多發性骨髓瘤患者血清微小RNA-424、可溶性晚期糖基化終末產物受體、c-kit受體蛋白檢測及臨床意義

杜娟英，薛海鯨

(寶雞市中心醫院檢驗科，陜西 寶雞 721008)

多發性骨髓瘤是一種由骨髓中漿細胞惡性增殖引起的疾病，高發于中老年人，預后情況存在明顯的個體差異性[1]。其病因及發病機制目前均不十分清楚，臨床癥狀多樣，缺乏特異性，均不利于此病的及時診治。與此同時，多發性骨髓瘤的治療方法較多，若能準確地評估病情，根據患者的臨床病理特征予以靶向性強的治療，有望在增加患者臨床獲益上取得顯著進展?，F階段，臨床急需尋找與多發性骨髓瘤密切相關的血清標志物，用于評估病情和指導診治。近年來，國內外研究[2-3]表明，骨髓中漿細胞在多發性骨髓瘤發生、發展中發揮重要作用，定量分析漿細胞表面和細胞質內抗原的表達情況被認為是評估多發性骨髓瘤病情的重要依據。微小RNA-424(microRNA-424，miR-424)、可溶性晚期糖基化終末產物受體(Soluble receptor for advanced glycation endproducts，sRAGE)和c-kit受體蛋白(CD117)均是研究較多的漿細胞表面標記物，上述指標的異常表達可能預示著多發性骨髓瘤的病情嚴重，預后較差[4-5]。然而，血清miR-424、sRAGE和CD117水平與多發性骨髓瘤生物學行為的關系如何，還有待明確。因此，本研究通過檢測多發性骨髓瘤患者血清miR-424、sRAGE、CD117水平進行相關分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇我院自2020年1月至2022年6月收治的多發性骨髓瘤患者125例為觀察組，其中男性65例，女性60例；年齡28～75歲，平均(61.23±4.87)歲；體重指數21～28 kg/m2，平均(22.99±1.57)kg/m2。另選一般資料與觀察組相匹配的體檢健康者125例為對照組，其中男性63例，女性62例；年齡20～70歲，平均(59.86±4.91)歲；體重指數21～28 kg/m2，平均(22.15±1.48)kg/m2。兩組性別、年齡、體重指數比較差異無統計學意義(均P>0.05)。納入標準：年齡18～80歲；觀察組患者符合多發性骨髓瘤的診斷標準，對照組入選者經體檢結果正常；入組前未接受放化療和內分泌治療；知悉研究內容，自愿參與研究，并簽署知情同意書。排除標準：合并嚴重的心、肝等重要臟器功能不全及自身免疫性疾病者；患有其他癌癥者；因其他疾病引起腎損傷者；近期服用可能影響血清miR-424、sRAGE、CD117水平的藥物者。本研究已通過醫院倫理委員會審批。

1.2 檢測方法 所有受試者在入組48 h內且在治療前，于清晨空腹狀態下采集肘靜脈血15 ml，放置在抗凝管中，離心后提取血清，用于實驗室指標檢查。采用聚合酶鏈式反應檢測血清miR-424，以2-ΔΔCt法計算miR-424相對表達量。采用酶聯免疫吸附試驗檢測血清sRAGE、CD117水平，試劑盒分別購自南京森貝伽生物科技有限公司(批號：SBJ-H1620)和上海梵態生物科技有限公司(批號： FT-D25007)。

1.3 觀察指標 比較兩組血清miR-424、sRAGE、CD117水平，觀察不同臨床分期及免疫分型多發性骨髓瘤患者血清miR-424、sRAGE、CD117水平的差異性。根據觀察組患者是否合并腎損傷，分為腎損傷組和非腎損傷組，以患者確診時血肌酐>177 μmol/L作為診斷腎損傷的依據[6]，比較兩組血清miR-424、sRAGE、CD117水平，并采用多因素Logistic回歸分析血清miR-424、sRAGE、CD117與患者發生腎損傷的關系。

2 結 果

2.1 觀察組與對照組血清miR-424、sRAGE、CD117水平比較 見表1。觀察組血清miR-424、CD117水平高于對照組，sRAGE水平低于對照組(均P<0.05)。

表1 觀察組與對照組血清miR-424、sRAGE、CD117水平比較

2.2 不同臨床分期多發性骨髓瘤患者血清miR-424、sRAGE、CD117水平比較 見表2。不同臨床分期多發性骨髓瘤患者血清miR-424、sRAGE、CD117水平比較差異有統計學意義(均P<0.05)。其中，Ⅲ期患者血清miR-424、CD117水平均高于Ⅰ期和Ⅱ期患者，sRAGE水平低于Ⅰ期和Ⅱ期患者(均P<0.05)。

表2 不同臨床分期多發性骨髓瘤患者血清miR-424、sRAGE、CD117水平比較

2.3 不同免疫分型多發性骨髓瘤患者血清miR-424、sRAGE、CD117水平比較 見表3。不同免疫分型多發性骨髓瘤患者血清miR-424、sRAGE、CD117水平比較差異有統計學意義(均P<0.05)。其中，IgG型患者血清miR-424、CD117水平高于IgA型、輕鏈型和非分泌型患者，sRAGE水平低于IgA型、輕鏈型和非分泌型患者(均P<0.05)。

表3 不同免疫分型多發性骨髓瘤患者血清miR-424、sRAGE、CD117水平比較

2.4 腎損傷組與非腎損傷組血清miR-424、sRAGE、CD117水平比較 見表4。在125例多發性骨髓瘤患者中，發生腎損傷42例。腎損傷組血清miR-424、sRAGE、CD117水平高于非腎損傷組(均P<0.05)。

表4 腎損傷組與非腎損傷組血清miR-424、sRAGE、CD117水平比較

2.5 血清miR-424、sRAGE、CD117與腎損傷關系的多因素分析 見表5。以腎損傷為因變量，以miR-424、sRAGE、CD117為自變量，進行多因素Logistic回歸分析。結果顯示，血清miR-424、sRAGE、CD117是多發性骨髓瘤患者發生腎損傷的獨立預測因素(均P<0.05)。

表5 血清miR-424、sRAGE、CD117與腎損傷關系多因素Logistic回歸分析

3 討 論

多發性骨髓瘤是一種相對常見的血液系統惡性腫瘤，可導致一系列組織器官損傷，預后情況差異較大[7]。在臨床上，針對多發性骨髓瘤的治療方法較多，但缺乏特別有效的治療藥物，而準確地評估病情，及時予以有效治療，是確保治療效果的重要策略。對于病情嚴重且復雜的多發性骨髓瘤患者而言，發生腎損傷的風險較大，是影響患者預后的獨立危險因素。若能有效預測腎損傷發生，將可能是及時進行透析治療以保護腎功能的重要依據。研究[8-9]表明，多發性骨髓瘤患者血清miR-424、sRAGE、CD117水平均存在明顯變化，在患者出現典型癥狀前即出現表達異常。由此推測，血清miR-424、sRAGE、CD117水平與多發性骨髓瘤的發生及發展密切相關。miR-424是一種能夠調控骨髓中漿細胞增殖、分化和發育的非編碼RNA，其表達明顯上調與骨髓中漿細胞惡性增殖有關[10]。sRAGE是RAGE的抑制性配體，具有抗氧化、抗炎和拮抗腫瘤發生的作用[11]。CD117是一種由原癌基因編碼的因子，其異常高水平表達可持續作用于骨髓中漿細胞，促進多發性骨髓瘤發生[12]。在本研究中，觀察組血清miR-424、CD117水平均高于對照組，sRAGE水平低于對照組，與侯艷軍等[13]研究結果相似，提示多發性骨髓瘤患者血清miR-424、CD117水平均異常升高，sRAGE水平異常降低。究其原因，可能miR-424、sRAGE、CD117的表達水平與多發性骨髓瘤的病情演變密切相關。

在多發性骨髓瘤的發生、發展過程中，骨髓中漿細胞的惡化增殖始終是促使病情進展、影響療效的重要原因。從本研究結果可知，miR-424、sRAGE、CD117均可能是影響多發性骨髓瘤病情的關鍵因子。黃垚等[14]研究表明，miR-424和CD117能夠促進多發性骨髓瘤細胞的惡性增殖、轉移甚至耐藥，兩者血清表達水平與腫瘤細胞的增殖及轉移活力密切相關。有研究[15]顯示，sRAGE是RAGE修飾后的產物，可以阻斷RAGE與其配體的結合，從而影響其促進腫瘤發生、發展的功能。研究[16]顯示，隨著多發性骨髓瘤的發展，患者血清sRAGE水平不斷降低。本研究中，不同臨床分期多發性骨髓瘤患者血清miR-424、sRAGE、CD117水平比較差異均有統計學意義，其中Ⅲ期患者血清miR-424、CD117水平均高于Ⅰ期和Ⅱ期患者，sRAGE水平低于Ⅰ期和Ⅱ期患者，提示血清miR-424、sRAGE、CD117水平與多發性骨髓瘤的病情進展密切相關。究其原因，miR-424和CD117參與骨髓內漿細胞惡性增生，而sRAGE能夠抑制骨髓內漿細胞的增殖，減緩多發性骨髓瘤的進展?；诒狙芯拷Y果，我們有理由認為，若多發性骨髓瘤患者血清miR-424和CD117水平均持續升高且sRAGE水平持續降低時，應警惕骨髓內漿細胞惡性增生能力不斷增強，病情處于進展中[17]。與此同時，本研究發現，IgG型患者血清miR-424、CD117水平均高于IgA型、輕鏈型和非分泌型患者，sRAGE水平均低于IgA型、輕鏈型和非分泌型患者，提示血清miR-424、sRAGE、CD117與患者的免疫特征有關，為多發性骨髓瘤的免疫分型提供重要依據。

腎損傷是多發性骨髓瘤的嚴重并發癥之一，早期癥狀缺乏特異性，常規檢測方法難以在早期準確地判斷患者是否發生腎損傷[18]。在臨床實踐中，部分多發性骨髓瘤患者因未能及時檢出腎損傷而錯過最佳的診治時機，影響預后。本研究初步發現了血清miR-424、CD117水平與多發性骨髓瘤的侵襲性和髓外浸潤密切相關，而sRAGE的缺失可能加劇骨髓瘤細胞的轉移和播散，而miR-424、sRAGE、CD117是否與多發性骨髓瘤患者發生腎損傷有關，則有待明確。因此，我們推測，多發性骨髓瘤患者血清miR-424、CD117水平持續升高和sRAGE水平持續降低時，患者的病情不斷惡化，更容易發生腎損傷。許德英等[19]研究認為，多發性骨髓瘤患者血清miR-424、CD117水平可以反映腫瘤負荷及病情進展程度，兩者水平升高預示著腫瘤細胞的侵襲和增殖能力均增強，產生更多的游離輕鏈導致腎損傷。也有研究[20]顯示，血清sRAGE水平與多發性骨髓瘤的腫瘤負荷呈負性關鍵，能夠反映腎損傷程度。從本研究結果可知，腎損傷組血清miR-424、sRAGE、CD117水平均高于非腎損傷組，與此同時，經多因素Logistic回歸分析，血清miR-424、sRAGE、CD117均是多發性骨髓瘤患者發生腎損傷的獨立預測因素，提示檢測多發性骨髓瘤患者血清miR-424、sRAGE、CD117水平有助于評估患者發生腎損傷的風險，與時杰等[21]研究結果相似。出現上述結果的原因，考慮在于miR-424和CD117參與多發性骨髓瘤的病情進展，增加腫瘤負荷，而sRAGE能夠抑制異常免疫球蛋白生成，保護腎功能。

綜上所述，多發性骨髓瘤患者血清miR-424、CD117水平均異常升高，sRAGE水平異常降低，三者與臨床分期、免疫分型及腎損傷密切相關。本研究創新之處在于揭示了血清miR-424、sRAGE、CD117水平與多發性骨髓瘤具有密切的關系，為尋找此病的治療方案提供了新靶點。當然，本研究也存在不足之處，如樣本量不多，采取單中心研究，缺乏隨訪數據，有待日后擴大研究規模，深入分析miR-424、sRAGE、CD117在多發性骨髓瘤發病機制中的作用及與患者預后的關系，為此病的診治提供高級別證據支持。