人炭疽關聯的家畜疫情流行病學調查方案制定及實施

高青華，高傳慶，孫圣福，胡莉萍，楚遵鋒，張 月，馬慧玲，蘭鄒然，3

（1.濱州市農業農村局，山東濱州 256600；2.山東省動物疫病預防與控制中心，山東濟南 250022；3.南京農業大學，江蘇南京 210008）

炭疽是由炭疽桿菌引起的一種人獸共患傳染病，畜間以牛、馬、羊等食草動物最易感。在炭疽自然疫源地環境中存在的炭疽桿菌會通過各種途徑感染人和動物，人和動物感染后排出的炭疽桿菌又會污染環境。人炭疽病例容易被發現，而動物炭疽常因皮膚被毛發覆蓋而不易被發現，只有動物死亡后，才會被有經驗的獸醫識別。環境中的炭疽桿菌容易感染動物，而人類主要通過接觸病畜毛皮和食肉而感染，如果手部皮膚出現破損，就更易被感染，尤其是屠宰從業人員，此外吸入含有炭疽桿菌的粉塵或氣溶膠也可被感染[1]。

2021 年山東省降雨量超乎預期，而雨水沖刷導致炭疽桿菌從地下到地表，容易造成人畜感染。山東省衛健委通報，在連續6 年全省未報告人間炭疽病例后，2021 年又出現了人間病例，從而引起了省委、省政府的高度關注。出現人炭疽病例后，依據農業農村部印發的《炭疽防治技術規范》要求，獸醫部門需開展動物間的緊急流行病學調查[2]。本研究結合實踐，參考《炭疽防治技術規范》，就出現人炭疽病例后的畜間緊急流行病學調查方案的制定實施和注意事項展開探討，希望對獸醫工作者開展類似工作有所幫助。

1 方案制定與實施

《炭疽防治技術規范》要求，在出現人間炭疽病例時，需要成立調查組開展動物間緊急流行病學調查，以便確定感染來源，掌握畜間及環境中的炭疽桿菌感染及分布狀況，大致需要開展以下工作：其一，確定調查目的；其二，確定調查范圍；其三，確定調查方式；其四，確定采樣數量和檢測方法；其五，確定調查時間；其六，方案實施；最后，收集、整理和分析數據。

1.1 調查目的

調查目的主要有兩個：一是追溯人感染病例的關聯動物，協助衛健部門查找人感染病例的可能傳染源；二是掌握調查區域范圍內的畜間病例，以及環境中的炭疽桿菌污染情況。

1.2 調查范圍

人間炭疽病例所在縣級區域的所有牛羊養殖場戶以及屠宰、加工、銷售場點。

1.3 區域劃分

1.3.1 核心區 人間炭疽病例關聯的動物養殖、交易、屠宰和加工場點。

1.3.2 重點區 以核心區為中心，周邊3 km 范圍內所有牛羊養殖場戶、屠宰場點，以及全縣與其有關聯的牛羊屠宰場點、加工和銷售場點。

1.3.3 一般區 核心區、重點區以外的，全縣其他區域的牛羊養殖場點。

1.4 調查方式

1.4.1 核心區 臨床排查并填寫專項流行病學調查表，現場采集血樣和環境樣品，溯源調查人間病例發病前20 d 內養殖場內飼養動物的調入、調出情況，屠宰、加工、銷售相關動物及動物產品的流動情況，以及放牧、割草等活動。

1.4.2 重點區 臨床排查并填寫專項流行病學調查表，采集環境樣品。

1.4.3 一般區 進行相關動物養殖場點臨床排查。

1.5 采樣數量

1.5.1 核心區 采集所有與人感染病例關聯的動物抗凝血樣品，每頭（只）動物1 mL，并采集這些動物關聯場點的環境樣品，每個場點20 份，采樣中應考慮到每個場點的樣品分布。

1.5.2 重點區 每個場點采集環境樣品5 份。

1.5.3 一般區 根據臨床排查情況進行采樣。

1.6 檢測方法

對血樣，采用堿性美藍莢膜染色鏡檢法（或其他染色法）或熒光PCR 方法檢測；對環境樣品，采用熒光PCR 方法檢測。

1.7 調查時限

3 d 內完成所有調查、采樣和檢測工作。

1.8 實施要求

各鄉鎮（街道辦）獸醫站將動物炭疽排查日報表于每天下午3 點前報縣動物疫病預防控制機構。炭疽流行病學調查表于開始調查后第3 天下午5 點前報縣動物疫病預防控制機構。對檢測發現的陽性動物，嚴格按照《炭疽防治技術規范》處置。對核心區，由養殖戶和畜牧獸醫部門共同開展消殺工作；對重點區和一般區，由畜牧獸醫部門指導養殖戶自行開展消殺工作。

1.9 報告撰寫

由緊急流行病學調查組撰寫報告，根據調查進度寫出初步調查報告、階段性調查報告和調查報告終稿等。

2 注意事項

2.1 劃定區域，基于風險抽樣，減少工作量

通常情況下，根據人間病例關聯情況，將調查范圍劃為核心區、重點區和一般區。核心區一般確定為與人間病例緊密關聯的養殖、屠宰、銷售和加工場點，如果人間病例所在縣從事零星宰殺動物的場點比較容易確定，那么可以將這些場點也納入核心區進行重點調查和采樣。核心區的調查往往決定整個調查的質量和進程，所以在制定調查方案時，確定核心區要慎重，應認真研究后確定；選擇調查場點時，應考慮動物種類，是僅調查牛相關場點，還是僅調查羊相關場點，或是牛羊相關場點都調查，這取決于與人間病例關聯的動物種類。

2014 年后山東省已連續6 年未報告人間炭疽疫情，2021 年再次發現人炭疽病例，這與動物的調入和雨水的異常增多有一定關系，但人炭疽病例數量較少，推斷關聯的動物感染數量也不會太多。因此，沒有必要開展大范圍采樣，否則會增加大量無效勞動。采樣時要注重基于風險的采樣，找準與人間病例密切相關的養殖、屠宰、加工、銷售場點以及相關動物、環境，這樣才能提高采樣效率，找準問題，發現炭疽病源。在制定方案時，一定要重點考慮采樣環節的設置，從開展的采樣檢測情況看，大部分活動物檢測結果為陰性。對活動物采樣比較困難，所以應盡可能減少采樣數量，以減輕工作量，提升工作效率。因此，風險場點的環境樣品應是采樣重點。

2.2 做好個人防護

炭疽樣品采集涉及風險點采樣，因此一定要做好個人防護。鞋套和手套應選擇緊固、不容易扎破的，同時還要考慮便利穿戴和脫下，防護服需要保證質量，盡可能防止采樣時被感染。到現場前，可服用阿莫西林、環丙沙星、紅霉素、羅紅霉素、阿奇霉素等抗菌藥物預防。另外，在對牛、馬等大動物采樣時，一定要做好保定工作，防止其對人產生傷害。

2.3 做好車輛消毒

到達風險點的車輛也存在炭疽桿菌污染風險，所以要避免車輛過于接近風險場點。人員上車前應脫下穿戴的防護用品，不可將用過的防護用品帶回到車內。制定車輛消毒規程，對去過風險點的車輛開展消毒工作，包括車輛外表和車輛內部的消毒。

2.4 現場調查時及早申請公安部門介入

從目前人間炭疽病例的發生情況來看，多數病例通過與發病或病死動物接觸而感染[3-5]。而宰殺發病或病死動物是非法的，因此相關人員往往存在隱瞞心理，現場與其交流時獲得的信息可信度較低，這通常會直接影響調查效率。因此，對于炭疽的現場調查，一定要申請公安部門盡快介入，如果仍然不能獲取可靠信息，則建議公安部門采取偵破手段，來獲取真實信息。

2.5 多種檢測方法結合使用

動物炭疽的檢測可參考《動物炭疽診斷技術》（NY/T561—2015），將堿性美蘭莢膜染色法、革蘭氏染色法等用于細菌學檢查，也可以使用PCR方法進行核酸檢測。染色鏡檢法和PCR 法各有利弊，需要結合使用。染色鏡檢法操作簡便，檢測成本較低，但是由于整個檢測過程均需人工操作，從視野中尋找目標菌，工作量較大；而PCR 方法由于可以采用批量快速核酸自動提取技術，工作量相對較小，適合于大批量樣品檢測。從理論上來說，染色鏡檢法的檢出限應該會比PCR 法更低，畢竟提取和擴增炭疽桿菌需要一定炭疽桿菌拷貝數。熒光PCR 法檢出限也較低，但仍不及染色鏡檢法的檢出限。目前農業行業標準和出入境動物檢疫標準中還沒有納入熒光PCR 檢測方法，但是市場上已有不少熒光PCR 商品試劑盒，期待早日將熒光PCR 方法納入動物炭疽診斷相關標準，以滿足實際需求。

2.6 其他措施

一旦發生洪澇災害，務必按照農業農村部《洪澇災害后動物防疫技術指南》，做好災后消毒、死亡畜禽無害化處理、緊急免疫等防疫措施。