心可舒化學成分與藥理作用研究進展

柳 晴 莊開顏 張 云 何秋霞 劉可春 夏 青 周洪雷

(1 齊魯工業大學，山東省科學院生物研究所，濟南，250103； 2 山東中醫藥大學藥學院，濟南，250355； 3 山東省人類疾病斑馬魚模型與藥物篩選工程技術研究中心，濟南，250103； 4 濟南市中藥質量生物評價工程研究中心，濟南，250103)

《中國心血管病報告2018》指出，我國心血管病患病人數約2.9億，其中冠心病1 100萬[1]。2012年以來，冠心病病死率持續攀升，嚴重影響城鄉居民健康，加重家庭負擔。心可舒由5味藥食同源中藥組成，丹參為君藥，味苦、性微寒，是治療冠心病最常用的藥物之一，具有涼血功效且不會造成血瘀，化瘀而不傷氣血。三七和葛根為臣藥，三七具有活血止血、化瘀定痛的功效，丹參與三七君臣相輔，可通可補，發揮最大的活血功效。葛根具有解肌退熱、生津透疹、升陽止瀉的功效，可增加冠狀動脈血流量、降血糖、降血脂等。木香為佐藥，辛散、苦降，暢通腸胃，為行氣止痛的良藥，能有效改善患者不良情緒。山楂為使藥，具有消食健胃、行氣散瘀、化濁降脂的功效，與丹參合用可協同預防高血脂癥狀[2]。心可舒是國家認定的冠心病首選藥，為國家中藥保護品種，臨床療效確切，并可有效緩解患者的焦慮、抑郁情緒。劑型包括片劑、膠囊劑和丸劑等，主要為片劑。本文對心可舒中的化學成分及藥理作用進行系統歸納總結，希望能夠為其進一步研究、質量控制提升和二次開發等提供依據和參考。

1 心可舒的化學成分

心可舒組方中的5味中藥都含有豐富的化合物，但目前對心可舒所含化學成分的研究并不多。2004年，He等[3]利用高效液相-二極管陣列檢測器(High Performance Liquid Chromatography-Diode Array Detector，HPLC-DAD)在心可舒片中分離出丹參素、原兒茶醛、葛根素和大豆素，含量分別為7.028 mg/g、1.214 mg/g、11.470 mg/g和0.146 mg/g。2011年，Peng等[4]采用高效液相色譜-離子阱靜電場軌道阱質譜聯用(High Performance Liquid Chromatography-Linear Ion Trap Quadrupole-OrbitrapHPLC-LTQ-Orbitrap)的方法，從心可舒片中鑒定或推測出51個化合物，包括酚酸、異黃酮-C-糖苷、異黃酮-O-糖苷、黃酮類和三萜類皂苷，通過對其中15個化合物定量分析，認為丹參素、原兒茶醛、葛根素、3-甲氧基葛根素、大豆素、大豆苷和丹酚酸B為心可舒的主要成分。2012年，王培[5]采用高效液相-二極管陣列-質譜(High Performance Liquid Chromatography-Diode Array Detector-Mass Spectrometry，HPLC-DAD-MS)聯用法鑒定出27個化合物，并測定了其中10個成分的含量，在15批次的心可舒片樣品中三七皂苷R1、人參皂苷Rb1、人參皂苷Rg1、人參皂苷Rd、丹參素鈉、原兒茶醛、葛根素、大豆苷、丹酚酸B和大豆素的平均含量分別為0.937 mg/g、2.710 mg/g、4.119 mg/g、0.808 mg/g、3.807 mg/g、0.798 mg/g、18.608 mg/g、3.559 mg/g、3.970 mg/g和0.734 mg/g，其中原兒茶醛、葛根素和大豆素含量與He等[3]研究中的含量差異較大。2013年，余輝和何勁松[6]建立反相高效液相色譜法同步定量心可舒片中4個脂溶性成分，二氫丹參酮Ⅰ、隱丹參酮、丹參酮Ⅰ和丹參酮ⅡA的平均含量分別僅為0.015 mg/g、0.018 mg/g、0.019 mg/g和0.005 mg/g。心可舒片制備工藝中丹參采用水回流提取，因此脂溶性成分含量較低。2014年，趙振霞等[7]使用高效液相色譜法和超高效液相色譜法測定出丹參素鈉在心可舒膠囊中的含量為3.08 mg/g。2016年，該課題組又測得3批心可舒丸中木香烴內酯和去氫木香內酯的平均含量分別為0.39 mg/g和1.01 mg/g[8]。此外，心可舒顆粒中測得蘆丁的平均含量為5.55 mg/g[9]，齊墩果酸和熊果酸在心可舒膠囊中的平均含量分別為0.134 mg/g和0.132 mg/g[10]。

通過整理文獻[3-10]，共得到心可舒中68個已知化合物。其中17個來源于丹參，主要為丹酚酸B等13個酚酸類成分，及微量的丹參酮ⅡA等4個脂溶性二萜類成分；26個成分來源于葛根，主要包括23個黃酮類成分等；8個來源于山楂，包括黃酮類、有機酸和三萜類等成分；12個來源于三七，均為三萜皂苷類成分；2個來源于木香的倍半萜類成分；另有5個暫時不知歸屬。其中，咖啡酸為丹參與山楂共有成分，奎寧酸為葛根與山楂共有成分。心可舒的療效與其存在的微量元素有一定關系，心可舒中含有豐富的Ca、Mg、Fe、Mn、Cu、Zn、Na、K等元素[11]。而Fe、Cu、Zn等微量元素均與心血管疾病相關。見表1，圖1～5。

表1 心可舒中化學成分

2 心可舒藥理作用及作用機制

2.1 抗心肌缺血作用 Liu等[12]評價了心可舒片對異丙腎上腺素誘導大鼠心肌梗死(Myocardial Infarction，MI)的保護作用，采用超高效液相色譜-四極桿飛行時間質譜聯用技術(Ultra-high Performance Liquid Chromatography/Quadrupole Time of Flight-Mass Spectrometry，UPLC/QTOF-MS)建立代謝組學的方法分析大鼠血漿代謝物，發現心可舒預處理MI大鼠與未經心可舒預處理MI大鼠共有17個代謝產物差異顯著，提示心可舒主要通過脂肪酸β-氧化途徑、鞘脂代謝、蛋白水解、色氨酸代謝和嘌呤代謝等通路調節MI引起的代謝紊亂。Liu等[13]以組織靶向代謝組學為基礎，從體內/體外評價了心可舒對MI大鼠的干預作用，體內實驗結果顯示，心可舒發揮作用共涉及12條代謝途徑，其中7條與Ca2+超載機制有關，H9c2細胞體外代謝調控也部分證實了其代謝作用。心可舒還可明顯逆轉磷脂酶A2(Phospholipase A2,PLA2A)Ca2+-鈣調蛋白依賴性蛋白激酶Ⅱ(Calcium/Calmodulin-dependent Protein Kinase Ⅱ,CaMKⅡ)和原胱天蛋白酶-3等3種蛋白的過表達，該研究進一步運用分子對接技術得到心可舒中11個活性成分與這3種蛋白具有穩定的親和力，包括丹酚酸B、葛根素7-O-葡萄糖苷、葛根苷B、人參皂苷Rb1、人參皂苷Rg3、三七皂苷K、丹酚酸C、紫草酸、人參皂苷Rd、Genistein-8-C-apiosyl(1-6)-glucoside和三七皂苷R1。綜合體內外代謝特征和蛋白質印跡法分析發現心可舒主要通過抑制Ca2+超載機制糾正心肌梗死代謝紊亂。Yang等[14]同樣采用代謝組學的方法探討心可舒對左冠狀動脈前降支(Left Anterior Descending Coronary Artery，LAD)結扎所致心肌梗死大鼠的治療作用機制，發現心可舒可逆轉?；o酶A合成酶長鏈家族成員1(Acyl-CoA Synthetase Long-chain Family Member 1,ACSL1)、肉堿棕櫚?；D移酶-1b(Carnitine Palmitoyltransferase-1b,CPT1b)、CaMKⅡ和PLA2A等4種關鍵蛋白的過度表達，通過抑制Ca2+超載和脂肪酸β-氧化功能障礙治療LAD心肌梗死代謝紊亂。此外，心可舒通過挽救內皮依賴性血管舒張、抑制動脈粥樣硬化進展、預防心肌缺血、改變內皮型一氧化氮合酶(Endothelial Nitric Oxide Synthase，eNOS)和血管細胞黏附分子-1(Vascular Cell Adhesion Molecule-1，VCAM-1)表達，保護家兔動脈粥樣硬化性心肌缺血損傷[15]。

2.2 抗心肌缺血再灌注損傷作用 盧金萍和歐陽靜萍[16]利用LAD建立家兔心肌缺血再灌注模型，透射電鏡觀察發現心可舒可改善心肌纖維及線粒體排列紊亂，還可明顯降低再灌注造成的丙二醛升高，明顯提升超氧化物歧化酶活性，有效升高腺嘌呤核苷三磷酸含量，從而改善心臟舒張收縮功能，其作用機制與清除氧自由基，增加血流量，改善能量代謝有關。Sun等[17]采用UPLC-Q/TOF-MS細胞代謝組學方法研究心可舒及去丹參減方對H9C2心肌細胞缺氧/復氧(Hypoxia/Reoxygenation,H/R)損傷的保護機制，發現心可舒對H/R損傷所致的氧化應激和細胞凋亡具有明顯的保護作用，還可改善H/R損傷引起代謝網絡異常。蛋白質印跡法分析表明，心可舒通過調節CaMKⅡ的過度表達和胱天蛋白酶-3活化發揮對心肌缺血再灌注損傷的保護作用。

2.3 改善內皮功能 研究表明，一氧化氮和內皮素-1(Endothelin-1，ET-1)共同調節血管內皮功能。一氧化氮能夠維持血管緊張性和反應性[18]；ET-1參與調控血管舒縮功能，它的產生和含量升高易使心肌病進一步惡化，威脅患者生命[19]。很多心肌病如心絞痛等病癥的發生與ET-1增加及血清一氧化氮減少密切相關。心可舒可以顯著降低患者體內ET-1含量，升高一氧化氮含量，改善血管內皮功能[20-21]。李曉宇等[22]利用網絡藥理學預測了心可舒片干預動脈粥樣硬化的作用機制，發現心可舒片通過調節PI3K/AKT/eNOS和Raf/MEK/ERK通路保護血管內皮細胞。

2.4 抗焦慮/抑郁作用 隨著社會的發展和醫學模式的改變，人們的心理健康越來越受到重視。流行病學研究表明，正常人群中，焦慮和抑郁的發生率分別為5%和4%～7%，心血管疾病合并焦慮抑郁患者比例較非心血管疾病患者顯著增高，冠心病合并焦慮或抑郁患者的比例高達22%[23]。臨床使用具有“雙心”療效的抗冠心病藥物尤為重要[24]。心可舒對于冠心病患者的焦慮、抑郁情緒有很好的緩解作用[25]，可以顯著改善患者的焦慮狀態，并極大提高患者的生命質量[26]。Ma等[27]對患者外周血液細胞因子水平進行評價，發現焦慮狀態的改善伴隨各種細胞因子(Trappin-2、脂聯素、白細胞介素-1β、血小板生成素、活化的白細胞黏附分子、神經營養蛋白-3和轉鐵蛋白)含量水平變化，其機制可能是通過提高抗炎與炎癥介質的血液比例來實現的。佟士驊等[28]發現心可舒片可以通過改善患者的血液流變學緩解焦慮。劉剛[29]發現心可舒片可以通過降低血漿神經肽Y水平緩解焦慮。

2.5 抗炎作用 楊明信等[30]發現心可舒對炎癥介質血清基質金屬蛋白酶9和C反應蛋白具有抑制作用。李遠等[31]研究發現心可舒可以降低患者的血清炎癥介質(血清超敏C反應蛋白、同型半胱氨酸)，提高脂聯素水平。徐飛飛等[32]利用兔動脈粥樣硬化模型研究發現，心可舒可以減少脂質斑塊，抑制炎癥反應。心可舒片還可以通過降低白細胞介素-6和可溶性CD40配體水平，產生抗炎作用[33]。

2.6 降血脂作用 Liu等[34]采用基于配備四極桿飛行時間質譜的超高效液相色譜(Ultrahigh-performance Liquid Chromatography Equipped with Quadrupole Time-of-flight Mass Spectrometry,UPLC-QTOF-MS)的代謝組學方法，對經心可舒治療前后的動脈粥樣硬化家兔的血漿進行了代謝指紋圖譜的研究，其中有20個潛在的生物標志物參與代謝，研究發現心可舒可以通過脂肪β-氧化途徑、鞘脂代謝、甘油磷脂代謝和膽汁酸的生物合成等途徑調節脂質紊亂。纖維蛋白原是多種心血管疾病的獨立預測因子，其水平的增加會導致冠心病、心力衰竭等心臟病的發生[35]，心可舒片則可顯著降低纖維蛋白原指標[36]。心可舒還可顯著降低血糖、三酰甘油、低密度脂蛋白膽固醇和高密度脂蛋白膽固醇，改善血脂水平[37]。

2.7 抗血小板聚集作用 蒯明俊等[38]研究發現心可舒片可以有效降低冠心病患者的血液黏度和血小板聚集率。心可舒片治療4周后，可改善血液流變學指標，如降低血小板黏度和表面活性，改善血液黏稠狀態[39]。采用前瞻性隨機對照試驗，將二磷酸腺苷介導血小板聚集率偏高的患者隨機分為2組，分別給予心可舒聯合脈血康膠囊和氯吡格雷治療6個月后，評價血小板聚集率及血清中超敏C反應蛋白，發現心可舒聯合脈血康膠囊組的血小板聚集率和超敏C反應蛋白都明顯低于氯吡格雷組[40]。張以昆等[41]對62例冠心病血瘀證患者進行隨機對照試驗，發現心可舒片可延長凝血酶原時間和活化部分凝血活酶時間，提高血漿組織型纖溶酶原激活物濃度的同時降低其抑制物濃度，從而起到提高纖溶系統活性和抗血小板作用。

2.8 其他藥理作用 除以上作用外，心可舒片還可以通過降低N末端原腦利鈉肽水平和左心室射血分數，從而有效改善心功能[42]。可改善冠心病患者血管彈性指標如大動脈順應指數和小動脈振蕩指數，減慢頸橈動脈的脈搏傳導速度[43]。可有效降低皮質醇激素水平，升高甲狀腺素T4水平[44]?？山档脱獫{血栓素B2水平，升高6-酮-前列腺素F1a水平，起到調節血栓素A2-血管壁前列環素平衡的效果[45]。朱維懿和顧賢棟[46]統計分析發現心可舒可顯著改善患者心率變異性(Heart Rate Variability，HRV)，還可明顯降低心率，提高HRV時域指標，最終減少心絞痛次數[47]。

3 結語與展望

本文通過查閱國內外文獻，共總結得到心可舒中68個已知化合物，主要包括丹參中的酚酸類成分，葛根中的黃酮類成分，三七中的三萜皂苷類成分，山楂中的黃酮類、三萜類成分和木香倍半萜類成分等?；瘜W成分研究是闡明中成藥藥效物質，闡釋作用機制，提升質量控制水平，實現中成藥現代化的關鍵前提。心可舒處方中5味中藥均含有豐富的化學物質，且山楂(部分)、三七和木香均為原粉入藥，由此可見心可舒化學成分研究還不夠全面。未來可利用液質聯用、診斷離子策略、分子網絡、數學拆方等多種技術手段闡明心可舒的化學物質基礎，并進一步明確成分歸屬。心可舒體內藥效物質未見報道，入血成分有待闡明，需要進一步明確體內直接效應物質。現有研究表明心可舒具有抗心肌缺血、抗缺血再灌注損傷、改善內皮功能、抗焦慮、抗抑郁、抗炎、抗血小板聚集等藥理活性，其主要作用機制涉及改善心肌代謝紊亂，清除氧自由基，調節鈣離子通路、PI3K/AKT/eNOS和Raf/MEK/ERK通路等。冠心病患者常伴有焦慮、抑郁情緒，且該情緒容易加重冠心病癥狀。臨床應用發現心可舒雙心療效顯著，但藥效成分及藥理作用仍有待深入研究。心可舒所含丹參素、丹酚酸B、葛根素、大豆苷、人參皂苷Rg1、人參皂苷R1等成分藥理作用及作用機制均已有較深入研究，但對復方中各成分間的相互作用認識仍不充分，有待進一步利用生物信息學、系統生物學等技術闡明心可舒多成分、多靶點協同起效的作用機制。因此，深層次、多方面探討化學成分與功效之間的關系，對實現心可舒現代化和二次開發具有重要意義。