CXCL17在慢性乙型肝炎患者中的變化及其與病毒載量和肝纖維化的關系

陳曉宇 薛國輝 許海波

慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B，CHB)是指人體感染乙型肝炎病毒持續時間6個月以上患者，臨床表現主要為乏力、厭食、惡心、腹脹、肝區疼痛等癥狀[1]。患者感染乙肝病毒后，長期持續損傷肝臟系統，進而引發全身感染癥狀，隨著病情加重，可發展為肝硬化、肝癌等，嚴重威脅患者身體健康[2]。肝組織病理檢查是評價CHB患者肝功能纖維化的金標準，然而，該方法是一種有創性操作，對患者肝臟功能具有一定的損傷[3]。研究[4]發現，肝纖維化的主要病理改變為反復或持續性肝細胞外基質增生與沉積。有研究[5]報道，肝星狀細胞能夠分泌趨化因子，同時可以表達多種趨化因子受體，與肝纖維化密切相關。部分趨化因子在CHB患者中異常表達，并且與患者肝功能和病毒載量有關[6]。當前，CHB患者治療隨訪期間仍然缺乏可靠的實驗室參考指標。CXC趨化因子家族配基17(CXC chemokine family ligand 17，CXCL17)是趨化因子家族最新成員，具有抗炎、抗菌、促進血管生成、募集免疫細胞等多種功能，能夠促進特定免疫細胞(單核細胞、樹突細胞和巨噬細胞)募集到此類黏膜屏障中，維持黏膜表面上皮細胞的穩態[7]。然而，CXCL17在CHB患者中的表達情況以及與肝功能、肝纖維化、病毒載量的關系尚不清楚，故本研究旨在通過分析CHB患者血清CXCL17水平與肝功能指標、肝纖維化指標以及病毒載量的關系，了解CXCL17在CHB患者疾病發生、發展中的具體影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019年6月至2021年6月九江市第一人民醫院肝病科收治的50例CHB患者納入試驗組，選取同期50例健康體檢者納入對照組，其中，試驗組男性28例，女性22例，年齡20～68歲，平均(43.86±9.05)歲。病程1～15年，平均(7.92±1.58)年；對照組男性26例，女性24例，年齡20～69歲，平均(44.84±10.81)歲，兩組研究對象基本資料比較，差異無統計學意義(P>0.05)。本研究已獲得醫院倫理委員會批準(審批號：JJSDYRPMYY-YXLL-2021-237)。

試驗組納入標準：均符合CHB診斷標準[8]；乙型病毒性肝炎(hepatitisbvirus，HBV)DNA陽性，且持續時間>6個月；均知情同意。對照組健康體檢者納入標準：體檢結果無明顯異常，且無肝病史。

試驗組排除標準：合并其他肝臟疾病；免疫或血液系統疾病；惡性腫瘤患者；精神疾病；心、腎功能障礙患者；高血壓、糖尿病患者。

1.2 方法 兩組研究對象均清晨空腹采集靜脈血，采集兩份血樣各5 mL，一份血樣經肝素鈉常規抗凝處理，采用阻抗法檢測血小板(platelets，PLT)；另一份血樣3 500 r/min離心分離血清，采用酶聯免疫吸附法測定血清CXCL17、谷草轉氨酶(aspartate aminotransferase，AST)、谷丙轉氨酶(alanine aminotransferase，ALT)、γ-谷氨酰轉肽酶(γ-glutamyl transpeptidase，GGT)，采用化學發光法檢測透明質酸(hyaluronic acid，HA)、Ⅲ型前膠原(procollagen Ⅲ，PCⅢ)、層粘連蛋白(laminin，LN)、Ⅳ型膠原(collagen Ⅳ，CIV)水平，采用實時熒光聚合酶鏈式反應(polymerase chain reaction, PCR)法檢測HBV病毒載量拷貝數。

采用恩替卡韋(每次0.5 mg，1次/天)治療6個月后，所有患者定期入院接受檢查(每個月1次)，對所有患者進行編號，采用直接抽樣法選取20例CHB患者，HBV DNA<500拷貝/毫升時，空腹采集靜脈血，采用酶聯免疫吸附法測定患者血清CXCL17水平。

1.3 儀器與試劑 運用科華KHB酶標儀檢測CXCL17，運用SYSMEX2100全自動血液分析儀檢測PLT，生化分析儀為日立7600，全自動免疫發光分析儀為MAGLUMI 4 000 plus，乙肝病毒載量采用ABI 7500 PCR擴增儀檢測。

1.4 觀察指標 ①CHB患者和健康體檢者血清CXCL17水平及實驗室指標：CHB患者于入院后空腹采集靜脈血，健康體檢者于體檢當日采血，測定血清CXCL17水平及實驗室指標(包括AST、ALT、GGT、PLT、HA、PCⅢ、LN、CIV、FIB-4、HBV DNA)；②分析CHB患者血清CXCL17與實驗室指標的相關性；③記錄CHB患者HBV DNA<500拷貝/毫升時，其CXCL17表達情況。

2 結果

2.1 兩組對象血清CXCL17水平及實驗室指標比較 CHB患者血清CXCL1、AST、ALT、GGT、HA、PCⅢ、LN、CIV水平均高于健康體檢者(P<0.05)，CHB患者PLT水平低于健康體檢者(P<0.05)。見表1。

表1 兩組對象血清CXCL17水平及實驗室指標比較

續表1

2.2 試驗組CXCL17與實驗室指標的相關性 Pearson相關性分析顯示，CHB患者血清CXCL17水平與PLT呈負相關(P<0.05)，與AST、ALT、GGT、HA、PCⅢ、LN、CIV、CG、HBV DNA均呈正相關(P<0.05)。見表2。

表2 CHB患者CXCL17與實驗室指標的相關性

2.3 CHB患者HBV DNA<500拷貝/毫升時，血清CXCL17表達情況 治療后，CHB患者HBV DNA<500拷貝/毫升時，血清CXCL17[(36.93±7.16)ng/L]水平低于治療前[(75.58±12.64)ng/L]，差異有統計學意義(t=11.898，P<0.001)。

3 討論

CHB具有發病率高、流行性廣的特點，據統計，我國慢性HBV感染者約7 000萬例，其中CHB患者2 000～3 000萬例[9]。CHB作為一種傳染性疾病，與母嬰垂直傳播、輸血、性傳播、免疫等因素有關[10]。乙肝病毒感染機體后，在肝細胞中大量生長繁殖，形成乙肝相關的病毒血癥及炎癥反應，當機體免疫功能降低時，對肝臟造成免疫損傷[11]。CHB難以徹底根治，臨床主要以抗病毒治療，延緩疾病進展[12]。CHB患者肝細胞壞死區發生膠原纖維增生，初期增生形成小條索稱為肝纖維化[13]。長期以來，臨床依靠肝臟活檢診斷肝纖維化，然而這種創傷性檢查具有一定的局限性[14]。近年來，血清學指標評價肝功能、肝纖維化一直是眾多醫學研究者關注的熱點，尋找與肝纖維化密切相關的血清因子對于臨床診斷以及指導臨床治療具有重要意義。

趨化因子參與免疫調節、血管生成、腫瘤發生等過程[15-16]。CXCL17在肝纖維化過程中表達增加，進而損傷肝細胞，加重肝纖維化[17-19]。本研究結果顯示，CHB患者血清CXCL17、AST、ALT、GGT、HA、PCⅢ、LN、CIV水平均高于健康體檢者，CHB患者PLT水平低于健康體檢者，Pearson相關性分析顯示，CHB患者血清CXCL17水平與PLT呈負相關，與AST、ALT、GGT、HA、PCⅢ、LN、CIV、HBV DNA均呈正相關，表明CHB患者血清CXCL17水平變化與肝功能及肝纖維化有關。CXCL17具有抗炎、抗菌、免疫、促進血管生成等作用，在骨骼肌、胃、肺以及泌尿系統中均可表達，能夠通過信號轉導途徑在癌細胞中表達[20]。Burkhardt等[21]研究發現，在特發性肺纖維化中CXCL17表達升高，可能參與肺纖維化的發病機制。有研究[22]發現，CXCL17可以通過下調MMP1和miR-29介導的皮膚成纖維細胞I型膠原參與纖維化，在小鼠模型中局部注射CXCL17，可減輕博來霉素誘導的小鼠皮膚纖維化。本研究部分CHB患者經抗病毒治療后，HBV DNA<500拷貝/毫升時，血清CXCL17水平低于治療前，表明臨床抗病毒治療可以降低血清CXCL17水平，對于阻止肝纖維化具有重要作用。然而，本研究納入病例有限，統計學中不可避免出現一定的偏差，可能會一定程度影響研究結果，在后續研究中，仍需擴大樣本，進一步證實CHB患者血清CXCL17水平與肝纖維化的關系，并深入探究CXCL17水平變化在肝纖維中的具體影響機制。

綜上所述，CHB患者血清CXCL17水平異常升高，CXCL17水平變化與病毒載量及肝纖維化有關，臨床抗病毒治療可以降低血清CXCL17水平。