血清C3在急性鏈球菌感染后腎小球腎炎患兒中的表達及臨床意義

羅煥林

明溪縣總醫院兒科 (福建明溪 365200)

急性鏈球菌感染后腎小球腎炎(acute poststreptococcal glomerulonephritis，APSGN)是一種小兒多發性腎小球疾病，常以血尿為主要癥狀表現，并具有蛋白尿、高血壓、補體下降等臨床特征[1]。目前，關于APSGN的發病機制尚未完全明確。典型APSGN的診斷難度不大，依據患兒病史、臨床癥狀及體征即可作出判斷，但對于非典型APSGN病例，僅依靠癥狀及體征診斷缺乏敏感性，存在誤診的可能，故有必要尋找更為高效、快速、準確的實驗室檢測指標[2]。臨床實踐證明，血清補體系統異常激活(尤其是血清補體C3)可直接參與腎臟疾病的發生與發展[3-4]。不過，目前關于血清補體對APSGN診斷價值的研究并不多見。基于此，本研究旨在探討血清C3在APSGN患兒中的表達及臨床意義，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年2月至2021年12月我院收治的40例APSGN患兒，設為試驗組，并依據試驗組病情程度分為急性腎小球腎炎組與慢性腎小球腎炎組，各20例；選取同期在我院行健康體檢的40名小兒，設為對照組。試驗組與對照組監護人均簽署知情同意書。本研究經醫院醫學倫理委員會審核批準。

納入標準：試驗組患兒符合《小兒腎小球疾病的臨床分類、診斷及治療》[5]中APSGN的相關診斷標準，且經臨床檢查、影像學檢查、實驗室檢查、腎活檢確診；對照組為正常健康體檢小兒，無其他器質性病變；年齡4～12歲；入院后均完善血清C3檢查。排除標準：既往有腎病綜合征、乙型肝炎、過敏性紫癜等導致腎損傷的疾病；入院前有利尿劑、降壓藥等治療史；伴有心臟、肺部功能先天性缺陷；急性鏈球菌感染后合并其他腎小球疾病。

1.2 方法

3組均使用德國西門子BNII特種蛋白分析儀及配套試劑檢測相關指標：于清晨采集3組空腹靜脈血3 ml，血樣采集容器為含有促凝劑的無菌真空采血管；采樣完成后，在2 h內以3 000 r/min進行離心處理5 min，吸取上層清液；采用免疫速率散射比濁法檢測血清C3、C4水平；利用RNA提取純化試劑盒吸取血清總RNA，然后利用逆轉錄-聚合酶鏈反應(reverse transcription-polymerase chain reaction，RT-PCR)技術檢測血清miR-4532、miR-2861水平；應用溴甲酚綠法檢測血清白蛋白水平；應用脲酶-谷氨酸脫氫酶法檢測血清尿素氮(blood urea nitrogen，BUN)水平；應用苦味酸動力學法檢測肌酐(creatinine，Cr)水平；應用腎動態顯像法檢測腎小球濾過率(rglomerular filtration rate，eGER)水平；應用酶聯免疫法檢測血清白細胞介素-6(interleukin-6，IL-6)、白細胞介素-18(interleukin-18，IL-18)水平；應用特種蛋白分析儀檢測24 h尿蛋白量。

1.3 統計學處理

2 結果

2.1 試驗組與對照組臨床資料比較

試驗組與對照組平均年齡、性別比例比較，差異無統計學意義(P>0.05)；試驗組血清C3、C4、miR-4532、miR-2861、白蛋白、eGER水平均低于對照組，血清BUN、Cr、IL-6、IL-18及24 h尿蛋白定量水平均高于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)；見表1。

表1 試驗組與對照組臨床資料比較

2.2 急性組與慢性組血清C3水平及實驗室相關指標比較

急性組血清C3、C4、miR-4532、miR-2861、白蛋白、eGER水平均低于慢性組，血清BUN、Cr、IL-6、IL-18及24 h尿蛋白定量及水平均明顯高于慢性組，差異有統計學意義(P<0.05)，見表2。

表2 急性組與慢性組血清C3水平及實驗室相關指標比較

2.3 急性組血清C3水平與實驗室指標的相關性

經Pearson相關性分析發現，急性組血清C3水平與血清C4、白蛋白、BUN、Cr、IL-6、IL-18及24 h尿蛋白定量水平均成負相關，與血清eGER水平成正相關(r=0.588，P<0.05)，見表3。

表3 急性組血清C3水平與實驗室指標的相關性

3 討論

發生急性鏈球菌感染后，腎小球內的免疫復合物大量沉積形成阻塞，可引起免疫性炎癥，使腎小球無法實現正常濾過運行而受損，從而導致濾過面積縮小、濾過率下降，使患兒機體發生水鈉潴留、細胞外液大量增加、多種水溶質排泄減少，進而引發腎小球腎炎[6-7]。有研究認為[8]，腎小球內免疫復合物沉積的形成主要通過補體激活、中性粒細胞及單核細胞浸潤等途徑實現，可引起腎臟病變。

腎臟內的固有細胞可合成大量補體成分，這些補體成分具有重要的生物學意義，能參與進展性腎病的各個階段，尤其是腎小管上皮細胞C3補體表達不僅能參與腎小球病變進展，還能加重局部小管間質的病變程度[9]。本研究結果顯示，試驗組血清C3水平低于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)；試驗組中急性組血清C3水平低于慢性組，差異有統計學意義(P<0.05)；表明血清C3在APSGN患兒中呈低表達，可作為該病的診斷依據。其原因為，補體系統屬于固有免疫系統不可或缺的重要組成部分，與先天免疫、適應性免疫關系密切，能清除免疫復合物及受損細胞，同時能調節免疫功能[10]；但當機體受到鏈球菌感染時，其所分泌的外毒素會導致補體被激活，從而引起全身性炎性反應，使得遠端器官、腎臟等受損，補體C3也在被動大量消耗下出現表達降低的情況，故而APSGN患兒血清C3水平普遍下降[11-12]。本研究結果顯示，經Pearson相關性分析發現，急性組血清C3水平與eGER成正相關(P<0.05)，說明APSGN患兒的血清C3水平可隨eGER降低而降低。顧林婷和劉大軍[13]的研究指出，隨著患兒eGER的逐漸降低，其腎功能損傷逐漸加重，其免疫功能也持續紊亂，血清C3水平會因消耗量增加而持續下降。分析其原因為，eGER是評估腎功能的一項重要指標，當其含量降低時，表明患者存在腎臟疾病；補體C3水平的降低也與機體免疫力下降、腎臟疾病、傳染性疾病等因素有關，故而當患者發生急性腎小球腎炎時，其血清補體C3水平可隨eGER的降低而持續降低。

APSGN通常發生在皮膚感染后3～5周或咽喉感染后1～2周，具有高血壓、氮質血癥、水腫、血尿等臨床表現，也可有腎病綜合征的臨床表現。IL-6、IL-18是Th1/Th2的重要細胞因子，對多種自身免疫性疾病的發生發展起著重要作用。在APSGN患兒中，當其血清C3表達降低時，會導致下游相關炎性因子IL-6、IL-18等不受控而大量分泌釋放，使得血管內皮炎癥被激活，繼而誘導炎癥進一步損傷腎臟，導致eGER降低，進而導致其腎功能下降[14]。miR-4532、miR-2861是兩種可調控機體淋巴細胞功能與免疫功能活性的miRNA，可參與調控人體大約30%的基因表達，影響細胞繁殖、生長發育、分化、凋亡等生物學過程；若腎臟中特異性地缺乏miRNA或某些特異miRNA呈低表達，會導致可調節腎臟功能的特異性蛋白大量產生，進而參與到腎臟疾病的發生與發展中[15]。本研究結果顯示，急性組血清C4、miR-4532、miR-2861、白蛋白、eGER水平均低于慢性組，血清BUN、Cr、IL-6、IL-18及24 h尿蛋白定量水平均明顯高于慢性組，差異有統計學意義(P<0.05)，證實APSGN患兒病情的進展除受補體系統異常激活影響外，還可能受促炎因子分泌、蛋白尿形成、miRNA表達降低等因素的影響。

綜上所述，血清C3在APSGN患兒體內的表達明顯降低，且可隨eGER的降低而降低；臨床可根據APSGN患兒血清C3的水平評估其病情。