靳淑委,張光波,常 羽,楊軍艷
(1.石家莊理工職業學院,河北石家莊 050228;2.石家莊科技信息職業學院,河北石家莊 050500;3.石家莊醫學高等專科學校,河北石家莊 050599;4.石家莊工程職業學院,河北石家莊 050000)
雞蛋是人類飲食中重要的動物蛋白和營養成分來源之一。近年來,由于抗生素在家禽中的濫用,雞蛋中的藥物殘留引起了全世界關注(Vandemaele 等,2002)。此外,抗生素濫用還會導致腸道菌群失衡、腹瀉、免疫功能低下等問題(Willing 等,2011)。中草藥是中國瑰寶,具有安全、高效、低殘留等特點,是動物疾病預防或治療的常用添加劑。黃芪作為一種傳統中草藥,其主要有效藥物成分包括多糖、皂苷、黃酮類、蒽醌類、生物堿和多種氨基酸(Li 等,2014)。據報道,黃芪具有抗炎、抗病毒、抗氧化(Shahzad 等,2016)、增強免疫力等作用,已廣泛應用于畜禽生產。在過去的幾年里,黃芪多糖作為飼糧添加劑在畜禽生產中的應用有大量研究。但黃芪提取物作為蛋雞飼糧添加劑的應用還沒有系統評價。因此,本研究以黃芪提取物為添加劑,以期為中草藥添加劑在蛋雞生產中的應用提供理論支撐和技術支持。
1.1 試驗材料 試驗采用單因子試驗設計,將360 只生理狀態接近58 周齡京粉1 號蛋雞隨機分成4 組,每組6 個重復,每個重復15 只雞,飼喂不同濃度黃芪多糖(主要成分為0、500、1000、2000 mg/kg),預飼期1 周,正式期6 周。
1.2 飼養管理 飼養試驗蛋雞采用3 層半開放式立體雞籠,每個籠3 只雞,每天16 h 光照,8 h 黑暗。飼糧為干粉料,每天7:00、12:00 和18:00 各飼喂一次,撿兩次蛋。自由采食和飲水,試驗雞群實施常規免疫。試驗期間蛋雞自由采食和飲水。
1.3 生產性能與蛋品質指標測定 試驗期間記錄試驗雞死亡數和淘汰數,每天記錄產蛋數、蛋重。計算其產蛋率、平均日采食量、平均蛋重和料蛋比。
試驗周期末,每個重復收集5 枚蛋用于檢測蛋品質。用電子游標卡尺測定蛋形指數,美國ORKA 蛋殼厚度儀測定蛋殼厚度;日本蛋殼強度計測定蛋殼強度;以色列蛋品質分析儀測定其綜合蛋品質。

表1 基礎日糧組成及營養水平(風干基礎)
1.4 樣品采集與抗氧化指標檢測 在正式飼養42 d 后,每個重復隨機挑選1 只雞,共24 只。禁食12 h,自由飲水。肝臟同一位置取樣于離心管中,液氮保存,用于抗氧化酶活性和基因表達檢測。本試驗所用的抗氧化檢測試劑盒均購自南京建成,其試驗步驟根據相應說明書進行。
1.5 數據處理 試驗數據使用SPSS 軟件進行單因素方差分析(one-way ANOVA),采用Duncan’s 法進行多重比較,數據以“平均值”表示,P<0.05 表示差異顯著。
2.1 黃芪提取物對蛋雞產蛋性能和蛋品質的影響 由表2可知,與對照組相比,2000 mg/kg 黃芪提取物組蛋雞產蛋率顯著提高(P<0.05)。黃芪提取物添加水平對蛋重無顯著影響(P>0.05)。2000 mg/kg 黃芪提取物組較對照組顯著提高蛋黃比例(P<0.05)。黃芪提取物對哈氏單位、蛋殼厚度和蛋殼強度均無顯著影響(P>0.05)。

表2 日糧中添加不同水平黃芪提取物對生產性能的影響
2.3 添加黃芪提取物對肝臟抗氧化酶活性的影響 由表4可知,隨著飼糧AEP 水平的增加,肝臟中T-SOD 的活性呈二次增長(P<0.05)。與對照組相比,2000 mg/kg AEP 組肝臟中GSH-Px活性顯著升高(P<0.05)。隨著飼糧中AEP 添加量的增加,黃芪多糖對肝臟羥自由基和超氧陰離子清除能力呈線性增加(P<0.05),MDA 水平呈線性降低(P<0.05)。
2.4 添加不同濃度黃芪提取物對肝臟基因表達的影響 由表4可知,與對照組相比,2000 mg/kg AEP 組SOD1、SOD2 和GPX4 mRNA 表達量顯著升高(P<0.05)。與500 mg/kg 組相比,2000 mg/kg 組肝臟中SOD1、SOD2 和GPX4 mRNA 表達量顯著升高(P<0.05)。Nrf2 mRNA 表達量隨飼糧中AEP 添加量的增加呈線性增加(P<0.05)。

表3 日糧中添加不同水平黃芪提取物對蛋品質的影響

表4 不同濃度黃芪提取物對肝臟抗氧化活力的影響 U/mg prot

表5 不同濃度黃芪提取物對肝臟基因表達的影響
有研究表明,發酵黃芪可以顯著提高蛋雞生產性能和蛋品質(Shi 等,2020)。在本研究中,飼糧添加黃芪多糖對蛋重、飼糧消耗量、料蛋比、哈氏單位和蛋殼強度均無影響,但可顯著提高產蛋率和蛋黃比例。這與本試驗結果相似,可能原因是AEP 可改善蛋雞抗氧化性能,進而增加產蛋率。
在正常生理條件下,自由基和抗氧化酶在體內呈動態平衡關系(Poprac 等,2017)。一旦平衡被打破會發生連鎖反應,在體內誘發氧化損傷。SOD 和GSH-Px 在預防氧化應激中發揮了重要作用(Mates 等,1999),SOD 可有效清除體內自由基,GSH-Px 可通過促進體內H2O2的分解降低活性氧水平(Shang 等,2018)。有研究表明,蛋雞日糧中添加2% 發酵黃芪可以改善蛋雞血漿SOD、過氧化氫酶和GSH-Px 的活性(Shi 等,2020)。在本研究中,飼糧添加AEP 可以提高蛋雞肝臟抗氧化酶活性,原因可能是AEP 可通過改善蛋雞抗氧化酶活性以消除體內過多自由基。
本試驗結果表明,AEP 可以提高內源性抗氧化酶的活性,這與王翠菊等(2021)的結果相似。其原因是AEP 可以通過自身氧化來抵抗氧化應激誘導的細胞損傷。在高劑量AEP 組中,AEP 可有效清除體內活性氧,預防氧化應激誘導的細胞損傷,減少對內源性抗氧化酶的需求。在低劑量AEP 組中,較低的補充水平可能不足以有效清除自由基,原因是AEP 主要通過提高內源性抗氧化酶活性以維持體內活性氧水平的動態平衡。此外,抗氧化酶活性的增加可能與基因表達的增加有關(Tiedge 等,1997)。此前有研究表明,添加100 mg/kg 的AEP 可以提高大鼠體內SOD2 和過氧化氫酶的mRNA 表達水平(Farag 等,2019)。
Nrf2 是基本區域亮氨酸拉鏈轉錄因子家族的一員,在調節抗氧化反應的轉錄因子中發揮重要作用(Li 等,2009)。在正常生理條件下,Nrf2與細胞骨架上的Kelch 樣ECH 相關蛋白-1 結合(Nuo 等,2021)。Nrf2 的表達通過核易位提高抗氧化酶系統的防御能力(Qi 等,2018)。本試驗結果表明,Nrf2 的表達隨飼糧中AEP 水平的增加呈線性增加,抗氧化酶基因的mRNA 表達在隨AEP升高而增加,一個原因可能是大劑量添加AEP 能更有效地提高抗氧化酶活力,提高了抗氧化能力。另一個原因是抗氧化酶的基因mRNA 表達可能受NRF2 以外因素的調節(Mlakar 等,2012)。高劑量AEP 的加入可能通過上調Nrf2 mRNA 的表達來提高抗氧化酶活性。
綜上所述,飼糧添加黃芪提取物黃芪多糖(AEP)可提高肝臟組織中SOD1、SOD2、GPX1 和GPX4 mRNA 的表達,進而通過上調抗氧化酶基因的mRNA 表達來提高抗氧化酶活性。本研究結果表明,飼糧添加AEP 可通過上調編碼酶的基因mRNA 表達來提高抗氧化酶活性。
黃芪提取物- 黃芪多糖能提高產蛋率、蛋黃比例和蛋雞抗氧化性能,在本試驗條件下,黃芪提取物最適添加濃度為2000 mg/kg。