侯 庚
(遼寧省楊樹研究所,遼寧 蓋州 115213)
目前,土壤重金屬污染治理技術主要有物理治理技術、化學治理技術、生物治理技術(包括植物修復法、微生物修復法、農業生態修復法)等。植物修復法是一種新興的重金屬污染土壤修復技術,具有經濟和環境友好等特點[1]。
楊樹作為我國平原地區重要的造林樹種,分布范圍廣泛,具有易于繁殖、生長快、根系發達、生物量大等特點,為重金屬的富集及轉運提供了可能。楊樹品種豐富,尤其近年來,楊樹育種成果頗豐[2],選育出了大量具有抗寒、抗病蟲、耐鹽堿和耐重金屬脅迫的優良品種,為修復土壤重金屬污染提供了豐富的楊樹品種。楊樹作為綠化和用材樹種,其生物產品不會進入食物鏈,從而不會進入人體而造成人體重金屬中毒。關于楊樹在修復土壤重金屬污染的應用,許多學者做了相關研究,并取得了較好的修復效果[3-5]。上述優良特性為楊樹應用于修復土壤重金屬污染提供了可能。
在利用楊樹進行土壤重金屬修復時,需進行品種篩選。關于楊樹品種修復能力的比較,研究者們采用了水培培養、組織培養、土壤培養等方法做了大量實驗。吳鳳霞[6]采用水培的試驗方法研究了3個砷(As)脅迫水平下9個楊樹品種的光合參數以及不同楊樹材料吸收、富集砷的特征,篩選出砷耐型楊樹中林2025楊和砷敏感型楊樹1-45/51楊。胡亞瓊[7]采用離體培養的方法,研究了不同二價鎘離子(Cd2+)濃度脅迫對銀灰楊和84K楊試管苗生長和抗氧化酶活性的影響,通過比較二者的生長指標、不同Cd2+濃度脅迫抗氧化酶,表明銀灰楊和84K楊都有一定抗重金屬Cd污染的能力,但銀灰楊的抗鎘污染能力更強。張春燕等[8]采用土培的方法研究了3種重金屬復合污染下14個楊、柳樹品種的生物量、重金屬含量和總吸收量、富集系數和轉運系數,研究結果表明,綜合考慮上述指標,61-1和南林95具有較強的富集能力,是理想的修復材料。魯凡[9]以榆陽煤礦和榆樹灣煤礦的復墾區為研究對象,通過比較沙蒿、沙柳、楊樹、柳樹和松樹對重金屬的富集能力,對修復重金屬污染的優勢樹種進行了篩選,發現楊樹對Cd具有較強的富集能力,可以用于土壤Cd污染修復的首選植物。這些研究表明,楊樹對土壤重金屬污染的修復能力存在品種差異,可以針對污染源篩選修復能力強的楊樹品種應用于實踐。
很多學者都做過重金屬對楊樹生理生化及生長影響的研究。2011年余洋[10]通過對鉛(Pb)脅迫下楊樹生理生化和根尖細胞骨架變化的研究發現,鉛導致了葉片抗氧化酶系統活性及根尖細胞微管骨架排布的變化;并增加了根尖細胞胼胝質的沉積。張凱等[11]研究銅(Cu)、鎘(Cd)脅迫對楊樹葉片中防御蛋白活性的影響發現:其變化規律性與重金屬質量分數和時間有關,高質量濃度Cd、Cu處理下試驗葉片中的防御蛋白的活性在脅迫30~40 d后顯著高于對照,并在第40 d時最大,之后隨著處理時間的延長其活性顯著低于對照;低質量分數Cd、Cu處理與對照相比差異不顯著,在第60 d的時降到最小。譚靈杰[12]研究了鹽鎘復合脅迫下美洲黑楊多方面的性狀差異,發現雄株對Cd具有更高的吸收能力,但在其它方面與雌株的差異未達到顯著水平。楊葉[13]研究了3種楊樹幼苗在鍶(Sr)與柴油脅迫下的差異,結果表明,在鍶脅迫下,低濃度鍶對幼苗的株高等有促進作用,但隨著處理濃度的升高則會表現出抑制作用;在復合脅迫下,則均表現為抑制作用,且與白楊相比,青楊與俄羅斯楊的降幅更大。
關于重金屬在楊樹體內的富集,很多研究人員做過相關工作。劉乃聞[14]研究了礦區3種重金屬在楊樹中富集發現,鎘在楊樹體內的分布規律是葉>根>枝>干,樹干中的含量則以靠近樹根部分為最高,越往上其含量越低。李舒琦[15]采用雙因素實驗設計,研究器官、樹齡對楊樹吸收重金屬的影響,研究發現凋落葉中Cu和Pb的含量是隨著樹齡的增加而顯著增加的,與生長期葉片中含量相比達到了顯著水平。齊洪濤等[16]研究了堆肥污泥對5種重金屬在楊樹幼苗中分布情況的影響,Cu、Zn和As在幼苗中的分布基本一致,表現為根>葉>莖,Cd主要富集在葉片中,Hg除富集在根部外還依次富集在莖和葉片中。鄭慧芳[17]研究發現不同施氮量也會影響重金屬在體內的富集,當施氮量較低時,楊樹葉、根的細胞結構會產生變化,Cd更多地富集在根系中;當施氮量達到正常水平時,Cd在莖中含量增大,說明施氮量可影響楊樹對鎘污染的修復效率。
目前,關于強化修復技術的研究主要集中在微生物聯合修復、轉基因技術和螯合劑的使用3個方面。
近年來研究發現,楊樹可通過菌根(真)菌侵染獲得更加豐富的水養物質,微生物在楊樹修復土壤重金屬污染的過程中也起到非常重要作用。豆青[18]研究發現,與不接種外生菌根真菌的青楊相比,在相同的鉛脅迫濃度下,接種外生菌根真菌的青楊的株高和生物量均明顯提高,且在高濃度鉛脅迫下這種現象更加顯著。同時發現,不同的外生菌根菌對青楊的侵染率不同,草地大馬勃對青楊有更高的侵染率,可更好的提高鉛脅迫的耐受性。
隨著分子生物學實驗技術的成熟,轉基因技術越來越多的應用于各種研究。在研究楊樹對重金屬鎘脅迫的分子生理響應機制時,何佳麗[19]發現相比于野生型楊樹,過表達γ-glutamylcysteine synthetase基因楊樹在地上部分富集了更為豐富較多的鎘,除ROS外,總硫醇、GSH、GSSG以及可溶性酚和游離脯氨酸均是轉基因楊樹中含量較高,說明轉基因楊樹比野生型楊樹具有更高的鎘耐受性。趙思雯[20]從小黑楊葉片中克隆得到PsneIF5A2和PsneIF5A4基因,研究發現其在多個部位均有表達,在成熟葉片中轉錄水平最高。在重金屬脅迫、鹽脅迫和干旱脅迫時,熒光定量PCR檢測發現,上述脅迫條件均誘導了該基因的表達,且以重金屬脅迫和鹽脅迫下表達量較多。
近年來,研究學者開展了螯合劑添加對土壤中重金屬生物有效性影響的研究,發現其可提高重金屬在土壤中的有效性,因此常常采用投加螯合劑的方法來提高修復效率。李舒琦[15]研究表明,試驗中的3種螯合劑均能顯著促進土壤中Cu和Pb有效態的含量,但是活化能力略有不同。EDTA即可提高根和葉中Cu的含量又可提高葉片中Pb的含量,EGTA僅能增加根和葉中Cu的含量。金誠等[21]研究了干旱區農田土壤中Pb在投加3種螯合劑后吸收和富集特征。研究表明,EDTA、EGTA和CA均可顯著提高土壤中水提態Pb的含量,活化強度從強到弱為EDTA>EGTA>CA。
近年來,重金屬污染問題凸顯,植物修復土壤重金屬污染應注重其對重金屬的耐受性及修復效率。楊樹作為一種優良的修復樹種,首先應開展品種選育研究,針對不同區域選育出修復能力強的品種;其次應拓展楊樹修復土壤重金屬污染的強化措施;最后應從機理機制角度開展研究,挖掘楊樹修復重金屬污染的關鍵基因,利用基因表達調控來提高楊樹對重金屬的耐性等。