郝雨檬,王彩霞,馬景學,李雪景,尚慶麗
新生血管生成在多種疾病致病中發揮重要作用,主要包括腫瘤血管、眼底新生血管、冠狀動脈斑塊新生血管等[1]。眼底新生血管包括視網膜新生血管(retinal neovascularization,RNV)和脈絡膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)常發生于糖尿病視網膜病變、年齡相關性黃斑變性、病理性近視等致盲性眼病中,是視力喪失的重要原因。眼底新生血管的發生機制尚不明確,與基因異常、缺氧、氧化應激、炎癥等因素均相關,是多種細胞和因子共同作用的結果,其中血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)發揮關鍵作用[2-3]。目前臨床主要采用玻璃體腔注射抗VEGF藥物治療RNV和CNV,但存在作用靶點單一、復發率高、反復注射引起纖維瘢痕化和視網膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)萎縮等問題[4]。中藥及中藥單體安全、高效、價廉、多靶點,可為藥物防治眼底新生血管提供新的思路和方法。莪術醇(Curcumol),分子式C15H24O2,倍半萜類,是中藥莪術的主要活性成分,具有抗腫瘤、抗炎、抗纖維化等多種生物活性,臨床應用廣泛,但在新生血管生成中的作用尚不明確[5-6]。人臍靜脈血管內皮細胞(HUVECs)是體外常用的內皮細胞模型,也是RNV和CNV體外研究常用的細胞模型[7-9]。本研究利用HUVECs體外分析莪術醇對新生血管生成的抑制作用,為后續其應用于眼底新生血管的治療研究提供理論和技術支持。
1.1材料
1.1.1細胞HUVECs細胞購自湖北豐輝生物科技有限公司。
1.1.2主要試劑及儀器莪術醇(HY-N0104,美國MedChemExpress公司),VEGF(100-20,美國PeproTech公司),DMEM培養基(美國Gibco公司),胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)(以色列 Biological Industries公司),CCK-8檢測試劑盒……