葉黃素軟膠囊緩解視疲勞功能研究

張 雪，程 倩，欒金玲，董運海，張海波*

（1.酵母功能湖北省重點實驗室，湖北宜昌 443003；2.安琪紐特股份有限公司，湖北宜昌 443000）

視疲勞是以患者眼的自覺癥狀為基礎，眼或全身器質性因素與心理因素相互交織的綜合征，現已成為干擾和危害人們身心健康的慢性疾病[1-2]。隨著社會的進步與發展，工作競爭加劇，人們長期過度用眼、疲勞用眼，導致視疲勞的發生率逐年上升，有關數據顯示，我國有約1.5億以上視疲勞患者[3]。

葉黃素是含紫羅銅環的二羥基類胡蘿卜素，具有抗氧化、抗炎和抗血管生成的特性[4-5]。葉黃素在人類健康中的作用，特別是在視力健康中的作用，已通過流行病學、臨床干預研究得到了很好的證實[6-7]。WALCHUK等[8]研究發現食用富含葉黃素和DHA的雞蛋可改善健康老年人的視網膜功能。劉霽等[9]應用葉黃素酯開展人體試食試驗證實每日食用10 mg葉黃素酯對視力易疲勞者安全且有效。

藍莓學名越橘，果實中含有多種藥效成分[10]，其中花青素應用較廣泛，具有改善視力[11]、抗氧化[12]、清除自由基、降血壓[13]、調節代謝[14]等功效。周小娟[15]研究越橘花青素對豚鼠形覺剝奪性近視的防治作用中發現口服越橘花青素可抑制豚鼠形覺剝奪性近視的眼軸增長，具有防治近視作用。程強[16]證實花青素類提取物對大鼠視網膜光損傷有一定的預防保護作用，且灌胃給藥方式比滴眼給藥方式見效快。目前花青素已成為臨床眼科藥物的主要活性成分，用于治療糖尿病及高血壓性視網膜病變[17]。

β-胡蘿卜素具有與維生素A相似的化學結構，能在體內轉化為維生素A，有補肝明目的作用，可治療夜盲癥[18-20]。袁克敏等[21]在研究4種功效物質（茶氨酸、γ-氨基丁酸、β-胡蘿卜素和葡萄籽提取物）對視疲勞的緩解作用中證實，食用含β-胡蘿卜素的巧克力糖果可以有效提高受試者視力，緩解其視疲勞癥狀。蔡曉湛等[22]研究顯示血清中β-胡蘿卜素水平低者其白內障的發病率高于血清中β-胡蘿卜素高者。

視疲勞的發病率逐年上升，而緩解視疲勞的藥物都存在一定的問題。葉黃素、花青素、β-胡蘿卜素是人體無法合成的天然化學物，必須通過膳食補充獲得[23]，葉黃素有顯著的改善視疲勞功能。β-胡蘿卜素被人體吸收后，可以貯存在肝臟中，根據人體需要轉化為維生素A，不會因過量的維生素A而產生毒性。藍莓提取物中含有大量花青素，在緩解視疲勞的同時可以清除體內自由基，調節代謝。該天然物質配方可以極大地減輕藥物的副作用。因此，開發由葉黃素酯、藍莓提取物、β-胡蘿卜素3種功效成分復配的保健食品具有重要意義。

本研究根據《關于印發抗氧化功能評價方法等9個保健功能評價方法的通知》（國食藥監保化[2012]107號）中緩解視疲勞功能判定標準，對葉黃素軟膠囊進行了為期60 d的人體試食試驗的效果觀察，旨在為以上原料在緩解視疲勞產品中的適用性和使用方法提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

葉黃素軟膠囊，主要原料有藍莓提取物、葉黃素酯、天然β-胡蘿卜素，每100 g樣品中含葉黃素0.38 g、花青素2.50 g、β-胡蘿卜素0.75 g，規格為0.8 g/粒×60粒/瓶，人體推薦量為每日1次，每次1粒，口服。血細胞分析稀釋液，日本希森美康（批號：G7159）；尿試紙條，優利特（批號：G80416257）；生化試劑盒。

1.2 儀器與設備

全自動血液分析儀URIT-5250（桂林優利特）；心電圖儀ECG-1350P（日本光電）；全自動生化分析儀Viva-proE（西門子）；尿液分析儀Uritest-500B（桂林優利特）；X光機RE2100（RAYON）；B超診斷儀PREIRUS（二郎神，日立）。

1.3 試驗方法

1.3.1 受試對象

人群：成人，18～65歲，長期用眼，視力易疲勞者。排除標準：患有感染性、外傷性眼部疾病患者，進行眼部手術不足3個月者；患有角膜、晶體、玻璃體、眼底病變等內外眼疾患者；患有心血管、腦血管、肝、腎、造血系統等疾病者；妊娠或哺乳期婦女、過敏體質患者；短期內服用與受試功能有關的藥物、保健品，影響到對結果的判定者；長期服用有關治療視力的藥物、保健品或使用其他治療方法未能終止者；不符合納入標準，未按規定食用受試物者，或資料不全等影響功效或安全性判斷者。

1.3.2 試驗分組及試驗設計

將106例受試者按隨機雙盲法平均分為試驗組和對照組，每組53例，分組時考慮年齡、性別等，以保證組間的可比性。采用自身和組間兩種對照設計。分組時根據眼部疲勞癥狀及視力檢查情況，使試驗組和對照組的癥狀及視力水平均衡。試驗組服用試驗樣品，對照組服用安慰劑，連續服用60 d，試驗期間不改變原來的生活狀態及飲食習慣。

1.3.3 安全性觀察

血、尿常規檢查：白細胞計數、紅細胞計數、血小板計數等。肝、腎功能及血糖檢查：血清白蛋白（Serum Albumin，ALB）、總蛋白（Total Protein，TP）、谷丙轉氨酶（Alaninetransaminase，ALT）等。腹部B超，心電圖，X線胸部透視（僅在試驗開始前做一次）。

1.3.4 功效性觀察（試驗開始及結束時檢查）

問卷調查：癥狀詢問、用眼情況。眼科檢查：包括眼底檢查、視力檢查（近視、遠視、散光等）。明視持久度。

1.3.5 功效判定標準

（1）癥狀改善有效率。眼酸痛、眼脹、畏光、視物模糊、眼干澀、異物感、流淚和全身不適，8種癥狀中有3種改善，且其他癥狀無惡化即判定癥狀改善，計算兩組癥狀改善例數和兩組癥狀改善有效率，癥狀改善有效率（%）計算方法為癥狀改善例數/試食例數×100%。將兩組癥狀改善有效率進行統計學檢驗[24]。

（2）癥狀平均積分。計算每位試食者試驗前后的癥狀積分，分別計算兩組的平均積分值，并進行統計學檢驗，見表1。

表1 視疲勞癥狀判定方法（半定量積分法）

（3）視力改善率。統計兩組服用受試物后的視力改善率作為參考指標。參考指標不作為對緩解視疲勞功能是否有效的判定標準[24]。

（4）明視持久度。試驗組自身比較或試驗組與對照組組間比較，明視持久度有顯著性差異（P＜0.05）且平均明視持久度提高≥10%為有效[24]。

1.3.6 統計方法

采用SPSS 17.0統計軟件進行統計分析，凡自身對照資料采用配對t檢驗，兩組均數比較采用成組t檢驗，后者需進行方差齊性檢驗，對非正態分布或方差不齊的數據進行適當的變量轉換，待滿足正態方差齊后，用轉換的數據進行t檢驗。計數資料可用χ2檢驗。

1.3.7 結果判定

①試驗組自身比較或試驗組與對照組組間比較，癥狀改善有效率或癥狀總積分有顯著性差異（P＜0.05）。②試驗組自身比較或試驗組與對照組組間比較，明視持久度有顯著性差異（P＜0.05），且平均明視持久度提高≥10%。具備①及②且視力改善率未明顯降低，可判定受試物具有緩解視疲勞功能的作用[24]。

2 結果與分析

2.1 病例脫失率

試驗結束后，試驗組1人、對照組1人因間斷服用受試品被篩除，最后有效例數104例，試驗組52例，對照組52例，脫失率為1.89%。

2.2 試驗前一般資料的比較

試驗前對試驗組與對照組的一般資料進行比較，兩組人群的年齡、性別均無顯著差異（P＞0.05），見表2。

表2 試驗前一般資料比較

2.3 安全性指標觀察結果

試驗期間兩組受試人員的精神、飲食、睡眠、大小便情況等均未見異常。試驗前受試人員心率、心電圖、血壓、腹部B超檢查和X線胸部透視等數據均在正常范圍。試驗前后尿常規檢查、血常規和血生化指標結果也處于正常范圍，見表3。這與其他學者研究結果一致，如武峰等[25]研究發現口服葉黃素微粒制劑安全性良好，王黎穎等[26]通過毒理學試驗證實，鹽藻粉（主成分β-胡蘿卜素）和藍莓提取物復配后未見毒性作用，且兩者可以極大地減少體內自由基含量，保護機體免受氧化損傷。綜合不良反應觀察和檢測指標數據，證明以葉黃素、藍莓提取物、β-胡蘿卜素為主要原料制成的葉黃素軟膠囊在規定劑量范圍內對機體健康無不良影響。

表3 試驗前后血液學檢測指標（x—±SD）

2.4 功效性指標觀察結果

2.4.1 視力變化情況

試驗組自身及試驗后兩組間比較，左、右眼視力均無顯著性差異（P＞0.05）（見表4）。試驗組左眼視力改善有效率為15.38%，對照組左眼視力改善有效率為1.92%，差異有顯著性（P＜0.05）。試驗組右眼視力改善有效率為11.54%，對照組右眼視力改善有效率為1.92%，差異無顯著性（P＞0.05）（見表5）。食用葉黃素軟膠囊對于視力沒有顯著的改善作用[9]。

2.4.2 癥狀總積分變化情況

試驗組試用前后自身比較，癥狀總積分顯著降低（P＜0.01），組間比較癥狀總積分亦顯著降低（P＜0.05），見表6。試驗組癥狀改善有效率32.69%，對照組癥狀改善有效率11.54%，兩者差異有顯著性（P＜0.05），見表7。該試驗結果與張莉華等[27]研究結果一致。此外，文獻報道經常食用富含葉黃素的食物或補充葉黃素可增加血液中葉黃素的含量，防治因器官衰老引起的白內障等眼部疾病[28]。

表6 試驗前后癥狀總積分變化情況（x—±SD）

表7 試驗前后癥狀改善情況比較

2.4.3 明視持久度變化情況

明視持久度是指明視時間與注視總時間的百分比，是研究照明狀態對視疲勞影響的方法之一。試驗結果顯示，試驗組自身比較，明視持久度顯著提高（P＜0.01），平均明視持久度提高11.32%。試食后兩組間比較，明視持久度亦有顯著提高（P＜0.01），平均明視持久度提高13.46%，見表8。由此可見，食用葉黃素軟膠囊對眼部明視持久度有明顯的提高。

表8 試驗前后明視持久度變化情況（x—±SD）

3 結論

本次人體試食試驗結果顯示，葉黃素軟膠囊試食期間受試人員的睡眠、飲食、血常規、尿常規等各項臨床指標均無明顯異常，也未見其他不良癥狀，表明人體服用葉黃素軟膠囊的安全性可以滿足。試驗組食用60 d后，癥狀總積分、明視持久度有明顯改善，平均明視持久度提高11.32%，試驗組及對照組兩組間比較，癥狀總積分、癥狀改善有效率、左眼視力改善率有顯著差異（P＜0.05），明視持久度有顯著差異（P＜0.01），平均明視持久度提高13.46%。基于食藥監局發布文件中緩解視疲勞功能判定方法及標準，葉黃素軟膠囊具有緩解視疲勞的功能。

目前，越來越多的人面臨視疲勞的問題，因此緩解視疲勞的功能營養保健品需求量極大。利用天然原料制備功效明顯的保健食品是食品營養與科學研究的熱點。本研究所用原料均為天然植物原料，且被大量動物及人體試驗證明具有功效性及安全性。葉黃素對視疲勞的改善作用主要體現在兩方面，分別為光屏障作用和抗氧化作用，葉黃素可吸收大量藍光，使其無法到達視網膜。另外，通過抗氧化作用使視神經細胞、晶狀體、黃斑等免受氧化損傷，藍莓提取物中大量的花青素可增加視網膜中色覺感光色素視紫質的重生，從而保護視力，β-胡蘿卜素提供維生素A增強眼部暗視力能力，幾種主要原料的組合可協同保護眼部健康，緩解視疲勞。本研究通過分析各原料特性嚴謹搭配，制得軟膠囊成品具有良好的緩解視疲勞功能，為今后緩解視疲勞功能產品的研發提供了參考依據。