血清肝細胞生長因子評估兒童肺炎支原體肺炎的臨床價值

李超

肺炎支原體作為引發小兒呼吸道感染的一個主要病原，同時也是所有年齡段患兒發生社區獲得性肺炎的一個主要原因，近些年這一疾病發生率明顯提高，特別是在嬰幼兒人群中[1]。肺炎支原體通常寄居在呼吸道上皮細胞，所以肺炎支原體感染通常會導致呼吸道感染，包括上呼吸道感染、氣管炎、支氣管炎、肺炎，但近些年隨著研究不斷深入，發現肺炎支原體感染容易導致肺外并發癥[2]。肺炎支原體肺炎在兒童社區獲得性肺炎患兒中占比達到10%～40%，而且兒童重癥肺炎支原體肺炎以及難治性支原體肺炎病例數明顯增多[3]。盡管大部分肺炎支原體肺炎患兒無嚴重癥狀表現，預后良好，部分患兒以自限性為主，但也一些患兒合并肺外并發癥，這對患兒身體健康有嚴重影響，而且影響其家庭生活質量。當前對于重癥肺炎支原體肺炎并未形成統一診斷標準，文章從2019年1月—2021年6月茂名市人民醫院擇取60例兒童肺炎患兒和20名健康兒童作為研究對象，探討在兒童肺炎支原體肺炎評估中實施血清肝細胞生長因子水平檢測的臨床價值，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

從2019年1月—2021年6月茂名市人民醫院擇取60例肺炎支原體肺炎患兒作為研究組，按照病情嚴重程度將研究組患兒分為兩組，20例重癥肺炎支原體肺炎患兒納入研究一組，年齡3～14歲，平均（7.36±3.41）歲，男6例，女14例；40例非重癥肺炎支原體肺炎患兒納入研究二組，年齡3～14歲，平均（5.78±3.67）歲，男17例，女23例；另外擇取20名健康體檢兒童作為對照組，年齡3～14歲，平均（6.69±3.33）歲，男10例，女10例。經檢驗組間對比差異無統計學意義（P＞0.05）。本次研究經醫院倫理委員會審批，家屬知曉且同意參與本次研究。納入標準：經肺部影像學檢查、痰培養、血培養以及血清MP-IgM檢查確診，符合第8版《諸福棠實用兒科學》[4]對應診斷標準，可以配合檢查，臨床資料完整。排除標準：合并其他病原感染、重癥肺炎病史、反復呼吸道感染病史、慢性肺疾病病史、心血管疾病、先天性或繼發性免疫抑制或缺陷、支氣管哮喘、結締組織疾病、肝腎疾病、不配合、臨床資料不全等。

1.2 方法

所選研究對象均于晨起空腹狀態采集1.5 mL靜脈血，并用抗凝管收集，置于室溫條件下20～30 min，之后對血液標本予以離心處理，離心速度為3 000 r/min，離心時間為5 min，離心半徑為13.5 cm，獲取上層清液，并置于-80℃冰箱內進行保存。通過酶聯免疫吸附法對血清肝細胞生長因子水平進行檢測，先將試劑盒取出，置于25℃環境下30 min，全程在該溫度下進行，將酶標板取出，以標準品次序為準，在空白微孔內加入50 μL標準品溶液，之后再加入樣品50 μL，在空白對照中加入蒸餾水50 μL，樣品孔內加入生物素10 μL，在除空白對照孔外各孔加入酶標記溶液100 μL，用封口膠對酶標板密封處理，置于37℃環境進行孵育，時間為1 h，之后對酶標板進行充分清洗3～5次，確保各孔水壓充足，洗滌之后通過吸水紙拍干，之后在除空白對照孔外各孔內加入顯色劑A和B，每種50 μL，置于25℃條件下避光反應15 min，最后加入終止液50 μL，終止反應，并進行觀察。通過全自動生化分析儀測定研究組患兒的血清C-反應蛋白濃度、乳酸脫氫酶濃度，其中血清C-反應蛋白濃度通過乳膠免疫比濁法進行檢測，先將試劑盒裝載在貝克曼庫爾特AU5800試劑倉中，將校準品取出，并通過加樣槍吸取95 μL，將其置于樣品杯內，上機定標，定標之后，利用貝克曼庫爾特生化分析儀查看定標曲線合格與否，待定標合格之后，實施質量控制程序，將質控液取出，通過加樣槍吸取75 μL置于樣品杯內，質控合格之后進行血清樣本測定。靜脈血采集之后，置于分離膠促凝管內，按照3 000 r/min速度離心處理5 min，獲得上層清液，置于樣品杯內，裝載在貝克曼庫爾特AU5800分析儀上進行測定。通過乳酸底物法對血清乳酸脫氫酶濃度進行測定，先將試劑盒裝載在貝克曼庫爾特AU5800試劑倉中，將生化多項校準品取出，并通過加樣槍吸取98 μL，將其置于樣品杯內，上機定標，定標之后，利用貝克曼庫爾特生化分析儀查看定標曲線合格與否，待定標合格之后，實施質量控制程序，將配套兩水平生化多項質控品取出，通過加樣槍吸取85 μL置于樣品杯內，質控合格之后進行血清樣本測定。靜脈血采集之后，置于分離膠促凝管內，按照3 000 r/min速度離心處理5 min，獲得上層清液，置于樣品杯內，裝載在貝克曼庫爾特AU5800分析儀上進行測定。

1.3 觀察指標

（1）對比研究組與對照組的血清肝細胞生長因子、C-反應蛋白、乳酸脫氫酶水平差異。（2）臨床特征與實驗室特點：涉及到年齡、住院時間、胸片類型、性別、入院前發熱時間、入院前咳嗽時間以及實驗室檢查（白細胞、中性粒細胞、血紅蛋白、血小板、丙氨酸氨基轉移酶、天門冬氨酸氨基轉移酶）結果。（3）對照研究一組和研究二組的血清肝細胞生長因子（＜4 500 pg/mL）、血清C-反應蛋白濃度（0.8～8 mg/L）、乳酸脫氫酶濃度（135.0 ～ 215.0 U/L）[5]。

1.4 統計學方法

本次研究通過SPSS 22.0統計學軟件分析，計量資料以（）表示，采用t檢驗。計數資料以n（%）表示，采用χ2檢驗。以P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 研究組與對照組的血清肝細胞生長因子、C-反應蛋白、乳酸脫氫酶水平對比

研究組血清肝細胞生長因子水平、C-反應蛋白、乳酸脫氫酶水平高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 研究組與對照組的血清肝細胞生長因子、C-反應蛋白、乳酸脫氫酶水平對比（）

表1 研究組與對照組的血清肝細胞生長因子、C-反應蛋白、乳酸脫氫酶水平對比（）

組別 例數 血清肝細胞生長因子（pg/mL） 血清C-反應蛋白濃度（mg/L） 乳酸脫氫酶濃度（U/L）研究組 60 6 507.82±1 895.89 11.56±4.52 297.85±56.96對照組 20 4 175.23±248.56 3.25±1.02 154.05±15.88 t值 - 9.294 13.264 17.609 P值 - ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001

2.2 研究一組與研究二組血清肝細胞生長因子、血清C-反應蛋白濃度、乳酸脫氫酶濃度對比

研究一組的血清肝細胞生長因子、血清C-反應蛋白濃度、乳酸脫氫酶濃度明顯高于研究二組，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表2。

表2 研究一組與研究二組血清肝細胞生長因子、血清C-反應蛋白濃度、乳酸脫氫酶濃度對比（）

表2 研究一組與研究二組血清肝細胞生長因子、血清C-反應蛋白濃度、乳酸脫氫酶濃度對比（）

組別 例數 血清肝細胞生長因子（pg/mL） 血清C-反應蛋白濃度（mg/L） 乳酸脫氫酶濃度（U/L）研究一組 20 7 667.89±1 962.56 17.89±5.56 337.02±120.33研究二組 40 5 682.67±1 352.66 9.89±2.43 256.89±54.34 t值 - 4.067 6.147 2.837 P值 - ＜ 0.001 ＜ 0.001 0.005

2.3 研究一組與研究二組臨床特征與實驗室特點對比

從臨床特征與實驗室特點分析，研究一組年齡大于研究二組，住院時間比研究二組長，支氣管肺炎類型的胸片患者多于研究二組，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表 3。

表3 研究一組與研究二組臨床特征與實驗室特點對比

表3 （續）

3 討論

肺炎支原體屬于原核生物，可以自行繁殖，介于細菌、病毒之間，同時也是兒童時期肺炎等呼吸道感染的主要病原。上呼吸道感染患兒通常會出現咳嗽、咯痰、咽紅等現象，而下呼吸道感染患兒則會出現咳嗽以及發熱等癥狀，咳嗽以陣發性劇烈干咳為主，與百日咳癥狀相似，可以持續數周，對患兒睡眠狀況有不良影響，甚至引發呼吸困難癥狀[6]。肺炎支原體肺炎屬于下呼吸道感染，發熱屬于重要表現，發熱時間可以持續超過1周，大約50%的肺炎支原體肺炎患兒會出現這一癥狀。肺炎支原體肺炎患兒大多數起病緩慢，但也有部分患兒發病急，潛伏期通常在2～3周，癥狀嚴重程度不同，通常伴隨發熱癥狀，另外還會出現頭痛、刺激性咳嗽、胸骨下疼痛、畏寒、厭食、咽痛等現象[7]。近些年，嬰幼兒肺炎支原體肺炎發生率明顯提高，而且以急性發病為主，病程較長，主要表現為喘憋、呼吸困難、喘鳴音等，同時重癥病例也明顯增加，一些患兒甚至出現肺壞死、胸腔積液等嚴重并發癥，所以需要予以重視，對其及時診斷與治療，以改善治療效果[8]。

肝細胞生長因子作為一種細胞因子，對急性受損組織可以起到保護作用，同時可以起到促進受損組織再生作用，最初是在成年大鼠干細胞內作為有絲分裂原內發現，同時可以在某些腫瘤細胞內表現出細菌毒性作用。肝細胞生長因子主要來源于肺泡巨噬細胞、支氣管上皮細胞、中性粒細胞，不僅對急性肺損傷有修復作用，同時對肺部炎癥也有改善作用[9]。據相關研究指出，軍團肺炎病例的血清內肝細胞生長因子水平明顯比健康人群高，而且死亡患者明顯高于存活患者[10]。同時也有研究指出，急性呼吸窘迫綜合征、急性肺損傷患者的肺泡液內肝細胞生長因子水平明顯升高，其升高與死亡率有一定相關性[11-12]。如果肺炎支原體肺炎患兒病情嚴重，則會出現局部缺氧缺血，還會伴隨酸中毒，另外一些肺炎支原體肺炎患兒還會出現肺損傷，甚至發展為致死性疾病，在多種促炎因子作用下對肝細胞生長因子合成產生刺激。細菌性肺炎、軍團菌肺炎患者中肝細胞生長因子水平明顯升高，這也是肺炎支原體肺炎患兒血清肝細胞生長因子水平升高的證明[13-15]。本次研究中，重癥肺炎支原體肺炎、非重癥肺炎支原體肺炎、健康兒童的血清肝細胞生長因子兩兩對比中發現，重癥肺炎支原體肺炎、非重癥肺炎支原體肺炎患兒的血清肝細胞生長因子明顯高于健康兒童，說明肺炎支原體肺炎患兒血清肝細胞生長因子水平提升提示血清肝細胞生長因子參與肺炎支原體肺炎的發病機制。

綜上所述，在兒童肺炎支原體肺炎評估中，血清肝細胞生長因子水平檢測具備顯著臨床價值，可以評估病情嚴重程度，還為兒童肺炎支原體肺炎后期臨床評估診斷標準指定提供了借鑒內容。