飼料中添加抗菌肽對肉牛免疫機能的影響

摘要：本試驗以肉牛犢牛為研究對象，探究其基礎飼料中添加不同水平的抗菌肽對其機體免疫功能的影響。試驗選擇40頭健康、無病、體重相近、體況良好的肉牛，按照單因子隨機試驗原則，將其均分為4個處理組，每組10頭肉牛。對照組肉牛飼喂基礎飼料，試驗1組肉牛飼喂含有lg/d的抗菌肽的基礎飼料，試驗2組肉牛飼喂含有2g/d的抗菌肽的基礎飼料，試驗3組肉牛飼喂含有4g/d的抗菌肽的基礎飼料。試驗周期分為預試驗7d和正式試驗期60d。試驗結束，采集肉牛的血液檢測血清中的免疫球蛋白和細胞因子的含量。結果顯示，試驗2組和試驗3組肉牛血清中的免疫球蛋白A含量顯著高于對照組（Plt;0.05），免疫球蛋白G含量顯著高于對照組和試驗1組（Plt;0.05）．白細胞介素一6含量顯著低于對照組（Plt;0.05），白細胞介素-10含量顯著高于對照組（Plt;0.05），腫瘤壞死因子-a含量顯著低于對照組（Plt;0.05）。研究表明，在肉牛生產中使用2和4g/d的抗菌肽顯著增強了肉牛機體的體液免疫和細胞免疫功能，綜合各項指標數據及養殖成本考慮，抗菌肽在肉牛養殖生產中的最適添加量為2g/d。

關鍵詞：抗菌肽：肉牛：免疫功能

隨著飼料端禁抗政策的實施，抗生素退出飼料添加劑的舞臺，大量替抗產品被廣泛研究。其中，抗菌肽也成為科研人員關注的熱點和重點方向。抗菌肽是一種疏水性小分子的多肽[1]，分子量約為4～10ku[2]。抗菌肽對細菌、真菌、病毒、寄生蟲均具有較好的抑制作用，抗菌譜較廣[3]。抗菌肽除了具有較好的抑菌作用外，還具有調節機體免疫力的作用[4]。目前，抗菌肽在畜禽、水生生物養殖生產中均具有很好的應用效果，可以替代抗生素的使用，可以提高動物的生長性能，增強機體免疫力，提高抗氧化能力等[6-7]?？咕脑趧游锷a中的應用研究主要集中在生豬、家禽、水產等方面[8-10]。對于抗菌肽在反芻動物養殖生產中的應用研究結果較少。因此，本研究以肉牛犢牛為受試對象，探究其基礎飼料中添加不同水平的抗菌肽，對其機體免疫球蛋白及細胞因子含量的影響，確定抗菌肽在肉牛養殖生產中的最適添加量，為抗菌肽在肉牛生產中的高效、合理應用提供理論數據參考。

1 試驗材料和試驗方法

1.1試驗抗菌肽

本研究使用的抗菌肽由四川某工程有限公司提供，其主要成分為豬防御素。

1.2 試驗設計

試驗選擇40頭健康、無病、體重相近、體況良好的肉牛，按照單因子隨機試驗原則，將其均分為4個處理組，每組10頭肉牛。對照組肉牛飼喂基礎飼料，試驗1組肉牛飼喂含有1g/d的抗菌肽的基礎飼料，試驗2組肉牛飼喂含有2g/d的抗菌肽的基礎飼料，試驗3組肉牛飼喂含有4g/d的抗菌肽的基礎飼料。試驗周期分為預試驗7d和正式試驗期60d。試驗結束，采集肉牛的血液檢測血清中的免疫球蛋白和細胞因子的含量。試驗設計如下表1所示。

1.3 試驗飼料

試驗肉牛的基礎飼料參考肉牛飼養標準配制，其原料組成和營養成分含量如下表2所示。

1.4 日常飼養管理

試驗開始前，對試驗肉牛統一驅蟲，免疫程序按照養殖場日常管理進行。試驗期間保證牛舍的環境衛生。試驗肉牛自由采食和飲水。

1.5 檢測項目

試驗結束當天，試驗牛晨飼前，采集各組肉牛的血液約10mL，經離心機離心后收集血清樣品，用于檢測各組肉牛血清中的免疫球蛋白和細胞因子含量，試驗方法按照試劑盒說明操作，試劑盒由南京建成生物工程研究所生產。

1.6 數據分析

試驗免疫指標數據由SPSS26統計分析，采用單因子方差方法分析顯著性，LSD方法組間多重分析，Plt;0. 05表示此組數據具有顯著性差異。

2 試驗結果

不同水平的抗菌肽對肉牛機體免疫功能的影響如下表3所示。由表3可見，在肉牛養殖生產中使用不同水平的抗菌肽對其機體免疫指標產生了顯著性影響。其中，試驗2組和試驗3組肉牛血清中的免疫球蛋白A含量顯著高于對照組（Plt;0.05），免疫球蛋白G含量顯著高于對照組和試驗1組（Plt;0.05），白細胞介素-6含量顯著低于對照組（Plt;0.05），白細胞介素-10含量顯著高于對照組（Plt;0.05），腫瘤壞死因子-a含量顯著低于對照組（Plt;0.05）。研究表明，在肉牛生產中使用2和4g/d的抗菌肽顯著增強了肉牛機體的體液免疫和細胞免疫功能。

3 討論與分析

機體內的免疫球蛋白和細胞因子在動物體液免疫和細胞免疫方面發揮著重要的作用。本研究中，使用2和4g/d的抗菌肽顯著提高了免疫球蛋白A和免疫球蛋白G含量，顯著降低了促炎因子白細胞介素-6和腫瘤壞死因子-a含量，顯著提高了抗炎因子白細胞介素-10含量，表明2g/d的抗菌肽就可以有效提高肉牛機體的免疫功能。楊顏銥等[11]在黑山羊生產中，在其基礎日糧中添加3g/d的抗菌肽可以顯著提高黑山羊血清中的免疫球蛋白（A、G、M）含量、細胞因子含量（IL-2、IL-6、l L-10、IL-12、IFN-Y、TNF-a）及補體C3和補體C4含量?？紫橛闧12]在麻羊養殖生產中，使用2g/d的抗菌肽可以顯著提高麻羊血清中免疫球蛋白A和免疫球蛋白M含量，對免疫球蛋白G和細胞因子含量具有改善作用，但未達到顯著水平。以上研究結果表明，適量的抗菌肽可以顯著提高反芻動物機體的免疫力，可能是因為抗菌肽具有較強的抗菌、抑菌功能，增強了機體對外界病原微生物的抵抗力，進而提高機體的免疫功能，促進機體健康。

4 結論

本研究結果表明，在肉牛生產中使用2和4g/d的抗菌肽顯著提高了免疫球蛋白A和免疫球蛋白G含量，顯著降低了促炎因子白細胞介素-6和腫瘤壞死因子-a含量，顯著提高了抗炎因子白細胞介素-10含量，增強了肉牛機體的體液免疫和細胞免疫功能；綜合各項指標數據及養殖成本考慮，抗菌肽在肉牛養殖生產中的最適添加量為2g/d。

參考文獻：

[1]Rajanbabu v，Chen J Y Antiviral function of tilapia hepcidin l-5 and itsmodulation of immune-related gene expressions against infectious pancre-atic necrosis virus（ IPNV） in Chinook salmon embryo （CHSE）-214 cells[J] Fishamp;Shellfish Immunology，2011. 30（1）： 39-44

[2]Lee K Song Y S，Kim K et al_ Antibiotic activity and structural analysis ofthe scorpion-derived antimicrobial peptide IsCT and its analogs [J]. Bio-chemical ＆ Biophysical Research Communications. 2004. 323 （2）：712-719

[3]Zasloff M. Antimicrobial peptides of multicellular organisrns[J]. Nature.2002. 415（6870）： 389-395

[4] WinteR J， Wenghoefe R M. HLunan defensins： potential tools for clinicalapplic ations[Jl. Polymers. 20 12. 4（1）：691-709

[5]李莉娜，譚露霖，代國滔，等抗菌肽在肉雞養殖中的研究應用進展[J]貴州畜牧獸醫，2022，46（2）：26-28

[6]孫田革，抗菌肽在水產養殖中的應用[J]新農業，2022（8）：58-59

[7]駱雪，俞偉輝，抗菌肽生物學功能及其在畜禽生產中的應用研究進展[J]飼料研究，2022，45（5）：143-145

[8]楊玉增，顏國華，胡曉悅，等抗菌肽的生理功能及其在養豬生產中的應用 研究進展[J]中國豬業，2022，17（1）：61-64

[9]王彥麗，抗菌肽在養雞生產中的應用[J]湖南飼料，2021（6）：45-48

[10]張莉，柳芹，張金林，飼料中添加抗菌肽對加州鱸魚的生長發育的影響分析[J]中國飼料，2021（20）：65-68

[11]楊顏銥，鄧俊良，陳蕓，等精料水平和復合抗菌肽對川中黑山羊生長性能及血清中免疫球蛋白、補體、細胞因子和激素水平的影響[J]浙江農業學報.2017.29（8）：1243-1252

[12]孔祥雨，復合抗菌肽對高精育肥成都麻羊部分血清免疫指標及抗氧化指標的影響[D]四川農業大學.2020