試論低離子聚凝胺檢驗法在交叉配血試驗中的應用價值

賴增新

(吉林省人民醫院 輸血科 吉林 長春 130021)

在臨床上，輸血療法是對患者進行救治的常用方法[1]。在對患者進行輸血前，對其血樣標本進行交叉配血試驗，可有效地降低其輸血不良反應的發生率，進而確保其進行輸血治療的安全性[2]。目前，臨床上多用低離子聚凝胺檢驗法和鹽水法對需要接受輸血治療患者的血樣標本進行交叉配血試驗。為了進一步探討低離子聚凝胺檢驗法在交叉配血試驗中的應用效果，筆者對2013年2月～2013年7月期間在我科進行交叉配血試驗的150例患者及其血樣標本的相關資料進行回顧性研究。現將研究結果報告如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

本次研究的對象是2013年2月～2013年7月期間在我科進行交叉配血試驗的150例患者及其血樣標本。在這150例患者中，有男性患者97例，女性患者53例。他們的年齡在3～72歲之間，平均年齡為(27.4±2.8)歲。

1.2 檢驗方法

將每例患者的血樣標本均分成兩份，分別使用低離子聚凝胺檢驗法和鹽水法對其血樣標本進行交叉配血試驗。

1.2.1 用鹽水法對這150例受血者的血樣標本進行交叉配血試驗的方法 取2支試管，將受血者和供血者的血樣標本分別放到這兩支試管中。另取2支裝有少量生理鹽水的試管，分別滴入受血者和供血者的血清，將其制成濃度為5%的紅細胞生理鹽水懸液。另取2支潔凈試管，在試管的表面標注上主測管（裝有受血者血樣標本的試管）和次測管（裝有供血者血樣標本的試管）。在主測管和次測管中分別加入1滴受血者的紅細胞生理鹽水懸液，將其搖勻，靜置15分鐘后觀察結果。

1.2.2 用低離子聚凝胺檢驗法對這150例受血者的血樣標本進行交叉配血試驗的方法 使用貝索生物技術有限公司生產的低離子聚凝胺試劑盒進行本次試驗。取2支玻璃試管，在其表面分別標注上主測管（裝有受血者血樣標本的試管）與次測管（裝有供血者血樣標本的試管）。在主測管中加入1滴受血者的血清和濃度為3%～5%供血者的紅細胞懸液，在次測管中加入1滴供血者的血清，并加入濃度為3%～5%受血者的紅細胞懸液。然后，在主測管和次測管中分別加入0.7 ml的低離子介質，將其搖勻后，在室溫下放置30s，然后在兩支試管中各加入2滴polybrene試劑，將其搖勻后再放置15s。將這兩支試管放到離心機中進行離心處理（離心機的轉速為3400 r/min）后，倒去上面的清液，保留管底的液體（約0.1 ml）。當試管中的液體出現明顯凝聚的表現后，在試管中分別滴入2滴解聚液，并輕輕地搖晃試管。試管內液體凝聚的現象如果在1分鐘之內消失，說明試驗的結果為陰性，反之為陽性。

1.3 觀察指標

觀察用低離子聚凝胺檢驗法和鹽水法對這150例受血者的血樣標本進行交叉配血試驗的陽性率及時間，并觀察在這些受血者的血樣標本中特異性紅細胞的數量。

1.4 評定標準

觀察主測管與次測管中血紅細胞凝集的情況。如果主測管與次測管中的血樣標本均沒有出現紅細胞凝聚的現象，說明配血成功（陰性），可以為受血者輸入供血者的血液。如果主側管中的血樣標本出現紅細胞凝聚的現象，說明配血不成功（陽性），不能為受血者輸入供血者的血液。

1.5 統計學處理

我們采用SPSS13.0統計學軟件包對本研究中的數據進行分析處理，計量資料用均數±標準差（）表示，采用t檢驗，計數資料用百分比（%）表示，采用χ2檢驗。P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

試驗結束后，在這150例受血者中，用低離子聚凝胺檢驗法對其血樣標本進行交叉配血試驗的結果為陽性的受血者有14例，其陽性檢出率為9.3%，對其血樣標本進行交叉配血試驗的平均時間為4.6 min。用顯微鏡觀察這些受血者的血樣標本，共發現有9個特異性紅細胞。用鹽水法對這些受血者的血樣標本進行交叉配血試驗的結果為陽性的受血者有8例，其陽性檢出率為5.3%，對其血樣標本進行交叉配血試驗的平均時間為16min。用顯微鏡觀察這些受血者的血樣標本，共發現有4個特異性紅細胞。用低離子聚凝胺檢驗法對這150例受血者的血樣標本進行交叉配血試驗的陽性檢出率高于用鹽水法對這些受血者的血樣標本進行交叉配血試驗的陽性檢出率；用低離子聚凝胺檢驗法對這150例受血者的血樣標本進行交叉配血試驗的平均時間短于用鹽水法對這些受血者的血樣標本進行交叉配血試驗的平均時間；通過低離子聚凝胺檢驗法進行檢測發現的特異性紅細胞的數量明顯多于通過鹽水法進行檢測發現的特異性紅細胞的數量，差異顯著，具有統計學意義（P＜0.05）。詳情見表1：

表1 用低離子聚凝胺檢驗法和鹽水法對這150例受血者的血樣標本進行交叉配血試驗的陽性檢出率及時間的比較（）

表1 用低離子聚凝胺檢驗法和鹽水法對這150例受血者的血樣標本進行交叉配血試驗的陽性檢出率及時間的比較（）

分組 試驗結果為陽性受血者的人數（n） 陽性檢出率(%) 試驗所用的平均時間(min)低離子聚凝胺檢驗法 14 9.3 4.6鹽水法 8 5.3 16

3 討論

在臨床上，在為患者進行輸血治療前，對其血樣標本進行交叉配血試驗，可以了解在受血者的血液中是否存在能破壞供血者血紅細胞的抗體及在供血者的血液中是否存在能破壞受血者血紅細胞的抗體[3-4]。在供血者的血樣標本中如果沒有檢驗到能破壞受血者血紅細胞的抗體，說明配血成功，即可以為受血者輸入供血者的血液。

研究發現[5]，在受血者的血液中存在不規則抗體是導致其出現遲發性免疫反應和溶血性輸血反應的重要原因。在通常情況下，不規則抗體是指IgG抗體[6]。過去，臨床上常用鹽水法對受血者的血樣標本進行交叉配血試驗。該試驗方法雖然具有成本低、操作簡便的優點，但其只能檢出IgM抗體，而不能檢出不完全抗體IgM，這使其檢驗結果存在一定的局限性[7-8]。與之相比，低離子聚凝胺檢驗法彌補了鹽水法的不足，且能有效地加快IgG抗體及完全抗體與血紅細胞的反應。原因在于：聚凝胺是一種帶有正電荷的離子，其所帶的正電荷能夠中和血紅細胞表面的負電荷，從而達到凝聚血紅細胞的效果[7]。

總之，將低離子聚凝胺檢驗法應用在交叉配血試驗中的效果顯著。此檢驗方法具有較高的臨床應用價值。