腹腔鏡闌尾切除患者降鈣素原及白細(xì)胞介素-6與T 淋巴細(xì)胞亞群水平變化及與預(yù)后的相關(guān)性

尚龍華，萬仁海，萬振達(dá)，曾文革，夏雨

江西省中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院 （江西南昌 330003）

闌尾炎是由闌尾梗阻造成管腔內(nèi)分泌物增多進(jìn)而引發(fā)管腔內(nèi)壓升高所致，多發(fā)于青壯年人群，是外科常見急腹癥之一[1]。該病的常見臨床癥狀為嘔吐、發(fā)熱、右下腹持續(xù)性脹痛或鈍痛等，具有起病急、進(jìn)展迅速等特點，若未予以及時有效的干預(yù)，可威脅患者生命健康及安全[2]。既往臨床多通過傳統(tǒng)開腹手術(shù)治療闌尾炎患者，臨床效果明顯，但該術(shù)式對患者造成的創(chuàng)傷較大，且并發(fā)癥發(fā)生風(fēng)險較高[3]。近年來，隨著微創(chuàng)技術(shù)的不斷進(jìn)步，腹腔鏡闌尾切除術(shù)逐漸被應(yīng)用于臨床治療，其具有創(chuàng)傷小且術(shù)后恢復(fù)快的特點。然而，當(dāng)前針對腹腔鏡闌尾切除術(shù)對闌尾炎患者免疫功能及炎癥反應(yīng)影響的報道較少，故本研究對腹腔鏡闌尾切除患者降鈣素原（procalcitonin，PCT）、白細(xì)胞介素-6（interleukin-6，IL-6）與CD3+、CD4+、CD8+水平變化及其與預(yù)后的相關(guān)性進(jìn)行探討，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2020 年6 月至2021 年12 月于江西省中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院接受治療的100 例闌尾炎患者為研究對象，按隨機(jī)數(shù)字表法將其分為試驗組與對照組，每組50 例。試驗組男27 例，女23 例；年齡28～51 歲，平均（38.76±5.40）歲；對照組男25 例，女25 例；年齡29～50 歲，平均（39.39±5.82）歲。兩組一般資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會審批通過，患者及家屬均簽署知情同意書。

納入標(biāo)準(zhǔn)：患者均經(jīng)B 超、CT 等影像學(xué)檢查明確診斷為闌尾炎；均于江西省中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院進(jìn)行手術(shù)治療；均為首次發(fā)病。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并嚴(yán)重心、肝、腎等臟器功能障礙；依從性差；臨床病理資料不完整；近3個月內(nèi)應(yīng)用過可能影響炎癥因子及T 淋巴細(xì)胞亞群水平的藥物。

1.2 方法

兩組均取平臥位，行氣管插管全身麻醉并常規(guī)消毒、鋪巾處理。

對照組采用傳統(tǒng)開腹闌尾切除術(shù)治療：于患者臍下6～15 cm 右旁正中切口探查并標(biāo)記闌尾底部，同時游離闌尾系膜并處理闌尾動脈，于闌尾基底部進(jìn)行結(jié)扎，然后將闌尾切斷，術(shù)畢縫合切口并包埋闌尾殘端。

試驗組采用腹腔鏡闌尾切除術(shù)治療：選擇臍下緣或上緣做1 cm 弧形切口，然后置入氣腹針建立CO2氣腹，置入10 mm Trocar，使氣腹壓維持在10～14 mmHg（1 mmHg=0.133 kPa）；隨后放置腹腔鏡，在臍和左側(cè)髂前上棘連線外1/3處附近無血管區(qū)域置入10 mm Trocar，分別作為主、副操作孔，清理腹腔積液，采用雙極電鉗對系膜進(jìn)行分離，最后切斷闌尾動脈，術(shù)畢縫合切口。

1.3 觀察指標(biāo)

（1）一般情況：收集并比較試驗組與對照組手術(shù)時間、術(shù)后進(jìn)食時間、術(shù)后排氣時間、住院時間。（2）PCT、IL-6水平檢測：分別于術(shù)前、術(shù)后3 d 采集試驗組與對照組清晨空腹靜脈血3ml，以3 000 r/min 的速度離心10 min 后取上清液，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）法檢測兩組PCT、IL-6水平。（3）T 淋巴細(xì)胞亞群水平檢測：分別于術(shù)前、術(shù)后3 d 采集試驗組與對照組清晨空腹靜脈血3 ml，以3 000 r/min的速度離心10 min 后取上清液，通過流式細(xì)胞儀（北京安鑫康科技有限公司，型號：EPICS）檢測兩組CD3+、CD4+、CD8+水平，即分離外周血單個核細(xì)胞后將其轉(zhuǎn)移至FACS 管，洗滌后加10 μl CD3-APC抗體、20 μl CD4-FITC 抗體及20 μl CD8-PE 抗體，于室溫下避光孵育30 min，加500 μl 溶血素混勻后避光孵育10 min，隨后以2 500 r/min 的速度離心5 min 后棄上清液，加入PBS 液洗滌2 次，然后加1%多聚甲醛固定，最后置于流式細(xì)胞儀檢測。（4）預(yù)后分析：術(shù)后7 d 根據(jù)試驗組預(yù)后情況將其分為預(yù)后良好組（中性粒細(xì)胞百分比為50%～70%）與預(yù)后不良組（中性粒細(xì)胞百分比>70%），比較兩組PCT、IL-6、CD3+、CD4+、CD8+水平。（5）相關(guān)性分析：探究PCT、IL-6、CD3+、CD4+、CD8+水平與腹腔鏡闌尾切除患者預(yù)后的相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 兩組一般情況比較

試驗組手術(shù)時間、術(shù)后進(jìn)食時間、術(shù)后排氣時間、住院時間均短于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），見表1。

表1 兩組一般情況比較（±s）

表1 兩組一般情況比較（±s）

住院時間（d）對照組 50 58.52±3.68 3.89±1.52 3.62±1.49 8.52±2.68試驗組 50 44.62±2.73 2.22±0.69 2.01±0.70 4.30±1.50 t 21.451 7.074 6.915 10.338 P<0.001 <0.001 <0.001 <0.001組別 例數(shù) 手術(shù)時間（min）術(shù)后進(jìn)食時間（d）術(shù)后排氣時間（d）

2.2 兩組PCT、IL-6、CD3+、CD4+、CD8+水平比較

術(shù) 前，兩 組PCT、IL-6、CD3+、CD4+、CD8+水平比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；術(shù)后3 d，兩組PCT、IL-6、CD8+水平均高于術(shù)前，CD3+、CD4+水平均低于術(shù)前，但試驗組PCT、IL-6水平均低于對照組，CD3+、CD4+水平均高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），兩組CD8+水平比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），見表2。

表2 兩組PCT、IL-6、CD3+、CD4+、CD8+水平比較（±s）

表2 兩組PCT、IL-6、CD3+、CD4+、CD8+水平比較（±s）

注：與同組術(shù)前比較，aP<0.05；PCT 為降鈣素原，IL-6 為白細(xì)胞介素-6，CD3+、CD4+、CD8+為T 淋巴細(xì)胞亞群

組別 例數(shù) PCT（ng/L） IL-6（pg/ml） CD3+（%） CD4+（%） CD8+（%）術(shù)前 術(shù)后3 d 術(shù)前 術(shù)后3 d 術(shù)前 術(shù)后3 d 術(shù)前 術(shù)后3 d 術(shù)前 術(shù)后3 d對照組 50 6.93±0.82 12.35±1.36a 7.99±2.24 31.63±6.51a 77.33±7.89 53.58±5.50a 46.13±4.71 29.85±2.89a 29.15±2.98 30.67±3.16a試驗組 50 6.96±0.70 9.58±1.01a 8.03±2.27 20.54±6.05a 76.25±7.74 58.56±5.97a 45.38±4.64 31.26±3.30a 28.96±2.97 31.53±3.28a t 0.197 11.619 0.089 8.824 0.691 4.338 0.802 2.273 0.319 1.335 P 0.844 <0.001 0.930 <0.001 0.491 <0.001 0.424 0.025 0.750 0.185

2.3 試驗組不同預(yù)后情況患者PCT、IL-6、CD3+、CD4+、CD8+水平比較

術(shù)后7 d，試驗組預(yù)后良好39例，預(yù)后不良11例。預(yù)后良好組PCT、IL-6、CD8+水平均低于預(yù)后不良組，CD3+、CD4+水平均高于預(yù)后不良組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），見表3。

表3 試驗組不同預(yù)后情況患者PCT、IL-6、CD3+、CD4+、CD8+水平比較（±s）

表3 試驗組不同預(yù)后情況患者PCT、IL-6、CD3+、CD4+、CD8+水平比較（±s）

注：PCT 為降鈣素原，IL-6 為白細(xì)胞介素-6，CD3+、CD4+、CD8+為T 淋巴細(xì)胞亞群

CD8+（%）預(yù)后良好組 39 2.10±0.43 5.38±1.56 73.33±8.25 46.79±5.22 28.46±2.24預(yù)后不良組 11 6.08±1.63 16.55±4.22 55.44±4.82 36.22±3.54 32.18±2.15 t 15.986 11.352 12.461 8.369 6.728 P<0.001 <0.001 <0.001 <0.001 <0.001組別 例數(shù) PCT（ng/L）IL-6（pg/ml）CD3+（%）CD4+（%）

2.4 PCT、IL-6、CD3+、CD4+、CD8+水平與腹腔鏡闌尾切除患者預(yù)后的相關(guān)性

Pearson相關(guān)分析結(jié)果顯示，PCT、IL-6、CD8+水平與腹腔鏡闌尾切除患者中性粒細(xì)胞百分比成正相關(guān)（r=0.323、0.339、0.272，P=0.001、0.001、0.006），CD3+、CD4+水平與腹腔鏡闌尾切除患者中性粒細(xì)胞百分比成負(fù)相關(guān)（r=-0.314、-0.306，P=0.002、0.002），見圖1。

圖1 PCT、IL-6、CD3+、CD4+、CD8+水平與腹腔鏡闌尾切除患者預(yù)后的相關(guān)性

3 討論

手術(shù)是治療闌尾炎患者的主要手段，但開腹手術(shù)對患者造成的創(chuàng)傷較大，可導(dǎo)致機(jī)體發(fā)生創(chuàng)傷應(yīng)激反應(yīng)，并激活機(jī)體炎癥反應(yīng)，增加炎癥因子含量；同時亦可導(dǎo)致局部防御功能受損，在受病原菌侵襲時易導(dǎo)致感染發(fā)生，并降低機(jī)體免疫功能[4-5]。因此，探究科學(xué)有效的闌尾切除手術(shù)對改善闌尾炎患者預(yù)后尤為重要。近年來，隨著微創(chuàng)技術(shù)的不斷進(jìn)步及完善，腹腔鏡手術(shù)因其視野清楚、創(chuàng)傷小、疼痛輕等優(yōu)勢可在很大程度上改善患者痛苦，備受臨床青睞[6]。本研究結(jié)果顯示，與對照組比較，試驗組手術(shù)時間、術(shù)后進(jìn)食時間、術(shù)后排氣時間、住院時間均較短，與李然[7]的研究結(jié)果相似，提示腹腔鏡闌尾切除術(shù)可有效縮短闌尾炎患者手術(shù)時間，有利于促進(jìn)患者身體恢復(fù)，分析原因在于，該術(shù)式可在患者腹腔內(nèi)進(jìn)行大范圍檢測并快速定位切除部位，進(jìn)而縮短手術(shù)時間；此外，手術(shù)切口較小，對患者造成的創(chuàng)傷較小，有利于患者術(shù)后恢復(fù)。

PCT 穩(wěn)定性較高，在患者體內(nèi)易被檢測到，若患者出現(xiàn)免疫抑制后其表達(dá)量顯著上調(diào)，可作為評估及治療感染性疾病的重要參考指標(biāo)[8]。IL-6在反映機(jī)體炎癥程度方面具有重要價值，可發(fā)揮促炎作用及免疫調(diào)控作用，研究證實，其表達(dá)上調(diào)可導(dǎo)致患者血管內(nèi)皮受損及血管通透性增加，同時亦可導(dǎo)致疼痛、發(fā)熱等癥狀發(fā)生[6]。本研究結(jié)果顯示，術(shù)后兩組PCT、IL-6水平均升高，但試驗組升高幅度小于對照組，與張翅等[9]及樂浩[10]的研究結(jié)果相似，提示傳統(tǒng)開腹闌尾切除術(shù)與腹腔鏡闌尾切除術(shù)均可導(dǎo)致患者產(chǎn)生炎癥反應(yīng)，但后者炎癥反應(yīng)程度較前者顯著降低，這可能是腹腔鏡闌尾切除術(shù)促進(jìn)闌尾炎患者術(shù)后恢復(fù)的重要原因之一。T 淋巴細(xì)胞是人體極為重要的免疫調(diào)控細(xì)胞，手術(shù)可導(dǎo)致其特異性免疫功能減弱，不利于術(shù)后恢復(fù)[11]。本研究結(jié)果顯示，術(shù)后兩組CD8+水平均高于術(shù)前，CD3+、CD4+水平均低于術(shù)前，但試驗組CD3+、CD4+水平降低幅度小于對照組，與樂浩[10]的研究結(jié)果相似，說明腹腔鏡闌尾切除術(shù)較傳統(tǒng)開腹闌尾切除術(shù)對患者細(xì)胞免疫功能受損的影響小。腹腔鏡闌尾切除術(shù)對闌尾炎患者機(jī)體炎癥反應(yīng)及免疫損傷的影響較小，究其原因可能在于，腹腔鏡闌尾切除術(shù)可發(fā)揮其診療結(jié)合的優(yōu)勢，可于直視下進(jìn)鏡，減少因盲目開腹而引發(fā)的傷害，同時該術(shù)式可最大限度地保留闌尾炎患者的闌尾結(jié)構(gòu)及功能。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，試驗組預(yù)后良好患者PCT、IL-6、CD8+水平均低于預(yù)后不良患者，CD3+、CD4+水平均高于預(yù)后不良患者，且PCT、IL-6、CD8+水平與患者預(yù)后成正相關(guān)，CD3+、CD4+水平與患者預(yù)后成負(fù)相關(guān)，說明以上指標(biāo)在判斷腹腔鏡闌尾切除患者預(yù)后方面具有一定價值。

綜上所述，腹腔鏡闌尾切除術(shù)可有效縮短闌尾炎患者治療時間，且對患者機(jī)體炎癥反應(yīng)及免疫損傷的影響較小，可促進(jìn)患者恢復(fù)；此外，PCT、IL-6、CD8+水平與患者預(yù)后成正相關(guān)，CD3+、CD4+水平與患者預(yù)后成負(fù)相關(guān)。