全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀報(bào)警值系統(tǒng)對(duì)血常規(guī)復(fù)片工作的影響

劉子暉，王自春，范耀方

四川省營(yíng)山縣人民醫(yī)院 （四川營(yíng)山 637700）

血常規(guī)作為最普及的檢驗(yàn)項(xiàng)目，能為臨床提供極為廣泛的診療線索。臨床工作中保證檢驗(yàn)質(zhì)量除了加強(qiáng)對(duì)質(zhì)控、結(jié)果數(shù)據(jù)的審核，血細(xì)胞形態(tài)的把控，還應(yīng)對(duì)散點(diǎn)圖、儀器和試劑的性能進(jìn)行全面掌握。全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀在標(biāo)本檢測(cè)過(guò)程中除了可進(jìn)行各類細(xì)胞的計(jì)數(shù)，還可根據(jù)獲取的光電學(xué)信號(hào)，生成直方圖與散點(diǎn)圖，運(yùn)用儀器自身軟件的算法對(duì)細(xì)胞形態(tài)等相關(guān)信息進(jìn)行提示，并生成一個(gè)具體數(shù)值，當(dāng)該數(shù)值超過(guò)設(shè)定數(shù)值時(shí)儀器認(rèn)為對(duì)應(yīng)的異常信息可信度較高。不同品牌全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀的報(bào)警值系統(tǒng)對(duì)應(yīng)的報(bào)警信息大致相同，但報(bào)警值系統(tǒng)名稱可能存在差異，如希森美康部分機(jī)型為Q-flag 值[1-2]，邁瑞部分機(jī)型為flag 值，該值可理解為儀器認(rèn)為特定形態(tài)學(xué)異常的概率大小。我院實(shí)驗(yàn)室全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀型號(hào)為邁克F810，提供與血細(xì)胞形態(tài)相關(guān)的報(bào)警信息如下：原始/異常淋巴細(xì)胞，核左移，不典型淋巴細(xì)胞，紅細(xì)胞碎片，血小板聚集，鐵缺乏，紅細(xì)胞凝集。當(dāng)全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀出現(xiàn)報(bào)警值大于100 時(shí)，儀器認(rèn)為該類報(bào)警提示的可信程度較高，會(huì)在結(jié)果主屏上進(jìn)行陽(yáng)性提示。隨著血細(xì)胞分析儀的自動(dòng)化程度越來(lái)越高，血細(xì)胞計(jì)數(shù)+推染片+自動(dòng)審核系統(tǒng)也越來(lái)越普及，研究更多有價(jià)值的參數(shù)對(duì)實(shí)驗(yàn)室制訂更合理的自動(dòng)審核規(guī)則顯得尤為重要。本研究旨在通過(guò)探索我院實(shí)驗(yàn)室邁克F810 的報(bào)警值與顯微鏡鏡檢的符合率，評(píng)價(jià)血細(xì)胞分析儀報(bào)警值系統(tǒng)在特定形態(tài)異常時(shí)的預(yù)測(cè)價(jià)值，以及利用報(bào)警值指導(dǎo)血常規(guī)的復(fù)片工作效果，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2022 年2 月15 日至3 月16 日我院實(shí)驗(yàn)室采用邁克F810 全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀檢測(cè)標(biāo)本6 257 例，對(duì)有報(bào)警提示（原始細(xì)胞/異常淋巴細(xì)胞、核左移、異型淋巴細(xì)胞、紅細(xì)胞碎片、血小板聚集、缺鐵貧）的標(biāo)本487 例，報(bào)警條數(shù)612 條進(jìn)行人工鏡檢，并將報(bào)警值按100～200 區(qū)間和201～300 區(qū)間分組進(jìn)行對(duì)比，其中，紅細(xì)胞凝集報(bào)警數(shù)量過(guò)少，未納入統(tǒng)計(jì)。隨機(jī)收集同期100 例未出現(xiàn)報(bào)警提示的標(biāo)本作為對(duì)照組進(jìn)行人工鏡檢，記錄鏡檢結(jié)果。

1.2 儀器設(shè)備和試劑

全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀（邁克生物，F(xiàn)810 型），試劑為邁克F810 適配的稀釋液、溶血?jiǎng)┘盁晒馊疽?。瑞氏染液為珠海貝索生物提供。顯微鏡型號(hào)為OlympusBX43 雙筒顯微鏡。采血管為二胺四乙酸二鉀（EDTA-K2）真空抗凝管。

1.3 方法

選擇室內(nèi)質(zhì)控在控、測(cè)定過(guò)程中儀器未出現(xiàn)故障的標(biāo)本作為篩選的基本條件。觀察此類標(biāo)本中原始細(xì)胞/異常淋巴細(xì)胞、核左移、異型淋巴細(xì)胞、紅細(xì)胞碎片、血小板聚集、缺鐵貧6 項(xiàng)參數(shù)中的報(bào)警值，并篩選出報(bào)警值超過(guò)100 的標(biāo)本作為陽(yáng)性標(biāo)本，在儀器檢測(cè)后不超過(guò)4 h 內(nèi)進(jìn)行涂片染色鏡檢[3]；并且隨機(jī)抽取同期100 例報(bào)警值小于100 的標(biāo)本作為陰性標(biāo)本進(jìn)行涂片染色鏡檢，鏡檢陰性標(biāo)本時(shí)對(duì)6 項(xiàng)報(bào)警提示均進(jìn)行檢查。

嚴(yán)格遵照第四版《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》[4]進(jìn)行瑞氏染色，顯微鏡鏡檢由主管檢驗(yàn)師以上或有骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)專項(xiàng)進(jìn)修經(jīng)歷的專業(yè)技術(shù)人員完成，并嚴(yán)格按《臨床血液學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)》[5]要求進(jìn)行判定。鏡檢陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)[6-9]：原始細(xì)胞/異常淋巴細(xì)胞，外周血原始細(xì)胞、幼稚淋巴細(xì)胞、淋巴瘤細(xì)胞大于1%判為鏡檢陽(yáng)性；異型淋巴細(xì)胞，反應(yīng)性淋巴細(xì)胞大于3%判為鏡檢陽(yáng)性；紅細(xì)胞碎片，紅細(xì)胞碎片大于1%；血小板聚集，3 顆以上血小板黏附聚集，并且能在其他視野重現(xiàn)判為陽(yáng)性；核左移，桿狀粒細(xì)胞＆gt;5%判為陽(yáng)性；缺鐵貧，紅細(xì)胞大小相差1 倍以上且中心淡染區(qū)超過(guò)1/3 判為陽(yáng)性。

1.4 觀察指標(biāo)

統(tǒng)計(jì)相關(guān)報(bào)警信息與鏡檢標(biāo)準(zhǔn)的符合率，并分析不同報(bào)警值區(qū)間各類報(bào)警信息與鏡檢結(jié)果的符合率。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 26.0 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理與分析，計(jì)數(shù)資料以率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，P＆lt;0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各類報(bào)警信息的符合率的評(píng)價(jià)

報(bào)警率最高的為血小板聚集（2.3%），最低的為核左移（0.9%），符合率最高的為核左移（89.3%），最低的為原始/異常淋巴細(xì)胞（2.5%），見(jiàn)表1。

表1 各類報(bào)警的儀器報(bào)警情況及陽(yáng)性符合率

2.2 不同報(bào)警值區(qū)間差異性評(píng)價(jià)

原始/異常淋巴細(xì)胞報(bào)警由于僅有3 例且報(bào)警值均為300，不進(jìn)行比較；紅細(xì)胞碎片和核左移報(bào)警值在100～200 區(qū)間與201～300 區(qū)間的陽(yáng)性符合率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＆lt;0.05），缺鐵貧、異型淋巴細(xì)胞、血小板聚集報(bào)警值在100～200 區(qū)間與201～300 區(qū)間的陽(yáng)性符合率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＆gt;0.05），見(jiàn)表2。

表2 不同報(bào)警值鏡檢陽(yáng)性符合率比較[例（%）]

2.3 對(duì)照組標(biāo)本的鏡檢結(jié)果統(tǒng)計(jì)

對(duì)報(bào)警值小于100 的100 例標(biāo)本進(jìn)行鏡檢后發(fā)現(xiàn)，97 例未達(dá)到本次研究的陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)，2 例出現(xiàn)血小板聚集，1 例出現(xiàn)紅細(xì)胞碎片。

2.4 各類報(bào)警值對(duì)相應(yīng)形態(tài)變化的預(yù)測(cè)價(jià)值分析

原始/異常淋巴細(xì)胞的截?cái)嘀得黠@高于儀器設(shè)定的閾值為280，閾值較低的是核左移為95，低于儀器設(shè)定的閾值；診斷效率最高的為核左移，診斷效率相對(duì)偏低的為異型淋巴細(xì)胞，見(jiàn)表3。

表3 各報(bào)警值的預(yù)測(cè)效能分析

3 討論

隨著醫(yī)療技術(shù)的發(fā)展和進(jìn)步，全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀不僅具有較高的精密度和準(zhǔn)確度，還可提供更多參數(shù)供實(shí)驗(yàn)室人員參考，極大地減輕了實(shí)驗(yàn)室人員的勞動(dòng)強(qiáng)度。目前，主流儀器的檢測(cè)原理有電阻抗原理、流式細(xì)胞術(shù)、化學(xué)染色、熒光化學(xué)染色，部分品牌還有熒光單克隆抗體染色技術(shù)。血細(xì)胞分析儀在檢測(cè)過(guò)程中主要獲取樣本的物理信息有體積、電導(dǎo)率、3 種中角度散射光的測(cè)量值（中角光散射、下中角光散射和上中角光散射提供有關(guān)粒度和膜表面的信息），軸向光損失測(cè)量值（分析細(xì)胞透明度）、低角度光散射值（分析細(xì)胞復(fù)雜性指標(biāo)）[10-11]。報(bào)警值系統(tǒng)產(chǎn)生的數(shù)值就是基于檢測(cè)過(guò)程中獲取的相應(yīng)信息，并通過(guò)自身算法分析得出，且報(bào)警值所提示的報(bào)警信息均可通過(guò)顯微鏡鏡檢進(jìn)行確認(rèn)。因此，通過(guò)與人工顯微鏡鏡檢進(jìn)行比對(duì)可以看出該血細(xì)胞分析儀報(bào)警值這一參數(shù)在臨床實(shí)際工作中的使用價(jià)值[12]。

我院實(shí)驗(yàn)室邁克F810 的主要原理包括：（1）采用鞘流電阻抗法對(duì)血細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)；（2）激光流式細(xì)胞術(shù)和熒光化學(xué)染色技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞及其他生物顆粒的物理性質(zhì)。該儀器根據(jù)獲取的信號(hào)參數(shù)和軟件算法輸出各類細(xì)胞的計(jì)數(shù)結(jié)果和研究參數(shù)，由于各通道對(duì)血細(xì)胞的計(jì)數(shù)原理不同，同一項(xiàng)目可能會(huì)在儀器計(jì)數(shù)時(shí)出現(xiàn)兩種不同結(jié)果，當(dāng)差距明顯時(shí)通常提示檢測(cè)中存在異常，可能是標(biāo)本中含有異常成分增高導(dǎo)致通道溶血效率下降，也可能是由異常血細(xì)胞成分而導(dǎo)致的[13]，如紅細(xì)胞及血小板的檢測(cè)會(huì)通過(guò)兩種不同方式給出檢測(cè)結(jié)果，一是RBC/PLT通道直接測(cè)量對(duì)應(yīng)電脈沖個(gè)數(shù)所得，該通道的特點(diǎn)是考察的粒子數(shù)量巨大，在標(biāo)本無(wú)干擾的情況下其結(jié)果更可靠，更穩(wěn)定；二是網(wǎng)織紅通道檢測(cè)時(shí)，F(xiàn)CR 通道除了將網(wǎng)織紅細(xì)胞劃分為L(zhǎng)FR、MFR、HFR，還能計(jì)算成熟紅細(xì)胞區(qū)域、血小板區(qū)域的粒子數(shù)量，從而獲得該通道的RBC-O 和PLT-O 的計(jì)數(shù)結(jié)果，該通道的結(jié)果對(duì)異常細(xì)胞及異常標(biāo)本的快速識(shí)別有著重要意義[14-16]。

儀器報(bào)警值研究界面輸出的具體報(bào)警數(shù)值，一方面是和細(xì)胞形態(tài)密切相關(guān)，另一方面數(shù)值越大往往提示異常細(xì)胞或異常形態(tài)真實(shí)性越高[17-18]。本研究中通過(guò)對(duì)邁克F810 報(bào)警值（原始/異常淋巴細(xì)胞、核左移、異型淋巴細(xì)胞、紅細(xì)胞碎片、血小板聚集、缺鐵貧）的研究發(fā)現(xiàn)，報(bào)警值提示系統(tǒng)出現(xiàn)以下特點(diǎn)：（1）對(duì)原始細(xì)胞/異常淋巴細(xì)胞這一報(bào)警，鏡檢外周血查見(jiàn)原始細(xì)胞的病例儀器提示的報(bào)警值均為300（增大研究樣本可能存在不同結(jié)論）；原始細(xì)胞/異常淋巴細(xì)胞報(bào)警信息和異型淋巴細(xì)胞報(bào)警信息易同時(shí)出現(xiàn)，可能是這兩個(gè)報(bào)警值取決于FCD 散點(diǎn)圖上儀器指定的原始細(xì)胞區(qū)域/異型淋巴細(xì)胞區(qū)域粒子數(shù)量的多少，而在散點(diǎn)圖中熒光強(qiáng)度和散射光強(qiáng)度不能精準(zhǔn)地分開(kāi)原始細(xì)胞和異形淋巴細(xì)胞區(qū)域，兩種報(bào)警在散點(diǎn)圖上的位置有共性，因而導(dǎo)致兩種報(bào)警同時(shí)出現(xiàn)[19]；（2）分析報(bào)警值的大小發(fā)現(xiàn)，異型淋巴細(xì)胞大于200 報(bào)警值的陽(yáng)性率僅稍高于100～200 報(bào)警值，不同區(qū)間的陽(yáng)性符合率無(wú)顯著性差異，這可能與此次研究陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)為查見(jiàn)大于3%的異型淋巴細(xì)胞即判為鏡檢陽(yáng)性相關(guān)[20]，另外，與散點(diǎn)圖上異型淋巴細(xì)胞預(yù)設(shè)定區(qū)域也有關(guān)系，異型淋巴細(xì)胞預(yù)設(shè)定區(qū)域粒子的物理性質(zhì)為熒光強(qiáng)度較高，側(cè)向散射光信號(hào)明顯較大，這些特性決定了落在該區(qū)域并觸發(fā)報(bào)警的粒子除了異型淋巴細(xì)胞外，其他均是一些胞體偏大、胞漿偏多的淋巴瘤細(xì)胞，而外周血異型淋巴細(xì)胞出現(xiàn)的概率大于淋巴瘤細(xì)胞，所以此區(qū)域受其他細(xì)胞成分的干擾更小[21]；（3）核左移報(bào)警陽(yáng)性符合率具有較高的準(zhǔn)確性，在201～300 區(qū)間陽(yáng)性率符合率更高，低值區(qū)間的核左移鏡檢后更多的是以桿狀粒細(xì)胞的增多為主，幼稚粒細(xì)胞更多見(jiàn)于高值區(qū)間，因血常規(guī)檢測(cè)為臨床提供的形態(tài)描述報(bào)告主要應(yīng)提示原始/幼稚細(xì)胞，桿狀粒細(xì)胞增多的核左移并非必須提示項(xiàng)，針對(duì)此報(bào)警項(xiàng)，臨床工作中可以根據(jù)報(bào)警數(shù)值有傾向性選擇復(fù)片；（4）血小板聚集報(bào)警的陽(yáng)性率較高，符合率尚可，該報(bào)警陽(yáng)性率較高的原因可能是患者病情復(fù)雜，采血過(guò)程不順暢，標(biāo)本保存不正確及檢測(cè)時(shí)間過(guò)長(zhǎng)等導(dǎo)致，少數(shù)血小板聚集報(bào)警與鏡檢不符可能是存在紅細(xì)胞碎片、巨大血小板、網(wǎng)織紅細(xì)胞等干擾[22]，另外，部分標(biāo)本采用含網(wǎng)織紅模式和不含網(wǎng)織紅模式同時(shí)檢測(cè)，可發(fā)現(xiàn)該項(xiàng)報(bào)警值可能出現(xiàn)明顯差異，提示該報(bào)警值來(lái)源于多個(gè)參數(shù)；（5）紅細(xì)胞碎片報(bào)警值在不同報(bào)警值區(qū)間鏡檢符合率的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＆lt;0.05），未報(bào)警的陰性標(biāo)本偶有檢出碎片，表明該機(jī)型的紅細(xì)胞碎片報(bào)警不同報(bào)警值區(qū)間指導(dǎo)復(fù)片工作的價(jià)值不同，但也要注意漏檢的風(fēng)險(xiǎn)，大血小板及其他的有核細(xì)胞碎片，物理性質(zhì)與紅細(xì)胞碎片相似，都會(huì)干擾檢測(cè)，紅細(xì)胞碎片報(bào)警值與儀器RBC/PLT 通道檢測(cè)時(shí)對(duì)應(yīng)有形成分的數(shù)量相關(guān)，但并非完全的線性關(guān)系。

4 結(jié)論

綜上所述，邁克F810 血細(xì)胞分析儀的可疑報(bào)警提示大多是和血細(xì)胞形態(tài)相關(guān)，對(duì)指導(dǎo)復(fù)片鏡檢有一定的臨床意義。目前，我院實(shí)驗(yàn)室的復(fù)片工作除了根據(jù)血常規(guī)各項(xiàng)目數(shù)值制訂的復(fù)檢規(guī)則，還采用了報(bào)警值系統(tǒng)的以下4 個(gè)方面：（1）原始細(xì)胞/異常淋巴細(xì)胞報(bào)警值大于280；（2）異型淋巴細(xì)胞報(bào)警值大于110；（3）紅細(xì)胞碎片報(bào)警值大于120；（4）儀器出現(xiàn)缺鐵貧、核左移和血小板聚集報(bào)警需結(jié)合血常規(guī)結(jié)果決定是否復(fù)片。上述4 條額外的復(fù)片規(guī)則的制訂，一方面是根據(jù)實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)驗(yàn)證而來(lái)的截?cái)嘀担硪环矫婵紤]到原始細(xì)胞/異常淋巴細(xì)胞、異型淋巴細(xì)胞、紅細(xì)胞碎片在臨床實(shí)際工作中提示白血病、EB病毒感染、血栓性血小板減少性紫癜等疾病中有很大的提示意義，而缺鐵貧、核左移和血小板聚集在截?cái)嘀狄陨嫌休^高的敏感度和特異度，多種疾病和標(biāo)本采集保存的因素也容易導(dǎo)致相應(yīng)的形態(tài)學(xué)改變[23-25]。因此，各實(shí)驗(yàn)室可根據(jù)自身日常工作積累，并根據(jù)積累結(jié)果，利用報(bào)警值這一研究參數(shù)制訂適合自己實(shí)驗(yàn)室的特色復(fù)檢規(guī)則，從而達(dá)到事半功倍的效果。