血清可溶性尿激酶受體（suPAR）水平與慢性乙肝肝纖維化進(jìn)展的相關(guān)性研究

王秋豐，鄧國(guó)雄，黃桂霞

（佛山市高明區(qū)中醫(yī)院，廣東 佛山 528500）

慢性乙肝（Chronic Hepatitis B，CHB）是由乙型肝炎病毒（hepatitis B virus, HBV）感染引起的慢性傳染性肝病，是嚴(yán)重的全球公共衛(wèi)生問(wèn)題。目前，我國(guó)約有HBV 感染患者9300 萬(wàn)例，CHB 患者2000萬(wàn)例，CHB 發(fā)病率仍然高居不下，我國(guó)CHB 防治形勢(shì)十分嚴(yán)峻[1]。由于HBV 長(zhǎng)期反復(fù)作用于肝臟，導(dǎo)致肝細(xì)胞變性、壞死，患者會(huì)出現(xiàn)不同程度的肝纖維化，隨著病情進(jìn)展可能會(huì)發(fā)展為肝硬化或肝癌，嚴(yán)重危及患者的生命安全[2]。肝組織活檢術(shù)仍然是臨床判斷CHB 患者肝纖維化程度的金標(biāo)準(zhǔn)，但此法存在創(chuàng)傷性，其可重復(fù)性差、取樣誤差大，無(wú)法長(zhǎng)期、動(dòng)態(tài)反映肝纖維化進(jìn)展，患者對(duì)其認(rèn)可度較低[3]。研究發(fā)現(xiàn)，血清學(xué)標(biāo)志物在判斷CHB 肝纖維化進(jìn)展方面具有顯著的應(yīng)用優(yōu)勢(shì)，能夠通過(guò)血清學(xué)標(biāo)志物表達(dá)水平識(shí)別肝硬化程度，減少肝活檢的實(shí)施[4]。血清可溶性尿激酶受體（soluble urokinase-type plasminogen activator receptor，suPAR）是uPAR 的可溶形式。研究發(fā)現(xiàn)，suPAR 可在發(fā)生炎癥刺激時(shí)從細(xì)胞表面裂解并釋放到體液中，作為一種新型血清標(biāo)志物，其表達(dá)水平與各種疾病的病理過(guò)程及預(yù)后具有密切關(guān)聯(lián)[5]。鑒于此，本文研究分析血清suPAR 水平與CHB 肝纖維化進(jìn)展的相關(guān)性，以期為相關(guān)疾病的治療及轉(zhuǎn)歸預(yù)測(cè)提供參考依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2021 年1 月至2021 年12 月我院收治的120 例CHB 患者作為CHB 組。病例納入標(biāo)準(zhǔn)：1）經(jīng)實(shí)驗(yàn)室檢查及影像學(xué)檢查證實(shí)符合《慢性乙型肝炎防治指南（2019 年）》[6]中CHB 的診斷標(biāo)準(zhǔn)；2）未經(jīng)抗病毒治療；3）臨床資料齊全；4）患者對(duì)本研究知情，且已簽署知情同意書(shū)。病例排除標(biāo)準(zhǔn)：1）甲、丙、丁、戊型肝炎病毒感染者；2）伴人類免疫缺陷病毒（Human Immunodeficiency Virus，HIV）、巨細(xì)胞病毒、嗜肝病毒感染者；3）脂肪肝、酒精肝、藥物性肝炎、肝膿腫或原發(fā)性肝癌患者；4）伴心、肺、腎等器官的嚴(yán)重器質(zhì)性病變者；5）伴自身免疫性感染者；6）伴惡性腫瘤者；7）臨床資料不完整者。遵循1:1 匹配原則選取同時(shí)間段于我院進(jìn)行健康體檢的120 例健康志愿者作為對(duì)照組。CHB 組：男62 例，女58 例；年齡41 ～75 歲，平均年齡（56.26±9.24）歲。對(duì)照組：男57 例，女63 例；年齡42 ～71 歲，平均年齡（55.11±8.93）歲。兩組的年齡、性別等一般資料相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有均衡性。本研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)同意，且符合《赫爾辛基宣言》中的相關(guān)原則。

1.2 研究方法

1.2.1 肝纖維化分期 CHB 患者均行肝組織穿刺病理學(xué)檢查，指導(dǎo)患者取左側(cè)臥位，超聲定位選擇腋前線第8 或第9 肋間為穿刺點(diǎn)，常規(guī)消毒鋪巾，采用2%利多卡因行局麻，在超聲引導(dǎo)下穿刺，取出肝臟組織，置入甲醛溶液中固定。依次進(jìn)行脫水、石蠟包埋、切片，然后進(jìn)行病理檢查。參照《慢性乙型肝炎防治指南（2019 年）》[6]進(jìn)行肝纖維化分期，分為S0-1期、S2期、S3期、S4期，患者例數(shù)分別為50 例、35 例、22 例、13 例。

1.2.2 血清學(xué)指標(biāo)檢測(cè) 采集兩組受試者清晨空腹肘靜脈血10mL 送檢，于3000r/min 的離心機(jī)中旋轉(zhuǎn)離心20min，分離血清置于-70℃冰箱中保存待用。采用酶聯(lián)免疫吸附法（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）檢測(cè)血清suPAR 水平及血清肝纖維化標(biāo)記物〔殼多糖酶3 樣蛋白1（chitinase 3-like protein 1，YKL-40）、前膠原C 端蛋白酶增強(qiáng)子1（procollagen C-terminal protease enhancer 1，PCPE-1）、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1（Transforming growth factor beta，TGF-β1）〕，所用儀器為T(mén)HERMO Multiskan FC 全自動(dòng)酶標(biāo)儀（美國(guó)Thermo Scientific），試劑盒均購(gòu)自上海鈺博生物科技有限公司，檢測(cè)步驟嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

應(yīng)用SPSS26.0 版軟件處理數(shù)據(jù)，正態(tài)分布且方差齊性的計(jì)量資料以±s表示，兩組比較行LSD-t檢驗(yàn)，多組比較采用方差分析，用M（QR）表達(dá)呈偏態(tài)分布的計(jì)量資料，采用秩和檢驗(yàn)；以n(%) 表示計(jì)數(shù)資料，采用χ2 或Fisher 檢驗(yàn)；分析血清suPAR水平與CHB 患者肝纖維化分期的相關(guān)性采用Pearson相關(guān)性分析法，P＜0.05 表示數(shù)據(jù)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 CHB 患者與健康人群血清YKL-40、TGF-β1、suPAR、PCPE-1 水平的比較

CHB 組患者的血清YKL-40、TGF-β1、suPAR水平顯著高于對(duì)照組，PCPE-1 水平顯著低于對(duì)照組（P＜0.05）。見(jiàn)表1。

表1 CHB 患者與健康人群血清YKL-40、TGF-β1、suPAR、PCPE-1 水平的比較（± s）

表1 CHB 患者與健康人群血清YKL-40、TGF-β1、suPAR、PCPE-1 水平的比較（± s）

組別 YKL-40（ng/mL） TGF-β1（pg/mL） PCPE-1（pg/mL） suPAR（ng/mL）CHB 組（n=120） 30.72±6.25 68.44±13.65 7.46±1.72 4.83±0.85對(duì)照組（n=120） 7.14±1.09 27.82±5.77 41.35±11.40 2.11±0.42 t 值 40.714 30.026 32.201 31.427 P 值 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001

2.2 不同肝纖維化分期CHB 患者血清YKL-40、TGF-β1、suPAR、PCPE-1 水平的比較

不同肝纖維化分期CHB 患者的血清YKL-40、TGF-β1、suPAR、PCPE-1 水平相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；隨著CHB 患者肝纖維化的加重，其血清YKL-40、TGF-β1、suPAR 水平表現(xiàn)出不同程度的升高，PCPE-1 水平表現(xiàn)出不同程度的降低。見(jiàn)表2。

表2 不同肝纖維化分期CHB 患者血清YKL-40、TGF-β1、suPAR、PCPE-1 水平的比較（± s）

表2 不同肝纖維化分期CHB 患者血清YKL-40、TGF-β1、suPAR、PCPE-1 水平的比較（± s）

注：①表示與S2 期比較，P ＜0.05 ；②表示與S3 期比較，P ＜0.05；③表示與S4 期比較，P ＜0.05。

肝纖維化分期 YKL-40（ng/mL） TGF-β1（pg/mL） PCPE-1（pg/mL） suPAR（ng/mL）S0-1 期（n=50） 25.44±2.72①②③ 54.71±6.23①②③ 14.75±4.11①②③ 2.82±0.37①②③S2 期（n=35） 28.39±3.19②③ 61.75±8.01②③ 9.23±3.14②③ 3.43±0.42②③S3 期（n=22） 31.72±3.34①③ 69.42±9.29①③ 5.17±2.52①③ 4.19±0.55①③S4 期（n=13） 33.65±4.29①② 82.64±11.47①② 1.85±1.43①② 5.68±0.73①②F 值 45.291 144.175 62.920 31.074 P 值 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001

2.3 CHB 患者血清suPAR 水平與肝纖維化分期相關(guān)性的分析

Pearson 相關(guān)性分析結(jié)果顯示，CHB 患者血清suPAR 水平與血清YKL-40、TGF-β1水平及肝纖維化分期呈正相關(guān)性（r ＞0，P＜0.05），與血清PCPE-1 水平呈負(fù)相關(guān)性（r ＜0，P＜0.05）。見(jiàn)表3。

表3 CHB 患者血清suPAR 水平與肝纖維化分期相關(guān)性的分析

3 討論

肝纖維化是肝細(xì)胞對(duì)HBV 感染、毒性損傷及自身免疫等引起的肝臟慢性損害產(chǎn)生的修復(fù)反應(yīng)，可造成肝臟內(nèi)細(xì)胞外基質(zhì)慢性沉積；纖維化是相關(guān)疾病進(jìn)展至肝硬化的必經(jīng)階段，也是醫(yī)生確定CHB 患者治療方案及判斷其預(yù)后的重要依據(jù)[7]。肝活檢是判斷肝纖維化程度的“金標(biāo)準(zhǔn)”，但其存在創(chuàng)傷性大、取樣誤差大、需反復(fù)取樣、費(fèi)用高等缺點(diǎn)，患者對(duì)其認(rèn)可度較低[8-9]。近年來(lái)，血清suPAR 作為新型血清標(biāo)志物備受關(guān)注，尤其是在感染性疾病嚴(yán)重程度及預(yù)后的預(yù)測(cè)方面。有研究表明，血清suPAR 能夠用于感染性疾病的早期診斷，也可用于預(yù)測(cè)感染性疾病的不良預(yù)后，其表達(dá)水平與肝纖維化的嚴(yán)重程度密切相關(guān)，也是肝病患者死亡及肝臟移植的重要預(yù)測(cè)指標(biāo)[10]。楊鳳等[11]研究發(fā)現(xiàn)，HBV 相關(guān)性慢加急性肝衰竭（acuteon-chronic liver failure，ACLF）患者的血清suPAR表達(dá)水平與其肝臟炎癥及肝纖維化程度有關(guān)，其血清suPAR 的表達(dá)水平隨著病情加重逐漸升高。楊紅梅等[12]的研究表明，suPAR 與CHB-ACLF 患者的病情進(jìn)展密切相關(guān)，對(duì)患者近期預(yù)后具有較高的預(yù)測(cè)價(jià)值。本研究的結(jié)果顯示，CHB 組患者的血清YKL-40、TGF-β1、suPAR 水平顯著高于健康人群，PCPE-1水平顯著低于健康人群，且隨著CHB 患者肝纖維化的加重，其血清YKL-40、TGF-β1、suPAR 水平表現(xiàn)出不同程度的升高，PCPE-1 水平表現(xiàn)出不同程度的降低。筆者進(jìn)一步進(jìn)行Pearson 相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，CHB 患者血清suPAR 水平與血清YKL-40、TGF-β1水平及肝纖維化分期呈正相關(guān)性（r ＞0，P＜0.05），與血清PCPE-1 水平呈負(fù)相關(guān)性（r ＜0，P＜0.05）。這與上述學(xué)者的研究結(jié)果相似。suPAR 是細(xì)胞膜表面尿激酶型纖溶酶原激活物受體脫落在外周血中形成的產(chǎn)物，可參與到機(jī)體的多種病理生理過(guò)程中，可反映機(jī)體炎癥狀態(tài)及相關(guān)疾病的嚴(yán)重程度。從本研究可知，與健康人群相比，CHB 患者的血清suPAR 水平出現(xiàn)異常升高趨勢(shì)，且隨著肝纖維化加重其表達(dá)水平逐漸升高，說(shuō)明CHB 患者的血清suPAR 水平與肝纖維化進(jìn)展具有高度相關(guān)性，但相關(guān)具體機(jī)制仍不明確，尚需進(jìn)一步研究。

綜上所述，CHB 患者的血清suPAR 水平與肝纖維化進(jìn)展密切相關(guān)，血清suPAR 水平升高提示CHB患者的肝纖維化加重。血清suPAR 可作為評(píng)估CHB患者肝纖維化進(jìn)程的有效生物學(xué)標(biāo)記物，檢測(cè)此指標(biāo)可為后期疾病治療方案的擬定及病情轉(zhuǎn)歸預(yù)測(cè)提供參考依據(jù)。