苦參堿對(duì)妊娠高血壓大鼠內(nèi)皮損傷和JAK2/STAT3/SOSC1 信號(hào)通路的影響

李 玲武建利李 珊曲廣第

(新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院產(chǎn)科,烏魯木齊 830054)

妊娠高血壓(pregnancy-induced hypertension,PIH)是影響女性妊娠過(guò)程正常進(jìn)行的重要疾病,其病發(fā)率高,臨床上PIH 患者在妊娠20 周以后常出現(xiàn)血壓異常升高、尿蛋白增高等癥狀,不僅會(huì)損傷孕婦的腦、心、腎等器官,還是導(dǎo)致胎兒和產(chǎn)婦死亡的重要原因[1]。 研究表明,妊娠早期胎盤(pán)相對(duì)灌注不足可能導(dǎo)致胎盤(pán)異常釋放抗血管生成因子進(jìn)入母體循環(huán),致使孕婦和胎兒發(fā)生血管內(nèi)皮損傷,進(jìn)而引發(fā)高血壓[2]。 而PIH 也會(huì)導(dǎo)致胎盤(pán)組織缺血缺氧,進(jìn)而使孕婦體內(nèi)的炎癥應(yīng)答機(jī)制被激活,造成血管內(nèi)皮功能障礙[3]。 此外,過(guò)度的氧化應(yīng)激也會(huì)導(dǎo)致血管內(nèi)皮功能障礙,從而誘發(fā)炎癥反應(yīng)和氧化應(yīng)激,加快PIH 進(jìn)展[4]。 一些理論認(rèn)為內(nèi)皮功能障礙是PIH 的誘因,因?yàn)閮?nèi)皮功能受損會(huì)破壞胎盤(pán)的生理過(guò)程,導(dǎo)致抗血管生成因子釋放進(jìn)入母體循環(huán),從而導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞損傷[5-6]。 相關(guān)文獻(xiàn)顯示,酪氨酸蛋白激酶2(janus activated kinase 2,JAK2)/信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)子和轉(zhuǎn)錄激活子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)信號(hào)通路在細(xì)胞生長(zhǎng)分化和免疫方面起重要作用,細(xì)胞因子信號(hào)轉(zhuǎn)錄抑制因子1(suppressor of cytokine signaling-1,SOSC1)是一種細(xì)胞因子生物活性的內(nèi)源性抑制劑,其通過(guò)JAK/STAT 信號(hào)通路傳導(dǎo)[7]。 已有研究表明,JAK2/STAT3/SOSC1 通路的抑制與PIH 血管內(nèi)皮細(xì)胞分泌功能有關(guān)[8]。 苦參堿是一種生物堿,主要提取自苦參等豆科植物中,藥理作用廣泛。 目前關(guān)于苦參堿在抗腫瘤方面的研究較多[9],近年來(lái)發(fā)現(xiàn)其在治療血管損傷方面也有一定的效果[10]。 然而,到目前為止并未有研究報(bào)道苦參堿對(duì)PIH 的影響。 硫酸鎂是臨床上常用的緩解PIH 的藥物,其能夠減輕患者的痙攣癥狀,調(diào)節(jié)器官的血液灌注情況,故常用作PIH 研究的陽(yáng)性藥物[11]。 因此,本研究將制備PIH 大鼠模型,以硫酸鎂為陽(yáng)性對(duì)照,探討苦參堿對(duì)PIH 大鼠內(nèi)皮損傷的影響以及可能的分子機(jī)制。

1 材料和方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

SPF 級(jí)SD 雄性大鼠30 只(7～8 周齡,280～320 g)和雌性大鼠60 只(7～8 周齡,220～270 g)均購(gòu)自上海市公共衛(wèi)生臨床中心[SCXK(滬)2020-0002]。所有SD 大鼠均飼養(yǎng)在新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院動(dòng)物房?jī)?nèi)[SYXK(新)2018-0003]。 本研究的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)均獲得本院動(dòng)物倫理委員會(huì)批準(zhǔn)(K2007-05),且所有實(shí)驗(yàn)步驟均嚴(yán)格按照國(guó)際疼痛研究協(xié)會(huì)的動(dòng)物保護(hù)原則進(jìn)行,并按實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用的3R 原則給予人道的關(guān)懷。

1.2 主要試劑與儀器

亞硝基左旋精氨酸甲酯(L-NAME)購(gòu)自美國(guó)Sigma 公司(批號(hào):N5751);硫酸鎂購(gòu)自河北武羅藥業(yè)有限公司(批號(hào):國(guó)藥準(zhǔn)字H13022977);苦參堿,純度≥98%,購(gòu)自成都瑞芬思生物科技有限公司(批號(hào):K-002);內(nèi)皮素(ET)ELISA 檢測(cè)試劑盒購(gòu)自北京百奧萊博科技有限公司(批號(hào):ARB13558);超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)ELISA 試劑盒購(gòu)自上海研謹(jǐn)生物科技有限公司(批號(hào):YOYO、F12630);血栓素B2(TXB2)、6 酮前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)、一氧化氮(NO)ELISA 檢測(cè)試劑盒購(gòu)自上海喬羽生物科技有限公司(批號(hào):QY-SE2052、QY-SX1804、QY-WN1888);腫瘤壞死因子α(TNFα)、白細(xì)胞介素(IL)-6、IL-10 ELISA 檢測(cè)試劑盒購(gòu)自美國(guó)Abcam 公司(批號(hào):ab236712、ab234570、ab214566);JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3、SOCS1

抗體購(gòu)自美國(guó)CST 公司(批號(hào):74987、66245、9139、4113、68631)。 大鼠無(wú)創(chuàng)血壓計(jì)購(gòu)自上海玉研科學(xué)儀器有限公司(型號(hào):STARR MouseOx Small Animal Vit);多功能酶標(biāo)儀購(gòu)自華泰和合(北京)商貿(mào)有限公司(型號(hào):4200 酶標(biāo)儀);分光光度計(jì)購(gòu)自上海光學(xué)儀器一廠(型號(hào):722)。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 PIH 大鼠模型的構(gòu)建與給藥方法

SD 大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)1 周后,將雌雄大鼠按照1 ∶2 的比例關(guān)在同一個(gè)籠子里進(jìn)行交配。 次日,收集雌性大鼠的陰道分泌物,若在顯微鏡下觀察到精子的存在,則視為大鼠的懷孕日。 將60 只孕鼠隨機(jī)分成5 組,即正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、低劑量苦參堿組、高劑量苦參堿組、硫酸鎂組,每組12 只孕鼠。正常對(duì)照組除外,其余各組孕鼠在妊娠第12 天,通過(guò)連續(xù)1 周灌胃50 mg/kg L-NAME 構(gòu)建PIH 大鼠模型[12],若孕鼠16 d 的血壓比造模前的血壓增加量≥20 mmHg,尿蛋白≥(+)時(shí),則表示造模成功[13]。 在妊娠第16 天,低、高劑量苦參堿組分別灌胃50、100 mg/kg 苦參堿(依據(jù)朱新業(yè)等[14]的研究和前期預(yù)實(shí)驗(yàn)確定),硫酸鎂組灌胃100 mg/kg 硫酸鎂[15],正常對(duì)照組和模型對(duì)照組則灌胃等體積的生理鹽水,每天1 次,連續(xù)6 d[16]。

1.3.2 各組孕鼠血壓和24 h 尿蛋白含量的檢測(cè)

從妊娠第12 天開(kāi)始,每天檢測(cè)使用大鼠無(wú)創(chuàng)血壓計(jì)檢測(cè)各組孕鼠的尾動(dòng)脈血壓并收集其24 h 內(nèi)的尿液,采用考馬斯亮藍(lán)法檢測(cè)其尿蛋白含量。 分別記錄妊娠第12 天(造模前)、第16 天(給藥前)、第17、21 天的血壓和上述時(shí)間的24 h 尿蛋白含量。

1.3.3 ELISA 檢測(cè)各組孕鼠血清中相關(guān)因子的水平將各組妊娠至21 d 的孕鼠麻醉后,經(jīng)尾靜脈取血,將其收集在抗凝管中,離心后取上清液,使用ELISA 試劑盒檢測(cè)SOD、MDA、TNF-α、IL-6、IL-10、ET、TXB2、NO、6-keto-PGF1α 水平。

1.3.4 蛋白免疫印跡法檢測(cè)胎盤(pán)組織內(nèi)JAK2/STAT3/SOSC1 信號(hào)通路相關(guān)蛋白表達(dá)

各組孕鼠給藥結(jié)束后,立即使用40 mg/kg 體積分?jǐn)?shù)為1%戊巴比妥鈉進(jìn)行麻醉,并進(jìn)行剖宮產(chǎn),取出胎盤(pán)組織。 從胎盤(pán)組織中提取總蛋白,使用BCA 試劑盒檢測(cè)其濃度,然后將等量的樣品與加樣緩沖液均勻混合,進(jìn)行聚丙烯酰胺凝膠電泳,結(jié)束后轉(zhuǎn)膜,1 h 后用牛血清白蛋白封膜;加入一抗JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3、SOCS1 或β-actin,均稀釋1000 倍,次日,加入二抗,接著孵育1 h,再添加ECL 發(fā)光試劑,使用Image 軟件對(duì)顯影的條帶灰度值進(jìn)行分析。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 苦參堿對(duì)各組孕鼠不同時(shí)期血壓的影響

2.4 苦參堿對(duì)各組孕鼠炎癥反應(yīng)的影響

與正常對(duì)照組比較,模型對(duì)照組大鼠妊娠第16、17、21 天的血壓明顯升高(P<0.05);與模型對(duì)照組比較,低、高劑量苦參堿組大鼠妊娠第17、21 天的血壓依次降低(P<0.05),而高劑量苦參堿組大鼠妊娠第17、21 天的血壓與硫酸鎂組沒(méi)有明顯差異(P>0.05);在妊娠第16 天時(shí)(給藥前),各組大鼠血壓變化差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),見(jiàn)表1。

表1 苦參堿對(duì)各組孕鼠不同時(shí)期血壓的影響(±s,n=12,mmHg)Table 1 Effect of matrine on blood pressure of pregnant rats in different periods

表1 苦參堿對(duì)各組孕鼠不同時(shí)期血壓的影響(±s,n=12,mmHg)Table 1 Effect of matrine on blood pressure of pregnant rats in different periods

注:與正常對(duì)照組比較,aP<0.05;與模型對(duì)照組比較,bP<0.05;與低劑量苦參堿組比較,cP<0.05。 下表同。Note. Compared with normal control group,aP<0.05. Compared with model control group,bP<0.05. Compared with low dose matrine group,cP<0.05.The same in the following tables.

組別Groups 第12 天 D12 第16 天 D16 第17 天 D17 第21 天 D21正常對(duì)照組Normal control group 108.12±7.15 109.59±7.08 110.48±7.21 110.91±6.53模型對(duì)照組Model control group 109.42±8.51 136.94±6.89a 138.63±6.94a 152.34±7.75a低劑量苦參堿組Low dose matrine group 109.78±7.92 135.53±6.92a 124.61±7.12ab 121.46±7.42ab高劑量苦參堿組High dose matrine group 110.26±8.16 135.48±6.94a 112.74±7.34bc 106.57±7.48bc硫酸鎂組Magnesium sulfate group 111.32±8.23 135.59±7.03a 112.52±7.65bc 104.61±7.23bc

2.2 苦參堿對(duì)各組孕鼠不同時(shí)期24 h 尿蛋白含量的影響

模型對(duì)照組與正常對(duì)照組相比,TNF-α、IL-6 水平提高,IL-10 水平降低(P<0.05)低、高劑量苦參堿組和硫酸鎂組與模型對(duì)照組相比,TNF-α、IL-6 水平下降,IL-10 水平上升(P<0.05),不同劑量苦參堿組的指標(biāo)差異顯著(P<0.05),而高劑量苦參堿組與硫酸鎂組中的TNF-α、IL-6、IL-10 含量無(wú)顯著變化(P>0.05),見(jiàn)表4。

表4 苦參堿對(duì)各組孕鼠炎癥反應(yīng)的影響(±s,n=12)Table 4 Effects of matrine on inflammatory response of pregnant rats in each group

表4 苦參堿對(duì)各組孕鼠炎癥反應(yīng)的影響(±s,n=12)Table 4 Effects of matrine on inflammatory response of pregnant rats in each group

組別Groups TNF-α(pg/mL)IL-6(pg/mL)IL-10(pg/mL)正常對(duì)照組Normal control group 136.48±32.13 133.75±3.68 281.57±41.35模型對(duì)照組Model control group 265.69±28.42a 239.42±18.49a 154.63±31.46a低劑量苦參堿組Low dose matrine group 183.74±21.36ab 193.54±26.13ab 223.17±39.24ab高劑量苦參堿組High dose matrine group 138.25±24.45bc 137.57±17.51bc 276.62±40.15bc硫酸鎂組Magnesium sulfate group 137.64±23.28bc 135.82±15.24bc 278.98±41.23bc

2.5 苦參堿對(duì)各組孕鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞中活性物質(zhì)的影響

各組大鼠妊娠第12 天時(shí)(造模前)的24 h 尿蛋白含量差異不明顯,不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);模型對(duì)照組大鼠妊娠第16、17、21 天的24 h 尿蛋白含量顯著高于正常對(duì)照組(P<0.05);低、高劑量苦參堿組、硫酸鎂組大鼠妊娠第17、21 天的24 h 尿蛋白含量顯著低于模型對(duì)照組(P<0.05),且隨著苦參堿劑量的增加,大鼠24 h 尿蛋白含量依次降低(P<0.05),見(jiàn)表2。

表2 苦參堿對(duì)各組孕鼠不同時(shí)期24 h 尿蛋白含量的影響(±s,n=12,mg)Table 2 Effects of matrine on 24 h urinary protein content in pregnant rats at different periods

表2 苦參堿對(duì)各組孕鼠不同時(shí)期24 h 尿蛋白含量的影響(±s,n=12,mg)Table 2 Effects of matrine on 24 h urinary protein content in pregnant rats at different periods

組別Groups 第12 天 D12 第16 天 D16 第17 天 D17 第21 天 D21正常對(duì)照組Normal control group 6.26±0.65 6.19±0.65 6.22±0.69 6.34±0.58模型對(duì)照組Model control group 6.42±0.59 8.87±0.46a 9.01±0.58a 8.47±1.56a低劑量苦參堿組Low dose matrine group 6.54±0.71 8.83±0.45a 7.86±0.64ab 7.36±0.63b高劑量苦參堿組High dose matrine group 6.52±0.69 8.79±0.51a 6.54±0.67bc 6.42±0.54bc硫酸鎂組Magnesium sulfate group 6.36±0.68 8.77±0.49a 6.48±0.62bc 6.19±0.51bc

2.3 苦參堿對(duì)各組孕鼠氧化應(yīng)激的影響

模型對(duì)照組與正常對(duì)照組比較,SOD 含量顯著下降,MDA 含量顯著升高(P<0.05);與模型對(duì)照組比較,低、高劑量苦參堿組大鼠SOD 含量依次升高,MDA 含量依次降低(P<0.05),而SOD 與MDA 在高劑量苦參堿組與硫酸鎂組中的含量差異不明顯(P>0.05),見(jiàn)表3。

表3 苦參堿對(duì)各組孕鼠氧化應(yīng)激的影響(±s,n=12)Table 3 Effects of matrine on oxidative stress of pregnant rats in each group

表3 苦參堿對(duì)各組孕鼠氧化應(yīng)激的影響(±s,n=12)Table 3 Effects of matrine on oxidative stress of pregnant rats in each group

組別Groups SOD(U/mL)MDA(mmol/mL)正常對(duì)照組Normal control group 113.25±12.21 1.81±0.29模型對(duì)照組Model control group 79.13±8.84a 4.15±0.51a低劑量苦參堿組Low dose matrine group 95.46±10.03ab 2.96±0.46ab高劑量苦參堿組High dose matrine group 108.34±11.56bc 1.84±0.24bc硫酸鎂組Magnesium sulfate group 109.21±11.67bc 1.82±0.26bc

與正常對(duì)照組相比,模型對(duì)照組孕鼠血清ET和TXB2 增加、NO 和6-keto-PGF1α 減少,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);與模型對(duì)照組相比,低、高劑量苦參堿組孕鼠血清ET 和TXB2 呈劑量依賴(lài)性降低、NO 和6-keto-PGF1α 呈劑量依賴(lài)性升高(P<0.05),而高劑量苦參堿組與硫酸鎂組中的上述指標(biāo)差異不大(P>0.05),見(jiàn)表5。

表5 苦參堿對(duì)各組孕鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞中活性物質(zhì)的影響(±s,n=12)Table 5 Effects of matrine on active substances in vascular endothelial cells of pregnant rats in each group

表5 苦參堿對(duì)各組孕鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞中活性物質(zhì)的影響(±s,n=12)Table 5 Effects of matrine on active substances in vascular endothelial cells of pregnant rats in each group

組別Groups ET(pg/mL) NO(pg/mL) TXB2(pg/mL) 6-keto-PGF1α(pg/mL)正常對(duì)照組Normal control group 2.65±0.41 28.34±3.53 405.61±33.48 584.74±45.12模型對(duì)照組Model control group 6.97±0.95a 14.65±2.89a 649.74±51.65a 371.35±39.48a低劑量苦參堿組Low dose matrine group 3.89±0.64ab 21.36±3.04ab 523.57±48.62ab 456.34±41.57ab高劑量苦參堿組High dose matrine group 2.73±0.52bc 27.95±3.12bc 436.41±43.15bc 569.45±43.96bc硫酸鎂組Magnesium sulfate group 2.71±0.49bc 28.11±3.23bc 435.24±41.34bc 574.63±45.78bc

2.6 苦參堿對(duì)各組孕鼠胎盤(pán)組織中JAK2/STAT3/SOSC1 信號(hào)通路蛋白表達(dá)的影響

模型對(duì)照組p-JAK2/JAK2 與p-STAT3/STAT3值及SOSC1 蛋白水平明顯高于正常對(duì)照組(P<0.05);與模型對(duì)照組相比,低、高劑量苦參堿組p-JAK2/JAK2 與p-STAT3/STAT3 值及SOSC1 蛋白水平依次下降,表現(xiàn)為劑量依賴(lài)性(P<0.05),而高劑量苦參堿組與硫酸鎂組中蛋白表達(dá)水平均無(wú)顯著差異(P>0.05),見(jiàn)圖1 和表6。

表6 苦參堿對(duì)各組孕鼠胎盤(pán)組織中JAK2/STAT3/SOSC1信號(hào)通路蛋白表達(dá)的影響(±s,n=12)Table 6 Effects of matrine on protein expression of JAK2/STAT3/SOSC1 signaling pathway in placental tissues of pregnant rats in each group

表6 苦參堿對(duì)各組孕鼠胎盤(pán)組織中JAK2/STAT3/SOSC1信號(hào)通路蛋白表達(dá)的影響(±s,n=12)Table 6 Effects of matrine on protein expression of JAK2/STAT3/SOSC1 signaling pathway in placental tissues of pregnant rats in each group

組別Groups p-JAK2/JAK2 p-STAT3/STAT3 SOSC1/β-actin正常對(duì)照組Normal control group 0.24±0.09 0.33±0.08 0.27±0.09模型對(duì)照組Model control group 0.63±0.15a 0.67±0.18a 0.60±0.12a低劑量苦參堿組Low dose matrine group 0.45±0.08ab 0.48±0.09ab 0.43±0.08ab高劑量苦參堿組High dose matrine group 0.32±0.06bc 0.35±0.06bc 0.31±0.06bc硫酸鎂組Magnesium sulfate group 0.31±0.05bc 0.33±0.04bc 0.29±0.05bc

圖1 各組孕鼠胎盤(pán)組織中JAK2/STAT3/SOSC1信號(hào)通路蛋白免疫印跡圖Note. A, Normal control group. B, Model control group. C, Low dose matrine group. D, High dose matrine group. E, Magnesium sulfate group.Figure 1 Western blot of JAK2/STAT3/SOSC1 signaling pathway in placental tissues of pregnant rats in each group

3 討論

PIH 的主要并發(fā)癥是血管內(nèi)皮損傷和功能障礙,對(duì)產(chǎn)婦和圍產(chǎn)兒都有非常嚴(yán)重的影響[17]。 其臨床表現(xiàn)主要是妊娠后期孕婦血壓的持續(xù)升高和尿蛋白含量的增多。 硫酸鎂是目前臨床上用來(lái)緩解PIH 疾病的一種藥物,既能有效的降低孕婦的血壓,又不會(huì)對(duì)胎兒的血壓和健康產(chǎn)生影響,故硫酸鎂經(jīng)常被用作PIH 大鼠實(shí)驗(yàn)的陽(yáng)性對(duì)照[18]。 本研究發(fā)現(xiàn),通過(guò)灌胃L-NAME 制備的PIH 模型大鼠妊娠第17、21 天的血壓及24 h 尿蛋白含量均明顯升高(P<0.05),這與通過(guò)皮下注射L-NAME 構(gòu)建的PIH 模型大鼠的結(jié)果類(lèi)似[19],提示PIH 大鼠造模成功,可進(jìn)行深入研究。

苦參堿是四環(huán)素-喹諾列齊啶類(lèi)生物堿,是提取自苦參的活性物質(zhì),有清熱、利尿、抗病毒、抗腫瘤等作用[20]。 國(guó)內(nèi)外研究顯示,苦參堿不僅可以減輕缺血再灌注大鼠心肌損傷,還對(duì)缺氧/復(fù)氧誘導(dǎo)的大鼠心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡有保護(hù)作用[21-22]。苦參堿可通過(guò)降低MDA 含量及TNF-α 等促炎因子水平、提高SOD 含量發(fā)揮其抗氧化和抗炎作用[23-24]。 ET、TXB2、NO 和6-keto-PGF1α 由血管內(nèi)皮細(xì)胞分泌而來(lái),是血管活性標(biāo)志物,與血管平滑肌細(xì)胞增殖的調(diào)節(jié)和血管張力有關(guān)。 ET 是調(diào)節(jié)血壓的一種收縮因子,其過(guò)量表達(dá)使得內(nèi)皮通透性增加,致使胎盤(pán)受損[25]。 NO 參與調(diào)節(jié)妊娠期血管舒張和反應(yīng)性,其含量的下降可引發(fā)高血壓。 TXB2和6-keto-PGF1α 分別為 TXA2 和前列腺素2(PG12)的代謝穩(wěn)定形式,正常情況下,二者是一種相互拮抗、相互作用的動(dòng)態(tài)平衡關(guān)系,是保持機(jī)體血壓正常的基礎(chǔ),但在原發(fā)性高血壓患者中TXB2顯著上調(diào),6-keto-PGF1α 顯著下調(diào),二者的平衡關(guān)系被打破[26]。 本研究發(fā)現(xiàn)低、高劑量苦參堿及硫酸鎂干預(yù)均可顯著降低PIH 大鼠的血壓和24 h 尿蛋白含量、減緩血管受損(ET、TXB2 含量降低,NO、6-keto-PGF1α 含量升高),提示苦參堿可以明顯改善PIH 大鼠血壓、尿蛋白,降低血管受損程度。

據(jù)報(bào)道PIH 與氧化應(yīng)激,血管內(nèi)皮損傷、胎盤(pán)營(yíng)養(yǎng)不良等因素有關(guān)[27]。 孕婦早期身體上出現(xiàn)的炎癥對(duì)孕婦不會(huì)造成影響,只是一種生理應(yīng)激反應(yīng)。 子癇是PIH 疾病的一種,在其孕婦胎盤(pán)或血清中的炎癥因子水平比正常孕婦高出許多[28]。 在PIH 大鼠中,MDA 水平上升,SOD 活性下降,進(jìn)而使大鼠體內(nèi)的氧化應(yīng)激損傷加重[13,29]。 機(jī)體過(guò)度的氧化應(yīng)激誘發(fā)炎癥因子的表達(dá),TNF-α、IL-6 是促進(jìn)炎癥的細(xì)胞因子,IL-10 是抵抗炎癥的細(xì)胞因子。 魏雙燕等[30]發(fā)現(xiàn)在PIH 大鼠血清中TNF-α、IL-6 顯著上調(diào),IL-10 顯著下調(diào)。 JAK2/STAT3/SOSC1 信號(hào)通路與炎癥的發(fā)生有關(guān)[31]。 而近年的研究發(fā)現(xiàn),JAK2/STAT3 通路在PIH 模型大鼠體內(nèi)被激活,JAK2、STAT3 磷酸化水平的增高誘導(dǎo)SOSC1 蛋白表達(dá),當(dāng)使用JAK2 抑制劑A490 處理后,上述蛋白表達(dá)水平均被減弱,PIH 癥狀也得到緩解[8]。 本研究發(fā)現(xiàn)PIH 大鼠組織中JAK2、STAT3 磷酸化及SOSC1蛋白表達(dá)水平、血清炎癥反應(yīng)(TNF-α、IL-6 水平升高,IL-10 水平降低)及氧化應(yīng)激水平(MDA 含量升高,SOD 含量降低)明顯升高,提示PIH 的發(fā)生機(jī)制可能與炎癥反應(yīng)、氧化應(yīng)激受損有關(guān)。 而低、高劑量苦參堿及硫酸鎂干預(yù)均可降低炎癥反應(yīng),提高抗氧化應(yīng)激水平,抑制JAK2、STAT3 磷酸化及SOSC1蛋白表達(dá)水平,表明苦參堿可以減輕PIH 大鼠炎癥反應(yīng),抑制JAK2、STAT3 磷酸化及SOSC1 的活化,提高抗氧化能力進(jìn)而減緩內(nèi)皮損傷。

綜上所述,苦參堿可降低PIH 模型大鼠的血壓及尿蛋白含量,抑制JAK2、STAT3 磷酸化及SOSC1的表達(dá),改善其氧化應(yīng)激及炎癥反應(yīng)導(dǎo)致的內(nèi)皮損傷,為苦參堿在臨床上治療PIH 提供理論依據(jù),但由于PIH 發(fā)病機(jī)制復(fù)雜,后續(xù)還需深入研究。