肺炎支原體肺炎患兒血清PDCD5水平與心肌損害的相關性分析

樓夢穎 顧申楓 董曉艷

肺炎支原體肺炎(mycoplasma pneumoniae pneumonia，MPP)是肺炎支原體(Mycoplasma pneumoniae，MP)引起的肺部急性炎癥，在嬰幼兒及兒童中發病率較高[1-2]，約占兒童社區獲得性肺炎病例的10%至40%[3]，具有病程時間長、易反復等臨床特征。MP感染發生后不同時期會出現肺外并發癥，甚至在無癥狀感染時，高達25%的MP感染者也會出現肺外并發癥。其中心肌損害是最常見的MPP合并肺外系統損傷疾病之一[4]，合并有心肌損害的MPP患兒如果得不到及時治療，會引起心臟功能減低，甚至心力衰竭[5]，對兒童的健康和生命造成了嚴重威脅，也給患兒的家庭帶來沉重的壓力和負擔[6]。程序化細胞死亡因子5(Programmed cell death 5，PDCD5)是程序性細胞死亡蛋白家族的成員之一[7]。以往的報道已經證實，PDCD5在不同的細胞類型中具有加速細胞凋亡的能力，以響應不同的刺激，并且還參與不同類型的細胞死亡。除了在小細胞凋亡中發揮作用，PDCD5還在腫瘤、自身免疫性疾病、炎癥性疾病以及心血管疾病等病理進程中發揮重要作用[8]。楊潔等研究表明PDCD5參與哮喘的氣道炎癥過程，其表達異常可能與哮喘未控制有關，可稱為臨床協助評估哮喘控制情況的指標或治療靶點[9]。但其在MPP中的表達以及與心肌損害的相關性尚不清楚，本研究旨在通過檢測患兒血清中PDCD5的表達情況，探討二者在肺炎支原體肺炎中的作用及與心肌損害的相關性。

資料與方法

一、一般資料

選取2018年7月—2020年5月本院門急診就診的77例MPP患兒，將其分為輕癥組和重癥組。其中輕癥組55例，重癥組22例。輕癥組中男22例，女33例，平均年齡(5.77±1.50)歲。重癥組中男13例，女9例，平均年齡(5.54±1.55)歲。心肌損害判定標準：(1)磷酸肌酸激酶同工酶(creatine kinase isoenzyme-MB，CK-MB)或超敏肌鈣蛋白(Hypersensitive troponin I，hs-cTnI)異常增高；(2)心電圖異常。納入標準：(1)MPP診斷標準參照《諸福棠實用兒科學(第8版)》[10]；(2)無心理及精神疾病患兒；(3)經心電圖、超聲心動圖及CK-MB、cTnI檢測提示心肌損害。排除標準：(1)其他病原菌感染導致的肺炎患兒；(2)支氣管、肺發育不良、有家族哮喘史者；(3)先天性心臟病、心肌病以及心功能不全者；(4)排除臨床資料不完整者；同時選取60例同期來本院體檢的健康兒童為對照組，年齡1～7歲，其中男30例，女30例，平均年齡(5.27±1.70)歲。兩組年齡、性別比較差異無統計學意義(P>0.05)。本研究所有樣品采集均取得受試者知情同意。

二、方法

健康人群于體檢當日清晨抽取空腹靜脈血5 mL，患兒于入院后次日清晨抽取空腹血，放至室溫靜置20 min，放入離心機，采用3000 r/min離心處理30 min，取上層血清置于-80℃保存備用。

三、觀察指標

采用酶聯免疫吸附(Enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)法檢測各組血清中PDCD5表達水平，具體操作步驟按照ELISA試劑盒說明書進行(因本院無該項檢驗，PDCD5的水平檢測委托其它檢測機構(中洪博元)進行)。采用全自動生化分析儀(HITACHI7080)檢測心肌酶譜指標包括乳酸脫氫酶(lactate dehydrogenase，LDH)、α-羥丁酸脫氫酶(α-hydroxybutyrate dehydrogenase，α-HBDB)、谷草轉氨酶(Aspartate transaminase，AST)、hs-cTnI、磷酸肌酸激酶(creatine kinase，CK)、CK-MB。采用全自動血細胞分析儀分析C-反應蛋白(CRP)、紅細胞分布寬度(RDW)、白細胞計數(WBC)、中性粒細胞百分比、血小板(PLT)水平。

四、統計學分析

結 果

一、三組一般資料比較

對照組、輕癥組、重癥組三組性別、年齡比較差異無統計學意義(P>0.05)；輕癥組和重癥組患兒CRP、RDW、PLT水平高于對照組(P<0.05)，且重癥組高于輕癥組(P<0.05)。輕癥組和重癥組患兒感染部位、WBC、中性粒細胞百分比比較差異無統計學意義(P>0.05)，重癥組患兒發熱持續時間長于輕癥組患兒(P<0.05)(見表1)。

表1 三組研究對象一般資料

二、三組血清中PDCD5水平比較

肺炎支原體肺炎輕癥組和重癥組患兒血清PDCD5水平均高于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)，且重癥組PDCD5水平對比輕癥組明顯升高，差異有統計學意義(P<0.05)(見表2)。

表2 三組血清中PDCD5水平比較

三、心肌損害組和非心肌損害組患兒血清中PDCD5水平比較

心肌損害組患兒血清PDCD5水平高于非心肌損害組，差異有統計學意義(P<0.05)(見表3)。

表3 心肌損害組和非心肌損害組患兒血清中PDCD5水平

四、心肌酶譜指標水平比較

與對照組相比，心肌損害組和非心肌損害組患兒血清中AST、LDH、α-HBDB、CK、CK-MB、hs-cTnI水平均明顯升高，且心肌損害組AST、LDH、α-HBDB、CK、CK-MB、hs-cTnI水平比非心肌損害組高，差異有統計學意義(P<0.05)。(見表4)。

表4 三組心肌酶譜指標水平比較

五、MPP患兒血清PDCD5水平與心肌酶譜指標水平的相關性分析

對MPP患兒血清PDCD5水平分別與心肌酶譜指標水平進行相關性分析，結果顯示，血清PDCD5水平與AST、LDH、α-HBDB、CK、CK-MB、hs-cTnI表達均呈正相關(P<0.05)(見表5)。

表5 PDCD5水平與心肌酶譜指標水平的相關性

六、血清中PDCD5水平對MPP患兒并發心肌損害的診斷價值

ROC結果顯示，血清PDCD5水平預測MPP患兒并發心肌損害的曲線下面積(AUC)為0.883(95%CI：0.790～0.945)，對應的敏感度分別為80.00%，特異度為92.31%(見圖1)。

圖1 血清PDCD5水平診斷MPP患兒并發心肌損害的ROC曲線

討 論

肺炎是兒童期特別是嬰幼兒期的常見病和多發病，其中MPP是兒科常見的呼吸系統疾病，占呼吸系統感染的15%～30%，是兒童，尤其是嬰兒死亡的重要因素，且發病率在逐年上升[11-12]。此外，MP感染也與多種呼吸道外疾病的發病有關，引起多系統損害，包括關節、肌肉、皮膚、腎臟、心臟、胃腸系統等[13-14]，其中心肌損害較為常見[15]，MP有與心肌細胞相同的抗原，通過外接刺激可產生自身抗體，與心肌內相應抗原結合形成免疫復合物，激活補體系統和炎性免疫系統，造成心肌損傷，但MPP并發心肌損害患兒在發病早期通常無自覺癥狀，部分患兒會出現胸悶、心悸等非特異性表現[16]，容易出現漏診，因此探討MPP患兒血清PDCD5水平與心肌損害的相關性，有助于早期判斷MPP患兒病情的指標，對防止病情加重具有重要意義。

PDCD5基因最初是從人白血病細胞系TF-1中克隆出來的。該基因位于染色體19q12-q1311上，跨越約6kb的基因組DNA，包含5個內含子和6個外顯子。近年來研究表明其在患者外周血、組織液以及組織器官中表達異常，參與不同細胞類型的凋亡調控[17]，這表明它可能對病理生理過程和疾病進展產生重要影響。李明等研究表明PDCD5在流感肺炎患者外周血中高表達，與流感肺炎的發生發展有關，為臨床診斷治療提供了新思路[18]。鄭鳳龍等研究表明PDCD5在心肌損傷細胞中表達升高，為心肌缺血再灌注損傷的治療提供新方向[19]。本研究中MPP輕癥組和重癥組的PDCD5表達水平均高于健康人群，且表達水平隨著病情嚴重程度的增加而上升，隨著心肌損害的發生表達會進一步上升，提示PDCD5參與MPP的發生發展，與心肌損害的發生和疾病的嚴重程度密切相關。研究進一步發現MPP患兒血清中AST、LDH、α-HBDB、CK、CK-MB、hs-cTnI水平均明顯升高，且在發生心肌損害患兒血清中的表達水平比非心肌損害組高，心肌酶譜是反映心肌損傷程度的重要指標，提示可利用心肌酶譜指標來初步判斷患兒是否存在心肌損傷以及損傷程度。MPP患兒血清中PDCD5水平與AST、LDH、α-HBDB、CK、CK-MB、hs-cTnI水平均呈正相關，提示PDCD5表達與心肌損傷程度密切相關，隨著疾病嚴重程度增加，機體反應性隨之增強，進而導致PDCD5表達升高，過表達的PDCD5可能通過誘導自噬和應激反應參與心肌損害的發生發展，其對評估患兒是否并發心肌損害具有重要意義。本研究還發現血清PDCD5水平預測MPP患兒并發心肌損害的AUC為0.883，對應的敏感度分別為80.00%，特異度為92.31%，提示PDCD5水平上調可作為診斷MPP患兒并發心肌損害的血清標志物。

綜上所述，PDCD5在MPP患兒血清中高表達，還可作為MPP患兒并發心肌損害的重要預測目標，臨床檢測PDCD5水平對評估MPP患兒病情具有重要的臨床意義。但本研究具有一定局限性，納入病例偏少，需在今后下一步臨床工作中擴大樣本量進行研究。