干化學(xué)法對尿液檢測效果及影響因素評價

王燕紅

(單縣中心醫(yī)院 山東 菏澤 274300)

尿液檢測是臨床檢查項(xiàng)目中較為常用的一種，主要作用是泌尿系統(tǒng)疾病診斷、治療和檢測，同時也可用于其他系統(tǒng)疾病的診治，通過尿液檢測疾病是因?yàn)闄C(jī)體發(fā)生病變會造成尿液成分改變，故采取尿檢可進(jìn)行身體健康狀況判斷。針對尿液檢測的方法有很多，本文推薦行尿干化學(xué)法，此方法操作簡單，檢測速度快，檢測參數(shù)多，不僅能提高檢測工作效率，還能極大的減輕檢驗(yàn)人員的工作壓力。尿干化學(xué)法的檢測原理是采用光吸收和反射，但是此檢測方法本身具有局限性，實(shí)驗(yàn)操作要求嚴(yán)格，受其他因素影響造成其結(jié)果的可靠性不理想[1]。鑒于此，下文將選取2019年5月～2021年10月行尿液檢測的查體者展開調(diào)查，分析尿干化學(xué)發(fā)的檢測價值以及其結(jié)果的影響因素。

1 資料與方法

1.1一般資料

病例研究對象為來我院接受尿液檢測的查體者，統(tǒng)計(jì)出1000例，尿液標(biāo)本收集時間為2019年5月～2021年10月，尿液標(biāo)本中男性572例，女性428例，年齡20～78歲，平均(49.26±4.11)歲,體質(zhì)量指數(shù)17～28kg/m2,平均(22.79±1.36)kg/m2。

納入標(biāo)準(zhǔn)：均采集晨起空腹中段尿；尿液標(biāo)本在2h內(nèi)完成送檢；符合尿干化學(xué)法檢測標(biāo)準(zhǔn)：年齡>18歲；受檢者已簽署知情同意書；研究已獲得醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：尿液污染；合并惡性腫瘤、重要臟器功能不全者、精神障礙史；凝血功能障礙；認(rèn)知、交流障礙。

檢測方法：要求所有受檢者均在空腹?fàn)顟B(tài)下于晨起取中段尿10ml，使用一次性帶蓋的尿杯收集，將尿液充分混勻后分別接受尿干化學(xué)法和手工法檢測。

尿干化學(xué)法：混勻的尿液進(jìn)行尿11項(xiàng)檢測，檢測儀器為迪瑞800尿液分析儀，試紙條選擇與儀器胚胎的尿十一聯(lián)試紙，操作前對儀器進(jìn)行校準(zhǔn)調(diào)試，嚴(yán)格按照說明書操作。

手工法檢測：將混勻的尿液使用低速離心機(jī)進(jìn)行處理，以3000r/min速度離心，離心5min后留取尿液沉渣0.2ml，將其制成涂片滴于載玻片(18mm*18mm)上，放置在顯微鏡(日本生產(chǎn)的OLMPUS)下觀察，顯微鏡觀察先用低倍鏡，然后換上高倍顯微鏡觀察，記錄視野中白細(xì)胞的數(shù)量變化，并計(jì)算白細(xì)胞的平均值。

1.3觀察指標(biāo)

判定標(biāo)準(zhǔn)：主要尿液檢測內(nèi)容包括尿蛋白(PRO)、尿糖(GLU)、酮體(KET)、尿膽原(URO)、隱血(BLD)、白細(xì)胞(WBC)和亞硝酸鹽(NIT)等，檢測分析各自的陽性檢測結(jié)果，

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，計(jì)數(shù)資料以百分?jǐn)?shù)（%）表示，采用x2檢驗(yàn)；計(jì)量資料以“±s”表示，采用t檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 尿干化學(xué)法和手工法的檢測結(jié)果對比

兩種不同檢測方法對比，尿蛋白陽性、隱血陽性、白細(xì)胞陽性的差異對比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，其他檢測項(xiàng)目的檢測結(jié)果對比無統(tǒng)計(jì)意義(P>0.05)，詳細(xì)數(shù)據(jù)見表1。

表1 尿干化學(xué)法和手工法的檢測結(jié)果對比(n,%)

2.2 影響因素分析

2.2.1尿液采集器皿。尿液采集對標(biāo)本的清潔度要求非常高，切勿使用被污染的尿液，容易影響尿液成分。因?yàn)槟蚋苫瘜W(xué)法測定尿糖主要依據(jù)葡萄糖氧化酶反應(yīng)原理，如果采集尿液的器皿存在污染或留有氧化性的消毒劑時，會導(dǎo)致其尿糖檢測結(jié)果出現(xiàn)假陽性，影響臨床判斷[2]。

2.2.2尿液酸堿度。健康人體的尿液pH值為4.6～8.0范圍，當(dāng)pH值<4.0時可能存在蛋白質(zhì)或酮體出現(xiàn)假陽性，且密度較高，若尿液pH值>8.0時其蛋白質(zhì)可出現(xiàn)假陽性，葡萄糖和密度結(jié)果偏低。另外采集的尿液標(biāo)本在室溫環(huán)境下存放時間過長，容易被細(xì)菌分解發(fā)現(xiàn)強(qiáng)堿性，尿液的酸堿度一般采用雙指示劑法，具體用溴麝香草酚藍(lán)和甲基紅測定，變色范圍是5.0～9.0，注意檢測前必須保證標(biāo)本新鮮、無污染，在采集完成后30min內(nèi)盡快完成檢測，避免標(biāo)本被污染[3]。

2.2.3試紙?jiān)谀蛞褐械慕輹r間。干化學(xué)法測定時需要使用相應(yīng)試紙條將其浸潤在尿液中，但其浸潤時間有規(guī)定，時間不宜過長或過短，不然其檢測結(jié)果會存在假陽性或假陰性。正常規(guī)定下，要求試紙條在正常室溫下浸入尿液的最佳時間為2秒，若在高溫狀態(tài)下檢測尿糖時，浸入時間適當(dāng)縮短，但室溫不可超過33度，否則也會造成檢測結(jié)果假陽性。

2.2.4標(biāo)本放置時間。一般情況下，采集尿液標(biāo)本應(yīng)保證在2h內(nèi)完成送檢，其標(biāo)本放置時間不能過長，同時還要注意存放溫度，若處于夏季高溫，其標(biāo)本會發(fā)生變質(zhì)，尿液中的有形成分容易被破壞，所以夏季標(biāo)本采集后放置時間需<45min，而在冬季放置時間<2h，放置時間越短標(biāo)本新鮮度越高，檢驗(yàn)結(jié)果的誤差更小，另外送至化驗(yàn)室后，要保證實(shí)驗(yàn)室的溫度在20～25度，若需要尿液冷藏，應(yīng)將尿液恢復(fù)至室溫后再進(jìn)行檢測[4]。

2.2.5試紙條檢測時的注意事項(xiàng)。尿干化學(xué)法檢測時，使用試紙條時應(yīng)先審核瓶外部的標(biāo)簽是否一致，檢查試紙條反應(yīng)區(qū)域的顏色是否改變、有無受潮，若被污染，其結(jié)果不可靠，故試紙條檢測時需要仔細(xì)檢查，取出試紙條后需要立刻擰緊瓶蓋并存放于陰涼處[5]。

2.2.6 藥物因素干擾。在尿液檢測前若服用抗生素也會導(dǎo)致其結(jié)果存在假陽性，特別是四環(huán)素，本藥品結(jié)構(gòu)中含有類似蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)的肽鍵，此結(jié)構(gòu)會導(dǎo)致結(jié)果偏低，并且對蛋白質(zhì)的檢測結(jié)果也有干擾，造成結(jié)果出現(xiàn)假陽性。

2.2.7尿液蛋白質(zhì)測定。尿干化學(xué)法測定蛋白質(zhì)原理是指示劑離子和尿液中蛋白質(zhì)結(jié)合后的顏色變化情況，尿液中蛋白質(zhì)含量與顏色變化成正比，其操作簡單快速，靈敏度高[6]。影響蛋白質(zhì)結(jié)果的因素有很多，具體分析有四點(diǎn)：①尿液檢測前若服用奎寧、嘧啶類藥物或尿中磷酸鹽、聚乙烯、氯已定或季銨鹽消毒劑會導(dǎo)致尿液呈堿性，其結(jié)果出現(xiàn)假陽性；②使用大劑量慶大霉素、青霉素、磺胺、含碘造影劑時，經(jīng)干化學(xué)法檢測結(jié)果存在假陰性，建議再次使用磺基水楊酸法復(fù)檢。③干化學(xué)法在清蛋白和球蛋白檢測中，前者的檢測敏感度較高，而后者僅為前者的百分之一，故檢驗(yàn)結(jié)果與臨床不相符時刻考慮用磺基水楊酸法復(fù)檢。④人體蛋白尿在經(jīng)過發(fā)熱、受冷刺激、精神緊張、異常興奮、進(jìn)餐過多、白帶、經(jīng)血、老年高血壓、妊娠、精液或前列腺等疾病影響會造成蛋白尿細(xì)胞成分增多，導(dǎo)致其結(jié)果不可靠[7]。

2.2.8尿糖檢測。尿液中尿糖的鑒定用氧化酶法，其中果糖、乳糖、半乳糖或麥芽糖不能測定可考慮班氏法。尿糖假陽性情況出現(xiàn)的原因與尿液標(biāo)本容器污染和其他腦血管疾病(情緒異常波動、腦血管意外、顱腦損傷等)相關(guān)；尿糖假陰性情況出現(xiàn)的原因與以下幾項(xiàng)有關(guān)：①尿液酮體濃度增高；②尿液中含有多巴胺、水楊酸鹽、氯化鈉等；③標(biāo)本放置時間過長后尿液中的葡萄糖被細(xì)菌分解所致[8]。

2.2.9測定尿膽紅素、尿膽原和尿酮體。尿液檢測不僅要保證標(biāo)本的清潔度和新鮮度，還要保證標(biāo)本不受強(qiáng)光照射，一般在采集完成后2h內(nèi)完成檢測，若時間延長會造成尿液中膽紅素轉(zhuǎn)變?yōu)榈G色，尿膽原被氧化后變成尿膽素，因素掌握檢測時間和檢測環(huán)境；尿液酮體檢測主要對乙酸、乙酰、病痛和羥丁酸成分測定，其中前三者的敏感性較強(qiáng)，抑酸和乙酰容易受溫度影響而分解，丙酮則在細(xì)菌環(huán)境下被分解消失，故為了保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，必須確保尿液新鮮和快速送檢[9]。

2.2.10測定白細(xì)胞。尿液白細(xì)胞的檢查原理是通過檢測白細(xì)胞漿內(nèi)粒細(xì)胞酯酶的存在，此酶在試紙上會發(fā)生改變，通過測定中性粒細(xì)胞。白細(xì)胞檢測的目的主要對腎臟和泌尿系統(tǒng)疾病進(jìn)行診治，測定方法是中性粒細(xì)胞酯酶法，若病人有腎結(jié)核、腎臟疾病引起的淋巴細(xì)胞尿，尿液試紙條結(jié)果呈陰性，手工鏡檢為陽性；另外尿液中含有維生素C、慶大霉素等藥物時也會導(dǎo)致結(jié)果假陰性。如果尿液在膀胱內(nèi)存儲時間過長且出現(xiàn)憋尿意愿或尿液采集后存放時間過長，會導(dǎo)致白細(xì)胞被破壞，其結(jié)果不準(zhǔn)確；干化學(xué)法試紙條測定時在空氣中放置3h的結(jié)果無影響，但是試紙條被蒸餾水濕潤后放置在空氣中3min其結(jié)果存在假陽性，所以處理辦法是將試紙條嚴(yán)格按照要求保存，使用完畢后立即存放在瓶中封閉保存，不得在空氣中長時間暴露[10-11]。

2.2.11亞硝酸鹽測定。亞硝酸鹽的作用是判斷尿液是否為菌尿，為了避免尿液被細(xì)菌等微生物污染，必須要保持尿液新鮮、干凈，尿液標(biāo)本器皿清潔、無污染，采集標(biāo)本后立即送檢，以免造成亞硝酸鹽成分增加出現(xiàn)假陽性[12]。若此前查體者服用過利尿劑，其尿液中亞硝酸鹽成分會降低表現(xiàn)為假陰性，若服用抗生素，尿液中細(xì)菌被抑制，結(jié)果也存在假陰性。

3 討論

尿干化學(xué)法測定尿液成分的原理是利用試紙條進(jìn)行呈色反應(yīng)，尿液標(biāo)本若存在干擾因素會導(dǎo)致結(jié)果出現(xiàn)假陰性或假陽性。本研究采用尿干化學(xué)法和手工法測定，結(jié)果顯示，兩種檢測方法測定后的陽性率相比，尿蛋白、隱血和白細(xì)胞項(xiàng)目的結(jié)果差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，其他GLU、KET、URO和NIT的結(jié)果差異無意義P>0.05，其差異不顯著的原因可能與兩種方法的測定原理相似有關(guān)，而結(jié)果有顯著差異的原因是測定方法不同。故尿液檢測時要一定要三查三對，排除影響因素，保證尿液新鮮、尿器皿清潔，合理控制標(biāo)本存放時間、溫度，嚴(yán)格遵守操作規(guī)則。

綜合上述，尿液檢測行尿干化學(xué)法測定必須要明確其影響因素，認(rèn)真操作，謹(jǐn)慎檢測，為病人提供準(zhǔn)確的檢測報(bào)告盡早參與治療。