韭菜中農藥殘留檢測去除硫化物的方法比較

鶴壁市農產品檢驗檢測中心 劉小麗 張艷麗 王麗娟 王風英 劉尚偉

韭菜屬于基質復雜的蔬菜，在檢測其農藥殘留的過程中，傳統的樣品前處理方法不能有效凈化基質成分，導致目標殘留化合物的檢測分析容易產生嚴重的基質干擾現象。在樣品被攪碎制備時，韭菜中的活性酶會釋放硫化物，這些硫化物與農藥性質相似，且不易除去，影響定性與定量分析的準確性。有效去除揮發性的硫化物是測定韭菜樣品中農藥殘留的關鍵。基于此，本文開展試驗對韭菜農藥殘留檢測前處理技術進行優化，將五種去除韭菜中硫化物的方法進行比較，以求測定結果更加準確。

一、材料與方法

（一）試驗儀器、試劑

試驗儀器有Agilent 7890B 氣相色譜儀（FPD 檢測器、自動進樣器、分流/不分流進樣口）、高速分散均質機、氮吹儀、快速混勻器、電子天平、均漿機。試驗試劑有乙腈（色譜純）、丙酮（色譜純）、氯化鈉（分析純）。

（二）標準溶液的配制

標準溶液由農業農村部環境保護科研監測所提供，質量濃度均為100.0μg·mL-1。標準溶液用丙酮稀釋為10.0μg·mL-1。

（三）實驗方法

根據《蔬菜和水果中有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農藥多殘留的測定》（NY/T 761—2008）進行檢測。

二、試驗條件和過程

（一）氣相條件

韭菜去硫化物試驗，色譜柱VF-5 MS（30 m×0.25 mm×0.25 um），溫度80℃保持1 min，以每分鐘20℃的速度上升到130℃，再以每分鐘5℃的速度上升到200℃，再以每分鐘15℃速度上升到250℃，保持11 min。進樣體積1μL，不分流進樣，檢測器的溫度300℃，進樣口溫度250℃，氮氣流速30 mL·min-1，柱流速2 mL·min-1，空氣流速17 mL·min-1，氫氣流速14 mL·min-1。

（二）對硫化物的處理方法

1.微波處理法。韭菜切成2 cm 小段，中高火微波加熱40 s。既可以避免產生影響農藥殘留測定的硫化物，又可滿足回收率要求。樣品粉碎，準確稱取25.0 g試樣，加入50 mL 乙腈，在勻漿機中高速勻漿2 min 后用濾紙過濾。濾液收集到裝有5～7 g 氯化鈉的100 mL 具塞量筒中，蓋上蓋子，劇烈震蕩1 min，在室溫下靜置30 min，使乙腈相和水相分層。用大肚管從100 mL 具塞量筒中分別移取10 mL 乙腈溶液于2 個小燒杯中，將燒杯放在80℃水浴鍋上加熱，氮吹近干。加標樣用丙酮定容至5 mL，混勻、過濾膜后移入2 mL 進樣瓶內，上機測定。

2.加熱處理法。準確稱取25.0 g 試樣，加入50 mL乙腈，在勻漿機中高速勻漿2 min 后用濾紙過濾。濾液收集到裝有5～7 g 氯化鈉的100 mL 具塞量筒中，蓋上蓋子，劇烈震蕩1 min，在室溫下靜置30 min，使乙腈相和水相分層。用大肚管從100 mL 具塞量筒中分別移取10 mL 乙腈溶液于2 個小燒杯中，將燒杯放在80℃水浴鍋上加熱，氮吹近干。乙腈吹干后將燒杯在80℃水浴上繼續加熱3 min，邊加熱邊用氮氣吹，以去除韭菜中影響有機磷農藥殘留測定的干擾物質。加標樣用丙酮定容至5 mL，混勻、過濾膜后移入2 mL 進樣瓶內，上機測定。加熱時間分別取30 s、1 min、2 min、3 min、4 min、5 min 進行試驗，測定結果發現隨著加熱時間的增加，韭菜本底雜峰逐漸降低，加熱時間在3～4 min 時，農藥峰高無顯著變化，故本試驗加熱時間應為3 min。

3.磷酸處理法。稱取200 g 韭菜，加入100 mL 的10%的磷酸溶液，攪碎、混勻。準確稱取25.0 g 試樣，加入50 mL 乙腈，在勻漿機中高速勻漿2 min 后用濾紙過濾。濾液收集到裝有5～7 g 氯化鈉的100 mL 具塞量筒中，蓋上蓋子，劇烈震蕩1 min，在室溫下靜置30 min，使乙腈相和水相分層。用大肚管從100 mL 具塞量筒中分別移取10 mL 乙腈溶液于2 個小燒杯中，將燒杯放在80℃水浴鍋上加熱，氮吹近干。加標樣用丙酮定容至5 mL，混勻、過濾膜后移入2 mL 進樣瓶內，上機測定。

4.低溫處理法。冷凍試樣，提取劑乙腈稱取25.0 g放入冰箱，取出樣品解凍至2℃時，加入50 mL 乙腈，在勻漿機中高速勻漿2 min 后用濾紙過濾。濾液收集到裝有5～7 g 氯化鈉的100 mL 具塞量筒中，蓋上蓋子，劇烈震蕩1 min，在室溫下靜置30 min，使乙腈相和水相分層。用大肚管從100 mL 具塞量筒中分別移取10 mL 乙腈溶液于2 個小燒杯中，將燒杯放在80℃水浴鍋上加熱，氮吹近干。加標樣用丙酮定容至5 mL，混勻、過濾膜后移入2 mL 進樣瓶內，上機測定。

5.乙酸微波處理法。韭菜切成長2 cm 小段，稱取200 g，加入100 mL 的10%的磷酸溶液，中高火微波加熱40 s，攪碎、混勻。

韭菜試樣稱取25.0 g，加入50 mL 乙腈，在勻漿機中高速勻漿2 min 后用濾紙過濾。濾液收集到裝有5～7 g氯化鈉的100 mL 具塞量筒中，蓋上蓋子，劇烈震蕩1 min，在室溫下靜置30 min，使乙腈相和水相分層。用大肚管從100 mL 具塞量筒中分別移取10 mL 乙腈溶液于2 個小燒杯中，將燒杯放在80℃水浴鍋上加熱，氮吹近干。

加標樣用丙酮定容至5 mL，混勻、過濾膜后移入2 mL 進樣瓶內，上機測定。

表1 五種方法處理韭菜樣品回收率、相對標準偏差及檢出限比較

三、結果與討論

觀察表1，可得如下結果：

（一）微波處理法

采用微波處理法去除韭菜中硫化物，基質本底雜峰有所改善，平均回收率在59.51%～94.32%。

（二）加熱處理法

采用加熱處理法去除韭菜中硫化物，基質本底雜峰改善明顯，但由于氮吹時間延長、氮吹干，回收率低，平均回收率在59.14%～85.61%。

（三）磷酸處理法

采用磷酸處理法，處理樣品粉碎前加入磷酸，避免了有機硫化物的產生，有效去除韭菜中硫化物干擾，基質本底雜峰改善，平均回收率在66.91%～95.66%。

（四）低溫處理法

采用低溫處理法去除韭菜中硫化物，基質本底雜峰有所改善，平均回收率在59.53%～85.69%。

（五）乙酸微波處理法

用乙酸微波處理法，樣品粉碎前加入磷酸，并采用微波處理法去除韭菜中硫化物，避免了有機硫化物的產生，有效去除韭菜中硫化物干擾，基質本底雜峰改善明顯，平均回收率在76.34%～102.37%。

從以上分析結果可以看出：利用10%乙酸和40 s中高火微波處理，可有效消除韭菜基質對有機磷農藥殘留檢測干擾，消除部分韭菜本底峰干擾，從而有效地提高了韭菜中有機磷農藥殘留檢測結果的準確性。本方法既可以避免產生影響農藥殘留測定的硫化物，又可以滿足回收率的要求。采用10%乙酸與中高強度的微波處理相結合的方法，可以使韭菜中活性酶快速失活，可有效去除干擾物質。本方法測定的有機磷農藥品種只有九種，但利用本方法處理韭菜樣品后，韭菜本底雜峰減少明顯，有效消除韭菜基質對有機磷農藥殘留檢測干擾，提高韭菜中有機磷農藥殘留檢測結果的準確性，故此方法亦適用于其他蔬菜中有機磷農藥的殘留檢測。