蒙藥扁蕾研究進展

娜布其 白碩雅 辛 穎 王青虎

內蒙古民族大學蒙醫藥學院，內蒙古 通遼 028000

扁蕾(哈日-特木日-地格達)為龍膽科(Gantianaceae)植物扁蕾Gen-tianopsisbarbata(Froel.) Ma的干燥全草，具有清“協日”、清熱等功效，用于治療頭痛、肝熱、黃疸等癥[1-3]，是蒙醫臨床習用的清“協日”特色蒙藥。在我國不同地域廣泛分布，也分布于西伯利亞、蒙古、歐洲等國家。為了更好地揭示扁蕾現代研究情況及為后期深入探究提供有力依據，本文收集、歸納及整理了近幾十年國內外關于扁蕾化學成分及藥理研究等方面的研究進展。

1 化學成分研究

目前，運用化學、色譜及波譜等技術對不同地區扁蕾進行分離鑒定，現已從扁蕾中分析得到的化合物有雙苯吡酮及其苷、萜類、黃酮和其它類成分。

1.1 雙苯吡酮及其苷 扁蕾中分析得到的雙苯吡酮及其苷有24個[5-14]，分別為1,7-二羥基-3,8-二甲氧基雙苯吡酮、7-羥基-3,8-二甲氧基雙苯吡酮-1-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、1,3,5,8-四羥基雙苯吡酮、去甲當藥苷、龍膽雙苯吡酮酚、1-羥基-3,7,8-三甲氧基雙苯吡酮、1,8-二羥基-3,7-二甲氧基雙苯吡酮、1-羥基-3,7-二甲氧基雙苯吡酮、1,7,8-三羥基-3-甲氧基雙苯吡酮、芒果苷、8-羥基-4,5,7-三甲氧基雙苯吡酮、1-羥基-7-甲氧基雙苯吡酮、7,8-二羥基-3-甲氧基雙苯吡酮-1-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、5-羥基-3-甲氧基雙苯吡酮-1-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、蔓龍膽雙苯吡酮苷、8-羥基-3,7-二甲氧基雙苯吡酮-1-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、1,8-二羥基-2,6-二甲氧基雙苯吡酮、1,3,8-三羥基-5,6-二甲氧基雙苯吡酮、1,5,8-三羥基-3,4-二甲氧基雙苯吡酮、7-羥基-3,8-二甲氧基雙苯吡酮-1-O-[β-D-木糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷]、7,8-二羥基-3-甲氧基雙苯吡酮-1-O-[β-D-木糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷]、3,7,8-三甲氧基雙苯吡酮-1-O-[β-D-吡喃木糖基-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷]、Swertiabisxanthone，其結構式如圖1所示。

圖1 雙苯吡酮及其苷類化合物結構式圖

1.2 萜類 扁蕾中的萜類化合物[8,15-16]有齊墩果酸、龍膽苦苷、熊果酸和獐牙菜苦苷，其結構式如圖2所示。

1.3 黃酮類 扁蕾中分析所得黃酮類化合物[5,8-9,11]有黃酮及其苷，分別是木犀草素、異紅草苷、芹菜素、木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、4’,5,7-三羥基黃酮、當藥黃素、金圣草黃素，其結構式如圖3所示。

圖2 萜類化合物結構式圖

圖3 黃酮類化合物結構式圖

1.4 其它類 扁蕾中分析得到的其它類化合物有5種[5,7-8 ]，分別是苯甲酸、琥珀酸、三十烷醇、胡蘿卜苷和β-谷甾醇，其結構式如圖4所示。

圖4 其它類化合物結構式圖

2 藥理作用研究

2.1 保肝利膽作用 李玥[18]通過提取，純化出濕生扁蕾的不同的極性部位, 采用膽管引流法篩選濕生扁蕾利膽作用的有效部位，并對有效部位進行化學成分分離鑒定，得到10個化合物，明確了濕生扁蕾的利膽成分。任延明[19]等利用四氯化碳 (CCl4) 致小鼠急性肝損傷模型，灌胃給濕生扁蕾提取物，并采用全自動生化分析儀測定小鼠肝組織中MDA、SOD活性和小鼠血清中ALD、ASD活性，探討了濕生扁蕾的肝損傷保護作用。結果發現，與模型組比較，濕生扁蕾提取物能明顯的降低小鼠血清中ALT、AST水平，同時能提高小鼠肝組織中SOD活性和清除氧自由基而降低MDA的作用，P值均小于0.01，具有統計學意義。從實驗結果中發現濕生扁蕾提取物對四氯化碳 (CCl4) 致小鼠急性肝損傷模型具有較好保肝作用。

盧彥兆等[20]通過建立四氯化碳 (CCl4) 致小鼠急性肝損傷模型，研究濕生扁蕾不同溶劑提取物保肝作用，結果發現與空白組比較，模型組小鼠血清中ALT、AST活性及肝組織中MDA含量明顯升高，模型組小鼠肝組織中GSH-Px活性明顯降低，P<0.01具有統計學意義；與模型組比較，濕生扁蕾組和聯苯雙酯對照組小鼠血清中ALT、AST活性及肝組織中MDA含量明顯降低，肝組織中GSH-Px活性明顯升高，P<0.05和P<0.01具有統計學意。從小鼠肝臟病理切片看出，模型組肝損傷程度嚴重，濕生扁蕾不同溶劑提取物組肝臟病理損傷程度明顯減輕。從實驗結果得出濕生扁蕾不同溶劑提取物能改善小鼠肝功能。分離于扁蕾的化學成分芒果苷對不同肝損傷大鼠模型均有明顯的保護作用[21]。

2.2 抑菌作用 王煥弟等[22]利用K-B紙片擴散法考察了濕生扁蕾中6個雙苯吡酮類成分熊果酸、1,7-二羥基-3,8-二甲氧基口山酮、齊墩果酸、1-羥基-3,7,8-三甲氧基雙苯吡酮、1,8-二羥基-3,7-二甲氧基口山酮、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷對細菌和真菌的抑制作用，結果表明濕生扁蕾中6個雙苯吡酮類成分均有不同程度的抑菌作用，其中1,7-二羥基-3,8-二甲氧基口山酮對毛霉、辣椒疫霉和瓜類枯萎病菌的抑菌作用較為明顯，從實驗結果看出濕生扁蕾對一些植物致病菌有一定的抑制作用。米琴等[23]通過研究濕生扁蕾中齊墩果酸和三組混合物對小白鼠白細胞的吞噬功能，得出灌胃給藥齊墩果酸后，小鼠脾重、脾指數和白細胞吞噬指數明顯上升，并能增強小鼠吞噬功能以及提高白細胞免疫功能；灌胃給藥濕生扁蕾三組混合物后小鼠體重、脾重、脾指數和白細胞的吞噬指數均不同程度的降低，可見，濕生扁蕾的混合物有抑制白細胞吞噬功能的作用。另外，也有研究[4]發現雙苯吡酮類具有良好的中樞神經抑制、利膽和抑制結核桿菌的作用等。也有研究[24-25]報道雙苯吡酮及其苷可增強己巴比妥的睡眠時間，同時具有抗驚厥作用。

2.3 抗腫瘤、抗癌作用 張寶琛等[26]在抗癌藥物篩選中發現，濕生扁蕾提取物能調控S180肉瘤及其瘤株的生長，因此對濕生扁蕾提取物開展了化學成分分離鑒定，得到6個單體成分。曹長年等[27]對藏藥濕生扁蕾的雙苯吡酮類成分進行了分離鑒定，得到1,7-二羥基-3,8-二甲氧基雙苯吡酮和1-羥基-3,7,8,-三甲基雙苯吡酮兩個成分，并對所分離得到的成分進行了卵巢癌HO-8910細胞毒性作用實驗，結果表明1,7-二羥基-3,8-二甲氧基雙苯吡酮和1-羥基-3,7,8,-三甲基雙苯吡酮均具有良好的卵巢癌HO-8910細胞毒性作用。劉波[28]利用SRB法對濕生扁蕾中4種雙苯吡酮類化合物的體外細胞增殖抑制能力和誘導細胞凋亡的能力進行了系統檢測。結果發現4種雙苯吡酮類化合物對HepG2細胞和HL-60細胞均具有較強的細胞毒性作用，能誘導細胞發生凋亡。米琴等[29]考察了濕生扁蕾的有效成分齊墩果酸對RC3bR、RICR的促進作用，實驗發現濕生扁蕾的有效成分齊墩果酸對實驗小鼠紅細胞免疫功能有促進作用，即具有促進紅細胞粘附作用的效應。王雅莉等[30]實驗發現藏藥濕生扁蕾不同濃度提取物對人結腸癌細胞SW480中Cyclin D1、CDK4、PCNA mRNA的表達減少，p21kip1·mRNA的表達增多，并呈現明顯的劑量依賴關系。從實驗結果中看出濕生扁蕾能引起結腸癌SW480細胞凋亡可能與其抑制Cyclin D1、CDK4、PCNA mRNA的表達和促進p21kip1·mRNA的表達有關，而通過濕生扁蕾對SW480細胞周期及增殖的調控可能有助于對結腸癌患者的病情治療，相關表達實驗結果如圖5所示。王雅莉等[31]選用SW480細胞以不同質量濃度的濕生扁蕾對其進行干預，并通過Bio-plex懸液芯片法檢測了濕生扁蕾對SW480細胞中STAT3磷酸化的水平。發現濕生扁蕾具有抑制SW480細胞STAT3活化的作用，P<0.05有顯著作用，并呈質量濃度-劑量依賴關系，結果如圖6所示，濕生扁蕾抗結腸癌的作用與其抑制IL-6介導的STAT3信號通路的活化有關。有研究[32]發現藏藥濕生扁蕾對Bcl-2 mRNA表達與藥物濃度增加而減少, 而Bax mRNA表達與藥物濃度增加而增加, 并呈現明顯的劑量依賴關系。也有研究[33]發現濕生扁蕾提取物的抗腫瘤機制是通過調控NF-κB信號通路。

圖5 濕生扁蕾對SW480細胞Cyclin D1、CDK4、PCNA和p21kip1的mRNA表達的電泳圖

圖6 藏藥濕生扁蕾對IL-6 誘導SW480細胞SATA3 活化作用的影響分析結果圖

2.4 抗腹瀉、抗炎、鎮痛作用 景明等[34]采用番瀉葉誘導的小鼠腹瀉模型，以腹瀉潛伏期和濕便總數為指標評價濕生扁蕾的止瀉作用，用Bliss法測定濕生扁蕾的半數致死量 (LD50) 。結果發現濕生扁蕾各劑量均有止瀉作用；濕生扁蕾的半數致死量為127.4 g/kg。濕生扁蕾的抗腹瀉作用，主要表現在腹瀉潛伏期延長和在相同時間內累積腹瀉次數的減少，并且具有劑量依賴性。景明等[35]同時還采用三硝基苯磺酸 (TNBS) /乙醇灌腸制作小鼠實驗性潰瘍性結腸炎模型，灌胃給濕生扁蕾，觀察對小鼠體質量變化、腹瀉、結腸黏膜組織形態學及脾臟指數的影響。結果發現濕生扁蕾提取物可不同程度地改善由TNBS的乙醇溶液所致實驗性潰瘍性結腸炎小鼠體質量下降及腹瀉癥狀，顯著降低實驗性潰瘍性結腸炎小鼠大體形態學損傷的腸黏膜粘連及其潰瘍分值，明顯抑制實驗性潰瘍性結腸炎小鼠脾臟腫大。濕生扁蕾提取物對小鼠潰瘍性結腸炎有較好的改善作用，能減輕結腸局部的病理性損傷。羅小文等[36]采用測定小鼠耳腫脹法、瓊脂肉芽腫法及角叉菜膠致小鼠炎癥滲出物中PGE2含量考察濕生扁蕾的抗炎作用；采用小鼠扭體法、福爾馬林致痛法考察濕生扁蕾的鎮痛作用。結果發現濕生扁蕾醇提物和生藥均能抑制二甲苯致小鼠耳腫脹和瓊脂致小鼠肉芽腫；抑制冰醋酸引起的小鼠扭體反應，減少小鼠的扭體次數，并延長扭體反應潛伏期；濕生扁蕾能一定程度抑制福爾馬林引起的小鼠疼痛，濕生扁蕾的醇提取物抑制作用更強。同時，景明等[37]發現濕生扁蕾的乙醇提取物、氯仿萃取物、乙酸乙酯萃取物能顯著減少潰瘍性結腸炎模型大鼠發生腹瀉與糞便隱血的動物數(P<0.05)，并且能顯著改善潰瘍性結腸炎模型大鼠結腸局部組織形態學損傷；能顯著降低潰瘍性結腸炎模型大鼠結腸組織中MPO的水平(P<0.05)。

2.5 抗肝纖維化作用 黃酮類化合物是扁蕾主要次生代謝產物之一，對實驗性肝纖維化模型動物具有顯著的治療作用。胡毅翔等[38]實驗證明黃酮類化合物對四氯化碳致小鼠肝纖維化具有良好保護作用，既能明顯降低血清中ALT、AST、LN含量及Col-Ⅳ、IL-8和IL-6水平(P<0.05)，又能顯著調節肝組織TGp-β1、SMAD2 mRNA及蛋白的表達 (P<0.05)。韋淇元等[39]發現黃酮類化合物對CCl4誘導的大鼠肝纖維化具有明顯改善作用，可以明顯減小肝組織損傷，其保護機制可能與減輕炎癥反應，抑制FAK/P13K/Akt信號傳導通路有關。徐曉燕等[40]實驗結果顯示黃酮類化合物能明顯減輕肝纖維化程度，明顯降低血清中ALT活性、Hyp含量及肝組織中 MDA 含量，而T-SOD、GSH-Px活性明顯升高。曹慶生等[41]實驗結果顯示，與模型比較，黃酮類化合物能降低大鼠血清中TNF-α、IL-1β 、HA、LN、Ⅳ-C、PCⅢ 水平、肝臟纖維化分級及α-SMA 、Vimentin 表達，差異均有統計學意義(P<0.05 )。

3 展望

從扁蕾研究狀況看，對其化學成分研究比較全面，而含量測定方面研究比較少。目前已從扁蕾中分離得到共39個化合物，其中雙苯吡酮及其苷有24個，萜類化合物4個，黃酮7個和其他類化合物5個。化合物活性及藥理方面也做了一些研究，如雙苯吡酮化合物的抗菌、鎮痛及抗腫瘤作用等；齊墩果酸的抗菌作用、木犀草素的抗纖維化作用等。但其藥理作用機制方面研究較少，有待于進一步研究。扁蕾是特色蒙藥，很有必要深入研究其定性定量分析及藥理作用機制。總之，為了使扁蕾更好地造福人類，還需要多方面的共同努力。