21種中藥材中黃曲霉毒素B1的污染狀況及致癌風險分析*

趙思源，曹德艷，王 焱，秦佳琪，周同寧，朱美霖

(1.寧夏醫科大學公共衛生與管理學院，寧夏 銀川 750004；2.寧夏醫科大學環境因素與慢性病控制重點實驗室，寧夏 銀川 750004；3.寧夏醫科大學基礎醫學院，寧夏 銀川 750004)

中藥主要來源于天然藥及其加工品，包括植物藥、動物藥、礦物藥及部分化學、生物制品類藥物。《神農本草經》是我國歷史上第一部中藥學巨著。目前，以中藥材為原料制成的中藥及中成藥在藥物領域占據了相當大的份額，部分藥食同源性中藥材也被當作日常食物被人們大量攝入[1]。因此，中藥材的質量逐漸被人們所重視。而中藥材往往在采集、儲藏、炮制等過程中易受到真菌污染，從而降低藥材品質，并會對人體健康有所威脅[2]。黃曲霉毒素最早于1960年被發現，主要是由黃曲霉和寄生曲霉腐敗產生的次生代謝產物，是一類有著相似結構的真菌毒素。目前，世界上已分離鑒定出12種以上的黃曲霉毒素，常見的有黃曲霉毒素B1(AFB1)、B2、G1、G2、M1、M2、B2a、G2a、BM2a和GM2a等[3]。在主要的黃曲霉毒素中，AFB1是污染樣品中最常見的代謝物。早在1993年，黃曲霉毒素就被世界衛生組織的癌癥研究機構劃定為1類致癌物[4]，其致癌機制是通過影響細胞周膜、干擾特定酶的誘導方式和抑制RNA合成而實現，是一種毒性極強的劇毒物質[5]。黃曲霉毒素主要損害肝臟和腎臟，嚴重時可致人患癌癥死亡。肝癌在全球癌癥致死率中排第3位，而黃曲霉毒素是肝癌的重要誘因之一[6]。

影響中藥材中黃曲霉菌生長和產毒的因素主要包括藥材種類、產地、土壤類型、病蟲害侵害程度、共存霉菌種類、成分、加工炮制方法、運輸、儲藏條件(含水量、環境溫度、濕度)等[7]。本文針對近20年國內外期刊報道的柏子仁等21種受AFB1污染的中藥材檢測數據進行匯總分析。

1 資料與方法

1.1數據來源 檢索中國知網、維普、Pubmed、Elsevier、Springer等數據庫，檢索時間2000年1月1日至2022年1月1日，檢索關鍵詞為“中藥材和真菌污染”“中藥材和黃曲霉素”“中藥和黃曲霉素B1”“Chinese medicinal materials and aspergillus aflatox”“Aflatoxin B1”等。共得到43篇相關文獻，其中中文文獻35篇，英文文獻8篇；總共獲得數據520組，其中柏子仁54組，大棗2組，水蛭13組，地龍12組，肉豆蔻11組，全蝎11組，決明子39組，遠志62組，陳皮43組，胖大海12組，蓮子56組，檳榔20組，酸棗仁26組，桃仁6組，薏苡仁43組，僵蠶9組，麥芽7組，延胡索46組，土鱉蟲34組，九香蟲4組，蜂房10組。

1.2方法

1.2.1收集方法 查閱數據庫，對國內外報道的AFB1定量陽性樣品及其含量進行數據記錄，不包含人工接種黃曲霉到中藥材上再測定AFB1含量的報道。選擇通過實驗檢測得出具體數值的數據，選取進行過統計學分析并具有統計學意義的數據，再進一步計算這些中藥材樣本中AFB1陽性率、總體均值等指標。根據《中華人民共和國藥典(2020年版)》[8](以下簡稱《中國藥典》)對柏子仁等中藥材中黃曲霉毒素含量的規定(AFB1≤5 μg/kg,黃曲霉毒素總量小于或等于10 μg/kg)計算上述中藥材的超標樣本數及超標率。

1.2.2風險分析

1.2.2.1危害識別 AFB1難溶于水，易溶于油和多種有機溶劑，耐高溫，理化性質穩定，在食品加工過程中難被破壞而造成殘留，因此會危害到食用這些制品的動物和人。AFB1的毒性要比嘔吐毒素的毒性強30倍，比玉米赤霉烯酮的毒性強20倍。AFB1的急性毒性是氰化鉀的10倍，砒霜的68倍[9]，半數致死量為0.36 mg/kg。AFB1可誘發癌變，致癌能力為二甲基亞硝胺的75倍，比二甲基偶氨苯高900倍。AFB1如不連續攝入，一般不在體內積蓄。1次攝入后約1周經代謝將大部分排出，若持續攝入含AFB1的食物、藥物等，可造成慢性中毒[10]。

1.2.2.2危害特征描述 由于我國對于AFB1的健康風險分析尚處在發展階段，尚缺乏統一確切的評估方法。左甜甜等[11]在對動物藥中的AFB1風險進行定量評估時，采用在聯合國糧農組織和世界衛生組織下的食品添加劑聯合專家委員會(JECFA)第49次會議中委員提出的AFB1的“致癌作用強度”這一概念，進行黃曲霉毒素的危害特征描述。致癌作用強度為每1 ng/kg的AFB1攝入量導致每年每10萬人發生癌癥的病例數。通過計算得到我國AFB1的致癌作用強度為0.03。

1.2.2.3暴露評估 暴露評估是對食品中和其他渠道中可能攝入的生物、化學和物理因素進行定性和(或)定量評估，為風險評估的第3個步驟[12]。此步驟需計算出各種中藥材中AFB1的日暴露量。日暴露量的計算公式：中藥材日消費量(g/d)×中藥材AFB1測定均值(μg/kg)×消費頻率校正值/人體質量(kg)，其中中藥材日消費量采用《中國藥典》中所規定的最大攝入量；消費頻率校正值可查閱資料獲得[11]，我國中藥材年服用頻率為0.247；人體質量設為60 kg。

1.2.2.4風險描述 因AFB1毒性強，并含有致癌性，因此風險描述的方法與評價農藥殘留重金屬等方法不同[13]。經查詢文獻找尋合適的方法，確定采用JECFA提出的“超額風險”[14]方法來對AFB1進行風險描述。超額風險為黃曲霉毒素暴露可能增加的肝癌病例數，美國環保署選用的可接受水平是百萬分之一，即認為在每100萬人中增加1例癌癥病例，表明風險在可接受范圍內[15]。AFB1超額風險計算公式：日暴露量×致癌作用強度×10。

1.2.3靈敏度分析 使用Crystal ball軟件，對相關影響因素進行蒙特卡洛模擬，得到相關因素對最終結果影響的靈敏度，分析各因素對超額風險的影響程度。

2 結 果

2.121種中藥材中AFB1污染情況分析 中藥材出現的不同程度AFB1污染情況見表1，相關數據來自文獻[3]、[11]、[13]、[16-46]。柏子仁、大棗、胖大海、蓮子、檳榔、酸棗仁、薏苡仁、麥芽、土鱉蟲、九香蟲、蜂房10種中藥材的AFB1檢出率較高，均不低于50.00%，但大棗(50.00%)和麥芽(71.40%)的合格率為100.00%。這2種中藥材易受到污染但受污染程度不高。柏子仁、蓮子、檳榔、薏苡仁、九香蟲、蜂房6種中藥材的合格率均低于70.00%，并且AFB1均值均超過了《中國藥典》的規定。這6種中藥材受AFB1污染程度較高，其中蓮子、蜂房、九香蟲的AFB1均值超過標準數倍，應當引起重視。地龍(12批)和全蝎(11批)雖收集到10組以上數據，但均未顯示有AFB1污染，從側面反映出這些種類的中藥材受AFB1污染的情況。蓮子、柏子仁、遠志、陳皮、酸棗仁、延胡索的陽性最大值超出《中國藥典》規定值的15～110倍。

表1 21種中藥材中AFB1污染情況分析

續表1 21種中藥材中AFB1污染情況分析

2.221種中藥材中AFB1日暴露量及超額風險分析 21種中藥材所含AFB1的日暴露量為0～3.137 0 ng/kg，超額風險為0～0.941 1，即AFB1暴露可能增加的肝癌病例數在每100萬人中不足1人，因此在用藥時，藥量符合《中國藥典》中所推薦攝入量，此風險可控。九香蟲(0.941 1)、蜂房(0.648 5)蓮子(0.585 0)3種中藥材的超額風險較高，均超過了0.500 0，尤其蓮子作為藥食同源性中藥材，在日常生活中攝入量與普通中藥材相比較高，如在我國南北方均存在制作某些湯品或甜品時會加入蓮子的情況，從而在攝入時提高了致癌風險，因此要關注此3類中藥材中AFB1的致癌風險。見表2。

表2 21種中藥材中AFB1日暴露量及超額風險分析

2.3各影響因素對超額風險的靈敏度分析 柏子仁、遠志、陳皮、蓮子、檳榔、酸棗仁、薏苡仁、延胡索、土鱉蟲9種中藥材AFB1測定均值對超額風險的靈敏度均達到了97.000%以上，其余樣本含量較小的中藥材AFB1測定均值與中藥材日消費量對超額風險的靈敏度均為33.000%左右，人體質量對超額風險的靈敏度均小于0(薏苡仁除外)。當樣本量足夠大時，中藥材AFB1測定均值為超額風險的主要影響因素。見表3。

表3 各影響因素對超額風險的靈敏度分析(%)

3 討 論

本研究結果顯示，中藥材受AFB1污染的情況較為普遍，而這些中藥材中AFB1的慢性致癌風險均在可接受范圍內。但因每種中藥材的功效不同，熬制中藥時往往會搭配使用，有一部分中藥材還屬于“藥食同源型”中藥材，在日常生活中攝入量更高，故在計算日暴露量時與現實情況會存在一定誤差。本研究結果顯示，部分中藥材受AFB1污染嚴重，甚至嚴重超標，檢出率和超標率最高達到了100.00%，陽性最高值達到了586.00 μg/kg，超出《中國藥典》規定的數百倍之多，若意外食用可能引起嚴重的急性中毒情況，具有極高的急性風險，可能嚴重危害消費者身體健康。目前，《中國藥典》中只規定了柏子仁等24種中藥材中AFB1的限量標準，并未包含所有種類的中藥材，并且在AFB1風險評估領域還存在方法空缺，因此建議出臺較為完備的針對所有中藥材中AFB1的限量標準及相應的急慢性風險評估方法。

AFB1危害范圍廣、危害物種多，全球約25%的食品受真菌污染，這使得黃曲霉毒素污染成為一個全球性問題[46]，其不僅能造成巨大經濟損失、影響作物進出口貿易，更嚴重威脅動物和人的健康。因此，農作物AFB1檢測及防控措施需要引起人們重視[47]。黃曲霉毒素污染易在溫暖、濕潤的環境下發生。環境條件、田間管理和儲藏加工等因素都可能會導致黃曲霉毒素污染情況[48]。因此，中藥材工廠、藥店、商場等在運輸、儲藏、加工、銷售中藥材的過程中應更加注意中藥材是否有損壞、所處環境是否合適等問題。

目前，我國中藥材遭受的真菌毒素污染不止有AFB1，還有赭曲霉毒素、伏馬毒素、玉米赤霉烯酮類毒素及雜色曲霉素。這些真菌毒素的過度攝入會對人體產生致癌、致畸、內臟損傷、影響生殖能力等危害[49]。上述真菌毒素在不同地區的不同中藥材中的含量也是不同的，某種中藥材中可檢測出受到不止1種真菌毒素污染的情況，而這些真菌毒素之間是否存在協同作用，從而使人體攝入后產生更嚴重的不良后果，還需進一步研究。大量研究資料表明，在糧食、油料作物的種子和加工品及其他各種食品中均發現了AFB1的存在,尤其油脂類食品是AFB1的主要污染對象[50]。當日常攝入被AFB1污染的食物后，再攝入被AFB1污染的中藥材，會造成毒性疊加的后果，從而大大提升了因AFB1而患癌癥的風險，因此食品中AFB1的污染情況不容小覷。

綜上所述，21種中藥材受AFB1污染嚴重，其中19種中藥材受到了AFB1污染，并且14種出現了不同程度的AFB1含量超標情況。21種中藥材的超額風險均小于1，即符合《中國藥典》用法用量，其慢性致癌風險在可控制范圍內。目前，除了關注AFB1對中藥材的污染外，還需注意其他真菌毒素對中藥材質量的影響及對人體的危害，并且日常飲食中也應加強對AFB1污染的重視，防止致癌風險的增加。