程中的前處理方法進(jìn)行總結(jié)，并闡述其原理，方便廣大檢驗(yàn)工作者根據(jù)實(shí)際來(lái)應(yīng)用。

1 蔬菜樣品中農(nóng)藥殘留檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)

現(xiàn)階段關(guān)于蔬菜中農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法的現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)較多，由不同的國(guó)家部門單獨(dú)發(fā)布或幾個(gè)部門聯(lián)合發(fā)布。具體的檢測(cè)農(nóng)藥品種有幾百個(gè)，涉及不同的檢測(cè)技術(shù)方法，具體如下[5-9]。

1.1 國(guó)家強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)（GB）及國(guó)家推薦性標(biāo)準(zhǔn)（GB/T）

中華人民共和國(guó)國(guó)家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)、中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部和國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局3 個(gè)部門聯(lián)合發(fā)布的《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 水果和蔬菜中500 種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量的測(cè)定 氣相色譜-質(zhì)譜法》（GB 23200.8—2016）、《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 蔬菜中非草隆等15 種取代脲類除草劑殘留量的測(cè)定 液相色譜法》（GB 23200.18—2016）、《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 水果和蔬菜中噻菌靈殘留量的測(cè)定 液相色譜法》（GB 23200.17—2016）、《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 水果和蔬菜中阿維菌素殘留量的測(cè)定 液相色譜法》（GB 23200.19—2016）、《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 水果和蔬菜中唑螨酯殘留量的測(cè)定 液相色譜法》（GB 23200.29—2016）等。GB 為國(guó)家強(qiáng)制執(zhí)行的標(biāo)準(zhǔn)，涉及的產(chǎn)品均要執(zhí)行該標(biāo)準(zhǔn)，當(dāng)出現(xiàn)檢驗(yàn)不合格的情況可以作為法定的判定依據(jù)。

中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局和中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)聯(lián)合發(fā)布的《水果和蔬菜中450 種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量的測(cè)定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》（GB/T 20769—2008）、《水果、蔬菜及茶葉中吡蟲(chóng)啉殘留的測(cè)定 高效液相色譜法》（GB/T 23379—2009）、《水果、蔬菜中啶蟲(chóng)脒殘留量的測(cè)定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》（GB/T 23584—2009）等。中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部和中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)聯(lián)合發(fā)布的《水果和蔬菜中多種農(nóng)藥殘留量的測(cè)定》（GB/T 5009.218—2008）、《蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量快速檢測(cè)》（GB/T 5009.199—2003）、《蔬菜、水果中甲基托布津、多菌靈的測(cè)定》（GB/T 5009.188—2003）等。GB/T 為自愿采用的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，企業(yè)在使用中可以根據(jù)情況進(jìn)行參照?qǐng)?zhí)行。推薦性標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)方法較為成熟，方法較為可靠。

1.2 農(nóng)業(yè)部的推薦標(biāo)準(zhǔn)（NY/T）

中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部發(fā)布的《蔬菜中334 種農(nóng)藥多殘留的測(cè)定 氣相色譜質(zhì)譜法和液相色譜質(zhì)譜法》（NY/T 1379—2007）、《蔬菜和水果中有機(jī)磷、有機(jī)氯、擬除蟲(chóng)菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多殘留的測(cè)定》（NY/T 761—2008）、《蔬菜、水果中51 種農(nóng)藥多殘留的測(cè)定 氣相色譜-質(zhì)譜法》（NY/T 1380—2007）等幾十個(gè)現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)。NY/T 標(biāo)準(zhǔn)為行業(yè)的推薦性標(biāo)準(zhǔn)。當(dāng)國(guó)家的強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)頒布實(shí)施后，其自動(dòng)作廢。

1.3 蔬菜進(jìn)出口標(biāo)準(zhǔn)

中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布的《出口水果和蔬菜中敵敵畏、四氯硝基苯、丙線磷等88 種農(nóng)藥殘留量的篩選檢測(cè)QuEChERS-氣相色譜-負(fù)化學(xué)源質(zhì)譜法》（SN/T 4138—2015）、《出口水果蔬菜中脫落酸等60 種農(nóng)藥殘留量的測(cè)定 液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法》（SN/T 4591—2016）。SN/T是商檢行業(yè)推薦性標(biāo)準(zhǔn)，為進(jìn)出口產(chǎn)品的質(zhì)量判定依據(jù)。

不同的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)所應(yīng)用的領(lǐng)域不同，需要根據(jù)具體的檢測(cè)用途選擇。一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)中通常也收載幾個(gè)不同的檢測(cè)方法，檢驗(yàn)檢測(cè)單位根據(jù)自己?jiǎn)挝坏膬x器配置情況和分析人員的掌握情況以及樣品的本身基質(zhì)的情況來(lái)綜合分析所采用的標(biāo)準(zhǔn)及方法。同時(shí)，隨著新的農(nóng)藥研發(fā)上市，相應(yīng)新的農(nóng)藥殘留檢測(cè)技術(shù)方法和檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)也相繼建立并公布，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)體系是一個(gè)動(dòng)態(tài)更新的狀態(tài)[10-12]。

2 試樣的制備和保存

蔬菜樣品取樣部位通常按《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中農(nóng)藥最大殘留限量》（GB 2763—2021）要求，將樣品切碎、混勻、均一化制成勻漿，于-18 ℃冷凍密封保存。方法應(yīng)該能夠充分保證樣品中待測(cè)農(nóng)藥的均勻性。

3 試樣的提取和凈化

各個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的提取方法大致相同，一般都是加入乙腈或甲醇溶劑進(jìn)行勻漿提取目標(biāo)待測(cè)物，加入氯化鈉或無(wú)水硫酸鈉等進(jìn)行除水，與水形成鹽溶液與有機(jī)相分離，靜置或離心，取上清液分析用。樣品的凈化與蔬菜基質(zhì)的復(fù)雜程度和最終檢測(cè)分析儀器的要求有關(guān)。通常反相液相色譜法要求分析樣品為中等極性溶液或極性溶液，如一定濃度的甲醇或乙腈溶液。氣相色譜法要求分析樣品溶液不能含有水，需要無(wú)水硫酸鈉脫水處理。現(xiàn)階段主要的凈化方式可以分為固相萃取法（Solid Phase Extraction，SPE）、QuEChERS 前處理法、凝膠滲透色譜（Gel Permeation Chromatography、GPC）、微波輔助萃取法（Microwave Assisted Extraction，MAE）等[13]。

3.1 固相萃取法（SPE）

基于填料性質(zhì)的不同，可以將SPE分為3類。①正相SPE。萃取柱的填料為極性物質(zhì)，如氧化鋁和硅膠及硅鎂吸附劑等，根據(jù)相似相溶原理，對(duì)極性物質(zhì)萃取效果較好。②反相SPE。萃取柱的填料為非極性或弱極性物質(zhì)，如C8、C18、苯基等，對(duì)中等極性到非極性的化合物萃取效果較好。③離子交換型樹(shù)脂柱，通常填充物質(zhì)帶有電荷，如NH2，帶電荷的目標(biāo)化合物可以被萃取出來(lái)[14]。

3.2 凝膠滲透色譜

凝膠滲透色譜是目前應(yīng)用比較廣泛的一種樣品前處理方法，其原理是基于體積排阻的分離機(jī)理，通過(guò)具有分子篩性質(zhì)的固定相，分離分子質(zhì)量不同的物質(zhì)。因其對(duì)分子量大的雜質(zhì)凈化效率高、適用范圍廣、可重復(fù)使用以及自動(dòng)化程度高等特點(diǎn)，在脂質(zhì)含量高的復(fù)雜基質(zhì)中，凝膠滲透色譜是農(nóng)藥多殘留分析較有效的凈化手段[15]。

3.3 微波輔助萃取法

微波輔助萃取（Microwave Assisted Extraction，MAE）過(guò)程是高頻電磁波穿透萃取介質(zhì)，從而導(dǎo)致細(xì)胞破裂，細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)自由流出，提高萃取效率的樣品預(yù)處理技術(shù)，具有設(shè)備簡(jiǎn)單，操作簡(jiǎn)便，選擇性好，萃取效率較高，應(yīng)用范圍廣泛，能耗低等優(yōu)點(diǎn)，目前已廣泛應(yīng)用于農(nóng)藥殘留提取分析[16]。

3.4 QuEChERS 前處理法

QuEChERS 技術(shù)是利用具有吸附性能的填料和基質(zhì)中的雜質(zhì)相互作用，從而達(dá)到凈化除雜的目的。近年來(lái)蔬菜農(nóng)藥多殘留測(cè)定較為常用，具有快速、簡(jiǎn)單、廉價(jià)、有效、可靠及安全的特點(diǎn)。

閆實(shí)等[17]將供試蔬菜樣品以0.1%醋酸的乙腈（V/V）作為溶劑，DiKMA ProElut 提取試劑盒對(duì)樣品進(jìn)行3 min 提取后，用DiKMA ProElut 凈化試劑盒凈化，快速檢測(cè)蔬菜樣品中的農(nóng)藥殘留。優(yōu)化的試驗(yàn)方法縮短了檢測(cè)時(shí)間、減少了溶劑用量，7 種農(nóng)藥的平均回收率為72%～123%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.0%～14.1%，檢出限為0.000 9 ～0.016 0 mg/kg。實(shí)現(xiàn)了蔬菜中農(nóng)藥殘留的快速、簡(jiǎn)便、廉價(jià)、有效、靈敏和安全檢測(cè)。

4 結(jié)語(yǔ)

樣品前處理是蔬菜農(nóng)殘檢測(cè)中的重要環(huán)節(jié)，如果處理不當(dāng)，可能對(duì)后續(xù)檢測(cè)儀器造成污染，影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。蔬菜種類繁多、基質(zhì)復(fù)雜，施用農(nóng)藥類型豐富，具有含量微量或痕量的特點(diǎn)，多農(nóng)殘檢測(cè)難度較高。在對(duì)待測(cè)樣品進(jìn)行前處理時(shí)，要根據(jù)樣品的種類、基質(zhì)特點(diǎn)、待測(cè)農(nóng)藥類別和性質(zhì)及檢測(cè)方法對(duì)前處理方法進(jìn)行科學(xué)合理的選擇。近年來(lái)，隨著蔬菜農(nóng)殘檢測(cè)方法的不斷發(fā)展，樣品前處理技術(shù)也在朝著高效、快速、技術(shù)聯(lián)用和多殘留同時(shí)檢測(cè)的方向發(fā)展。