豬群戊型肝炎病毒的流行及防控

胡重重，李獲朋，劉天龍，佘銳萍，田紀景

(中國農業大學動物醫學院，北京 海淀 100193)

戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)是一種重要的人獸共患病病原，在全球范圍內廣泛流行。豬是HEV的重要自然宿主，自然感染率較高，通常為亞臨床感染或與其他病原混合感染。HEV主要通過糞口途徑在人和動物之間傳播，國內外均可見人群HEV聚集性感染的報道。由此可見，HEV的流行不僅對畜牧業生產造成威脅，還嚴重危害人類的食品安全。因此，了解豬群HEV的流行情況和防控措施具有重要的公共衛生學意義。本文調研近年來HEV相關的研究進展，對HEV在豬群中的流行情況、傳播方式、診斷和防控等方面展開論述。

1 HEV發現史

關于HEV感染的最早記錄是1955—1956年發生在印度新德里的一場大規模流行的水源性非甲非乙型病毒肝炎[1]。直到1983年，科學家通過免疫電子顯微鏡技術首次在志愿者的糞便中觀察并鑒定到了病毒顆粒[2]。8年后，研究人員通過緬甸分離株測定到了該病毒的全基因序列，隨后將其命名為戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus，HEV)[3]。2004年，國際病毒學分類委員會將其歸入戊肝病毒科(Hepeviridae)。該科包括正戊肝病毒屬(Orthohepevirus)和魚戊肝病毒屬(Piscihepevirus)，其中正戊肝病毒屬主要感染陸生脊椎動物，包括A、B、C、D四個種，能夠感染人類的HEV主要為HEV-A種，目前共發現8個基因型，即HEV1型～HEV8型。

1997年，Meng等[4]在美國的豬群中分離到了HEV毒株，這是首次從動物上分離到HEV毒株的報道，同時，研究人員發現其與人源HEV具有極高的同源性，且可感染黑猩猩和恒河猴，從而首次證實了HEV跨種間傳播的可能性。此后，在豬養殖業比較發達的國家和地區都鑒定出了豬源HEV毒株，豬也成為公認的HEV最重要的自然宿主，且豬源HEV已被證實可以傳播給人并引起人群戊型肝炎聚集性暴發[5]。研究顯示，病毒基因組上ORF1片段的變異可能會導致其宿主適應性的改變[6]，但目前HEV跨物種傳播的具體機制尚不完全清楚。

2 豬群HEV流行情況

世界范圍內普遍存在于人群和豬群中的人獸共患型HEV主要是HEV-3型和HEV-4型。HEV-3型主要分布在歐洲(如英國、法國、新西蘭、西班牙、希臘、意大利)、美洲(如美國、阿根廷)、亞洲(如日本、中國、韓國)、澳州(如澳大利亞)等國家和地區，而HEV-4型主要集中在中國、印度以及東亞的一些國家和地區。迄今為止，我國多個省份和地區都進行了豬群HEV流行病學調查，結果顯示，HEV在我國豬群中呈普遍流行的趨勢[7-12]。葛勝祥等[12]對來自全國20個省共9 055只育成豬進行抗-HEV抗體檢測，發現不同地區的陽性率差別較大，其中華東地區陽性率最高(88.7%)，華中地區最低(77.2%)，東南地區主要檢出HEV-4型，HEV-3型檢出較少。目前研究一般認為HEV-4型是我國豬場主要流行的基因型，研究人員對上海部分地區豬場進行跟蹤調查后發現，受感染豬只HEV-3型的RNA陽性率差異較大(4.0%～20.0%)，而HEV-4型則維持在較高水平(30.0%～44.0%)[13]，說明不同基因型的HEV在豬中可能存在感染上的競爭差異。Li等[7]首次在我國陜西省一養殖場的豬精液中檢測到了HEV的RNA，提示HEV可能通過人工授精在豬群中傳播。現有研究已證實HEV可以在豬場中持續存在，豬場的混批飼養模式、糞尿的不當處理、畜舍及運輸環境的污染、非商業化的自制飼料、嚙齒動物的媒介作用等都可能是HEV在豬場中流行的重要風險因素[14]。

豬群HEV感染率與豬只年齡和生理狀態密切相關。由于母源抗體的保護，初生仔豬較少感染HEV，2～3月齡仔豬的HEV陽性率較高，患病仔豬一般會表現出1～2周的病毒血癥，并在接下來的3～7周內從糞便中大量排毒。而大部分育成豬雖然血清可能呈HEV-IgG陽性，但并不排毒，這可能是由于HEV抗體在豬體內可以長期存在，且一個豬群在飼養過程中如果不斷有豬被感染，會使血清陽性率存在累積升高的現象[10]。Li等[11]在四川省展開研究，在其所調查的6個豬品種中，成華豬膽汁和糞便HEV RNA陽性檢出率最高，但HEV感染率與豬品種的相關性仍需進一步研究。此外，有報道發現，經產母豬的HEV感染風險比預產期母豬高出約2.5倍[15]，這可能與分娩應激或妊娠期間高類固醇激素水平促進HEV復制有關[16]，但仍需進一步的研究加以證實。豬只自然感染HEV一般不表現明顯的臨床癥狀，病理組織學檢查可發現存在彌散性或局灶性的肝臟壞死，且免疫功能低下的病例可能呈現慢性感染。值得注意的是，有研究發現HEV和豬繁殖與呼吸綜合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV)或豬圓環病毒2型(Porcine circovirus-2，PCV-2)共同感染時，病豬臨床癥狀會加重[17]，HEV是否是引起豬群其他疫病暴發的潛在因子亟待進一步深入研究。飼養環境和飼養方式也是影響豬群HEV流行情況的重要因素。有調查顯示，普通養殖場豬HEV的感染率遠高于SPF級豬養殖場，SPF級豬在普通養殖環境中飼養一段時間后亦會出現HEV感染[12]，提示我國部分養殖豬場現有的飼養方式和飼養環境可能易于HEV傳播。

研究人員對屠宰場豬HEV進行流行病學調查發現，英國有21%的豬在屠宰時HEV RNA檢測呈陽性[18]，新加坡在進口的活豬血清樣本和屠宰豬的肝臟樣品中也檢測到了病毒核酸[19]，提示存在豬源HEV通過豬肉產品流向人類的風險。雖然HEV本身對外界的抵抗力不強，但屠宰場豬肉儲存和運輸時常用的冷鏈系統在一定程度上有助于延長豬肉中病毒的存活時間，可能造成攜帶HEV的肉產品流入消費市場，導致人群暴發戊型肝炎[20]。已有研究報道從市場銷售的豬產品中檢測到了HEV，且不同豬產品中HEV RNA檢出率有一定差異，生豬肝和肝臟制品的檢出率最高，而豬肉及其制品則相對較低[21]。目前有關我國消費市場中豬產品HEV攜帶率的研究較少。我國是一個豬肉消費大國，地域廣泛，飲食習慣多樣，全面深入地調查國內消費市場豬產品HEV的流行情況將有利于提高動物性食品安全監管水平，并為制定相應的公共衛生政策提供科學依據。

3 國際貿易對HEV在全球范圍內傳播的影響

隨著經濟貿易全球化，疫病的傳播也呈現全球化態勢。一項關于HEV-4型在全球擴散歷史的研究顯示，HEV-4型最初起源于日本，隨后擴散至我國，并進一步傳播至亞洲其他國家和歐洲部分地區，提示HEV在全球的擴散可能與豬貿易與運輸行業的發展有關[22]。多項研究表明，豬群HEV感染在全球范圍內均呈現較高的趨勢，我國豬群HEV IgG血清陽性率為48.0%(39.6%～56.9%)，HEV RNA陽性率為14.4%(10.7%～18.5%)[23]；法國豬群HEV IgG血清陽性率高達65.0%(57.0%～74.0%)，肝臟中HEV RNA 陽性率為4.0%(2.0%～6.0%)[24]；對美國2017—2019年間屠宰場豬HEV的檢測發現，HEV RNA和血清IgG陽性率分別為6.3%和40.0%[25]。那么，如何在進出口貿易中避免HEV跨地區和國家傳播也正成為全球性的公共衛生問題。

4 HEV傳播方式

HEV主要經糞口途徑或食源性傳播。1986年在新疆維吾爾自治區暴發的疫情中，被病毒污染的水即為HEV傳染源。有報道稱在野外種植的草莓中曾檢測到了豬源HEV-3型，而灌溉用水被確認為潛在的傳染源[26]。2018年我國青島某工廠發生的戊肝聚集性暴發就與該工廠食堂的豬內臟菜品未煮熟有關[27]，其他國家也有因食用生的或未徹底加熱的豬肉而導致食源性HEV感染的類似報告，包括英國、澳大利亞[18,28]等國家。

職業暴露也是HEV常見的傳播途徑，獸醫、養豬場和屠宰場從業人員感染人獸共患型HEV的風險會相對升高。研究發現，在普通人群、職業暴露人群和豬群中，HEV-IgG的血清陽性率有較大差異，分別為27.3%、47.4%和66.4%[29]。普通人群直接接觸受感染動物也會導致受感染的風險增加[30]。此外，HEV也可垂直傳播、血源性傳播和器官移植傳播等[20,31]。

5 HEV的診斷方法

目前，HEV的診斷主要基于血清學檢測技術和分子生物學檢測技術。在HEV被發現早期，研究人員通過免疫電子顯微鏡和免疫熒光顯微鏡對臨床樣本中的病毒顆粒或類病毒顆粒進行檢測，該檢測方法因準確性較高，曾一度成為診斷HEV感染的金標準，但由于其操作復雜、靈敏度不高，現在已經很少被采用。1990年Reyes等[3]首次應用逆轉錄-聚合酶鏈反應技術(Reverse transcription-polymerase chain reaction，RT-PCR)在實驗獼猴的膽汁中檢測到了HEV RNA，由于RT-PCR具備敏感性高、特異性強等優點，因此，這項技術在HEV的診斷中逐漸得到廣泛的應用。此后，實時熒光定量PCR法(Real-time quantitative PCR,qRT-PCR)由于操作簡便、特異性和靈敏度高，被廣泛應用于病毒載量較低樣本的檢測[32-33]。相較于分子生物學檢測方法，血清抗原和抗HEV IgM/IgG的檢測在實際生產中的應用更加廣泛，其具備操作簡便、靈敏度高、特異性強等優點，而且抗原還可以作為區分急慢性感染的指標，并可以評估戊型肝炎的預后，實現HEV的簡單分型，其應用對于診斷的重要性不可忽視[34]。HEV的檢測技術不斷更新，HEV診斷和防控的效率也不斷提高，但不同技術各有其利弊，目前尚無公認的HEV檢測金標準。

6 展望

豬是HEV最為重要的自然宿主和傳染源，我國作為一個養豬和豬產品消費大國，監測HEV在豬群的流行規律并制定相應的防控措施，對保證食品安全、保障人類健康具有非常重要的公共衛生意義。做好豬場日常飼養管理工作，提高豬群動物福利水平，做到防病于未然，是避免豬群HEV等流行和暴發的重要措施，同時，也應考慮全球豬貿易與運輸行業的發展所帶來的HEV跨地區擴散的傳播風險。

目前臨床尚無特異且適合推廣的對抗HEV感染的治療方法，通過各種綜合防治手段消除傳染源、切斷傳播途徑是防止豬HEV傳播給人類的關鍵措施。因此，在養殖過程中應注重畜舍、管理和運輸工具、糞尿等的消毒和無害化處理，并加強外購豬的檢疫，盡量采取“全進全出”策略，以有效切斷HEV的傳播途徑。同時，應做好養殖場和屠宰場工作人員的健康監測，加強疫苗和治療手段的研發，以便防范和控制HEV的聚集性暴發。