血清MIP-1α、TRACP-5b和骨硬化蛋白水平在多發性骨髓瘤病情和預后中的臨床價值*

范小紅，王雪蓮，孟亞紅

復旦大學附屬中山醫院青浦分院血液科，上海 201700

多發性骨髓瘤是一種B細胞惡性腫瘤，主要以漿細胞增殖為主，占血液惡性疾病的13%，其發病率呈上升趨勢。多發性骨髓瘤骨病是多發性骨髓瘤常見的并發癥之一，嚴重影響患者的生存質量，骨質損害程度與多發性骨髓瘤患者的生存質量密切相關[1]。早診斷、早治療多發性骨髓瘤骨病，對于改善患者預后具有重要臨床意義。雖然影像學檢查給多發性骨髓瘤骨病提供了直觀的證據，但不能進行早期和定量精準評價[2]。骨代謝標記物是評價骨代謝的指標，在多發性骨髓瘤骨病中的研究較少。多發性骨髓瘤能夠分泌巨噬細胞炎癥蛋白-1α(MIP-1α)，從而下調骨保護素的表達水平，具有刺激破骨細胞和抑制成骨細胞活性的功能[3]；抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)主要來源于活化的破骨細胞，參與骨質代謝過程，具有促進骨吸收的作用[4]；骨硬化蛋白可以通過Wnt信號通路調節破骨細胞的活性，從而影響骨代謝異常[5]。本研究對多發性骨髓瘤患者血清MIP-1α、TRACP-5b和骨硬化蛋白水平與多發性骨髓瘤骨病病情和預后的關系進行探討，現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2019年1月至2020年12月在本院就診的125例多發性骨髓瘤患者作為觀察組，其中男67例，女58例；年齡35～79歲，中位年齡59歲；按照國際分期體系進行分期：Ⅰ期36例，Ⅱ期51例，Ⅲ期38例；根據骨質破壞程度進行分級：無骨質破壞為0級(35例)，普遍存在骨質疏松或者有1處骨質破壞為1級(19例)，有2～3處骨質破壞為2級(43例)，有3處以上骨質破壞或者存在病理性骨折或者壓縮性骨折為3級(28例)。另選取同期在本院體檢的75例健康體檢者作為對照組，其中男41例，女34例；年齡 38～79歲，中位年齡58歲。兩組研究對象性別、年齡等一般資料比較，差異均無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。所有研究對象均知情同意并簽署知情同意書，本研究經醫院倫理委員會審核通過。

1.2納入和排除標準

1.2.1納入標準 多發性骨髓瘤[6]和多發性骨髓瘤骨病[7]分別符合相應的診斷標準；病例資料完整；依從性良好。

1.2.2排除標準 合并其他惡性腫瘤；其他血液性疾病；骨關節疾病和內分泌性疾病，如甲狀腺功能亢進、甲狀腺功能減退和糖尿病等；創傷性骨折病史；入組前1個月內接受過激素、鈣劑和雙磷酸鹽治療者；智力下降或者精神性疾病患者。

1.3方法

1.3.1治療方法 所有患者入院后進行常規化療前的檢查，按照硼替佐米+沙利度胺+地塞米松(VTD)方案或硼替佐米+脂質體阿霉素+地塞米松(VAD)方案或硼替佐米+來那度胺+地塞米松(VRD)方案予以化療，所有患者未接受過骨髓移植和造血干細胞治療。除此之外，診斷為多發性骨髓瘤后2年內使用唑來膦酸4 mg治療，每個月1次，2年后每3個月一次。出現雙膦酸鹽相關性頜骨壞死病例則暫停使用至少3個月。

1.3.2血清學指標檢測 所有研究對象入組時抽取空腹肘靜脈血5 mL，放置在抗凝管中，以3 000 r/min離心10 min，將上清液置于-70 ℃冰箱中用于血清學指標水平檢測。采用酶聯免疫吸附試驗檢測血清MIP-1α、TRACP-5b和骨硬化蛋白水平，試劑盒購自上海聯邁生物工程有限公司。

1.3.3觀察指標 比較觀察組和對照組血清MIP-1α、TRACP-5b和骨硬化蛋白水平，以及觀察組患者治療前后血清MIP-1α、TRACP-5b和骨硬化蛋白水平；比較不同腫瘤分期、不同骨質破壞程度分級多發性骨髓瘤患者血清MIP-1α、TRACP-5b和骨硬化蛋白水平；進行多發性骨髓瘤患者1年內發生死亡的單因素和多因素分析；比較血清MIP-1α、TRACP-5b和骨硬化蛋白單項及3項指標聯合檢測對多發性骨髓瘤患者1年內發生死亡的預測效能。

2 結 果

2.1觀察組和對照組血清MIP-1α、TRACP-5b和骨硬化蛋白水平比較 觀察組治療前后血清MIP-1α、TRACP-5b和骨硬化蛋白水平均明顯高于對照組，且觀察組患者治療后血清MIP-1α、TRACP-5b和骨硬化蛋白水平均明顯低于治療前，差異均有統計學意義(P<0.05)，見表1。

表1 觀察組和對照組血清MIP-1α、TRACP-5b和骨硬化蛋白水平比較

2.2不同腫瘤分期多發性骨髓瘤患者血清MIP-1α、TRACP-5b和骨硬化蛋白水平比較 Ⅲ期多發性骨髓瘤患者血清MIP-1α、TRACP-5b和骨硬化蛋白水平均明顯高于Ⅰ期和Ⅱ期，Ⅱ期多發性骨髓瘤患者血清MIP-1α、TRACP-5b和骨硬化蛋白水平均高于Ⅰ期，差異均有統計學意義(P<0.05)，見表2。

表2 不同腫瘤分期多發性骨髓瘤患者血清MIP-1α、TRACP-5b和骨硬化蛋白水平比較

2.3不同骨質破壞程度分級多發性骨髓瘤患者血清MIP-1α、TRACP-5b和骨硬化蛋白水平比較 隨著多發性骨髓瘤骨質破壞程度分級升高患者血清MIP-1α、TRACP-5b和骨硬化蛋白水平均明顯升高，差異均有統計學意義(P<0.05)，見表3。

表3 不同骨質破壞程度分級多發性骨髓瘤患者血清MIP-1α、TRACP-5b和骨硬化蛋白水平比較

2.4多發性骨髓瘤患者1年內發生死亡的單因素分析 所有患者均隨訪1年，死亡40例，存活85例。死亡組患者腫瘤分期、骨質破壞程度分級、MIP-1α水平、TRACP-5b水平和骨硬化蛋白水平與存活組比較，差異均有統計學意義(P<0.05)；而存活組和死亡組患者性別、體質量指數(BMI)和化療方案比較，差異均無統計學意義(P>0.05)。見表4。

表4 多發性骨髓瘤患者1年內發生死亡的單因素分析[n(%)或n或

組別nMIP-1α(pg/mL)TRACP-5b(ng/mL)骨硬化蛋白(pg/mL)存活組85119.39±31.4429.78±8.170.60±0.08死亡組40162.33±34.3438.21±10.520.74±0.11χ2/t6.9154.8936.947P<0.001<0.001<0.001

2.5多發性骨髓瘤患者1年內發生死亡的影響因素分析 對單因素分析差異有統計學意義的指標進行多因素分析發現，腫瘤分期、骨質破壞程度分級、MIP-1α水平、TRACP-5b水平和骨硬化蛋白水平是多發性骨髓瘤患者1年內發生死亡的獨立影響因素(P<0.05)。見表5。

表5 多發性骨髓瘤患者1年內發生死亡的多因素分析

2.6血清MIP-1α、TRACP-5b和骨硬化蛋白水平對多發性骨髓瘤患者1年內發生死亡的預測效能 血清MIP-1α、TRACP-5b和骨硬化蛋白水平對多發性骨髓瘤患者1年內發生死亡具有較高的預測效能，根據1年內是否發生死亡進行多因素Logistic回歸分析得方程Y=0.04×XMIP-1α+0.11×XTRACP-5b+13.88×X骨硬化蛋白-19.31得綜合檢測指標，3項指標聯合檢測的靈敏度為90.0%，特異度為87.1%，曲線下面積(AUC)為0.934，明顯高于MIP-1α(Z=3.068，P=0.002)、TRACP-5b(Z=3.622，P<0.001)和骨硬化蛋白(Z=2.576，P=0.010)單獨檢測，而3項指標之間的AUC比較，差異無統計學意義(P>0.05)。見表6、圖1。

表6 血清MIP-1α、TRACP-5b和骨硬化蛋白水平對多發性骨髓瘤患者1年內發生死亡的預測效能

圖1 血清MIP-1α、TRACP-5b和骨硬化蛋白預測多發性骨髓瘤患者1年內發生死亡的ROC曲線

3 討 論

多發性骨髓瘤骨病是多發性骨髓瘤的并發癥之一，多發性骨髓瘤與骨髓基質之間具有密切的聯系，骨髓基質支撐著多發性骨髓瘤的發展，而多發性骨髓瘤細胞同樣影響著基質的組成，從而導致廣泛溶骨性病變發生[8]。正常骨骼代謝與成骨和破骨細胞之間的平衡具有密切聯系。本研究結果顯示，腫瘤分期、骨質破壞程度分級、MIP-1α水平、TRACP-5b水平和骨硬化蛋白水平是多發性骨髓瘤患者1年內發生死亡的影響因素。有研究顯示，多發性骨髓瘤會分泌多種細胞因子，如腫瘤壞死因子、白細胞介素-3和MIP-1α等，對成骨細胞活性具有抑制作用，主要抑制基質細胞轉化為成骨細胞[9]。本研究結果顯示，觀察組治療前后血清MIP-1α水平明顯高于對照組，治療后血清MIP-1α水平明顯低于治療前，說明MIP-1α與多發性骨髓瘤具有密切聯系。本研究結果顯示，血清MIP-1α水平隨著多發性骨髓瘤腫瘤分期和骨質破壞程度分級升高而升高，說明血清MIP-1α水平是反映多發性骨髓瘤疾病嚴重程度的指標，與文獻[10]報道血清MIP-1α水平與疾病分期和骨質破壞程度相關的結論一致。骨質破壞程度增加促進多發性骨髓瘤增殖和骨質破壞，形成惡性循環，同時MIP-1α與相應受體結合后激活破骨細胞，導致破骨細胞被激活，代謝增強，造成骨質溶骨性破壞[11]。本研究結果顯示，死亡組患者血清MIP-1α水平明顯高于存活組，說明血清MIP-1α是多發性骨髓瘤預后的評價指標。血清MIP-1α截斷值為163.32 pg/mL時，其靈敏度為60.0%，特異度為92.9%，AUC為0.814，說明血清MIP-1α水平對預測多發性骨髓瘤患者1年內發生死亡具有較高的價值。

骨質代謝與破骨細胞和成骨細胞均具有重要作用，二者平衡受到破壞會引發骨病。TRACP-5b是破骨細胞分泌的細胞因子，當破骨細胞活化時TRACP-5b被分泌到細胞外，故血清TRACP-5b水平是反映破骨細胞活性和溶骨嚴重程度的重要指標[12]。本研究結果顯示，觀察組治療前后血清TRACP-5b水平明顯高于對照組，治療后血清TRACP-5b水平明顯低于治療前，說明TRACP-5b水平與多發性骨髓瘤的發生和發展具有一定的聯系。本研究結果顯示，血清TRACP-5b水平隨著多發性骨髓瘤腫瘤分期和骨質破壞程度分級升高而升高，說明血清TRACP-5b水平是反映多發性骨髓瘤疾病嚴重程度的重要指標。在多發性骨髓瘤患者中血清TRACP-5b水平升高，是腫瘤轉移和溶骨性損傷的早期標記物，與多發性骨髓瘤病情嚴重程度呈正相關[13]。當腫瘤發生骨轉移時，破骨細胞活性明顯增加，血清TRACP-5b水平也明顯升高，其已被用于前列腺癌發生骨轉移的監測，具有較高的靈敏度和特異度，并認為有潛力替代骨掃描檢查[14]。本研究結果顯示，死亡組患者血清TRACP-5b水平明顯高于存活組，并且當血清TRACP-5b截斷值為38.78 ng/mL時，預測多發性骨髓瘤患者1年內發生死亡的靈敏度為62.5%，特異度為91.8%，AUC為0.765，說明血清TRACP-5b是多發性骨髓瘤預后的重要預測指標。

骨硬化蛋白是成骨細胞分泌的重要細胞因子，在骨代謝過程中具有重要作用，在多發性骨髓瘤早期通過經典Wnt信號通路對成骨細胞分化起作用，對過程發揮正向調節的作用[15]。隨著瘤負荷增加并達到一定水平，促進骨髓瘤細胞分泌硬化蛋白，通過抑制Wnt信號通路，從而引起多發性骨髓瘤骨病發生[16]。本研究結果顯示，觀察組治療前后血清骨硬化蛋白水平高于對照組，治療后血清骨硬化蛋白水平明顯低于治療前，說明骨硬化蛋白與多發性骨髓瘤的發生和發展具有一定的聯系。本研究結果顯示，血清骨硬化蛋白水平隨著多發性骨髓瘤腫瘤分期和骨質破壞程度分級升高而升高，與文獻[17]報道的結果類似，說明血清骨硬化蛋白水平與多發性骨髓瘤的負荷具有一定聯系，其機制可能與骨硬化蛋白抑制骨髓基質細胞向成骨細胞轉化，導致促瘤細胞生長因子增多，促進瘤負荷增加；同時骨硬化蛋白抑制骨修復的同時可促進腫瘤細胞生長[18]。本研究結果顯示，死亡組患者血清骨硬化蛋白水平明顯高于存活組，并且當血清骨硬化蛋白截斷值為0.72 pg/mL時，預測多發性骨髓瘤患者1年內發生死亡的靈敏度為67.5%，特異度為94.1%，AUC為0.842。本研究結果顯示，聯合檢測血清MIP-1α、TRACP-5b和骨硬化蛋白水平對多發性骨髓瘤患者1年內發生死亡具有更高的預測效能，其靈敏度為90.0%，特異度為87.1%，AUC為0.934，高于單項指標，說明3項指標對預測多發性骨髓瘤患者1年內發生死亡具有一定的互補性，單項指標均與骨質形成和吸收相關的指標可能存在內在聯系，具體機制需要進一步研究。

綜上所述，MIP-1α、TRACP-5b和骨硬化蛋白參與了多發性骨髓瘤的發生和發展，對多發性骨髓瘤患者1年內發生死亡具有較高的預測價值。