急性腦梗死病人血清Sestrin2、PTX3水平及其與病情嚴重程度和預后的關系

田 琪

急性腦梗死是指各種原因引起冠狀動脈粥樣硬化或斑塊破裂繼發血栓，使血管管腔狹窄或堵塞，導致腦組織缺血、缺氧壞死的腦血管疾病，病人常伴有不同程度的神經功能缺損[1]。該病具有發病急驟、病情兇險、致殘率和致死率高、預后差等特點[2]。病人入院后及時確診并判斷神經功能缺損程度，對輔助臨床制定個體化治療方案具有重要價值，同時早期預測有利于臨床醫師及早采取干預措施改善病人預后。頭顱CT或MRI及腦血管造影等影像學檢查是臨床診斷急性腦梗死及評估病情嚴重程度的常見手段，但其方法有創、費用高昂。應激誘導蛋白2(Sestrin2)是在缺血缺氧、氧化應激等情況下誘導產生的抗氧化蛋白，可減輕缺血再灌注損傷所致的氧化應激反應，發揮保護神經功能的作用[3]。有研究顯示，Sestrin2過表達可減輕神經元損傷，改善神經功能缺損[4]。正五聚蛋白3(pentraxin 3，PTX3)是在炎性細胞因子刺激下的單核巨噬細胞、血管內皮細胞、成纖維細胞等合成并釋放的急性期反應蛋白，可反映血管炎癥程度[5]。有研究顯示，PTX3通過調控炎癥反應參與腦梗死發病過程，且與病情嚴重程度有關[6]。關于Sestrin2、PTX3聯合檢測在急性腦梗死發病過程中作用的相關研究較少。本研究通過檢測血清Sestrin2、PTX3水平，旨在探討其在急性腦梗死發病中與神經功能缺損程度及預后的關系。現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2018年1月—2020年8月我院收治的145例急性腦梗死病人為病例組，納入標準：所有病人均經頭顱CT、血管造影等檢查證實為急性腦梗死，符合《中國急性缺血性腦卒中診治指南2018》[7]診斷標準；病人首次發病，且發病至入院時間<24 h；年齡>18歲；臨床病歷資料完整；出院后隨訪時間≥3個月。排除標準：孕產婦及哺乳期女性；心臟功能不全及肝、腎功能障礙；近期有腦部外傷史；腦出血、短暫性腦缺血發作病人；合并其他嚴重感染性疾病或自身免疫性疾病病人；惡性腫瘤病人；精神疾病病人。并于同期隨機選取60名年齡、性別與急性腦梗死病人相近的體檢者作為對照組，對照組無外傷史、無基礎疾病史、無腦梗死病史，各項檢測指標均在參考值范圍內。兩組一般資料比較，差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。詳見表1。本研究獲得醫院倫理委員會批準，病人或家屬均簽署知情同意書。

表1 兩組一般資料比較

1.2 分組 采用美國國立衛生研究院卒中量表(NIHSS)[8]對病人入院24 h內的神經功能缺損程度進行評分，根據病情嚴重程度分為輕度組(NIHSS評分≤3分，59例)、中度組(NIHSS評分4～15分，50例)、重度組(NIHSS評分≥16分，36例)。病人出院后90 d，采用改良Rankin量表(mRS)[9]對病人預后情況進行評分，并根據預后分為預后良好組(mRS評分0～2分，102例)、預后不良組(mRS評分3～5分，43例)。

1.3 方法 于入院后次日清晨采集急性腦梗死病人空腹肘靜脈血5 mL，體檢者于體檢當日抽取空腹肘靜脈血5 mL，將血液標本置于含抗凝劑的試管中室溫下靜置1 h，以3 000 r/min離心10 min，離心半徑10 cm，留取血清在-80 ℃冰箱中保存。采用酶聯免疫吸附法檢測血清Sestrin2、PTX3水平，其中Sestrin2檢測試劑盒購自上海江萊生物科技有限公司，PTX3檢測試劑盒購自卡邁舒(上海)生物科技有限公司。檢測過程嚴格按照試劑盒相關說明進行。

1.4 隨訪 病人出院后采用門診和電話的方式對病人進行隨訪，隨訪內容主要包括CT、MRI等影像學檢查，隨訪時間至少3個月，隨訪終點為病人再次入院治療或死亡。

2 結 果

2.1 病例組與對照組血清Sestrin2、PTX3水平比較 病例組血清Sestrin2、PTX3水平高于對照組，差異有統計學意義(P<0.001)。詳見表2。

表2 病例組與對照組血清Sestrin2、PTX3水平比較(±s)

2.2 不同神經功能缺損程度急性腦梗死病人血清Sestrin2、PTX3水平比較 不同神經功能缺損程度急性腦梗死病人血清Sestrin2、PTX3水平比較，差異有統計學意義(P<0.001)；重度組和中度組血清Sestrin2、PTX3水平高于輕度組，重度組血清Sestrin2、PTX3水平高于中度組，差異均有統計學意義(P<0.05)。詳見表3。

表3 不同神經功能缺損程度病人血清Sestrin2、PTX3水平比較(±s)

2.3 不同預后急性腦梗死病人血清Sestrin2、PTX3水平比較 預后不良組血清Sestrin2、PTX3水平高于預后良好組，差異有統計學意義(P<0.001)。詳見表4。

表4 比較不同預后急性腦梗死病人血清Sestrin2、PTX3水平(±s)

2.4 急性腦梗死病人血清Sestrin2、PTX3與NIHSS評分、mRS評分的相關性 Pearson積矩相關分析結果顯示，急性腦梗死病人血清Sestrin2、PTX3與NIHSS評分呈正相關(r值分別為0.671，0.625，P<0.05)，與mRS評分呈正相關(r值分別為0.653，0.612，P<0.05)。

2.5 血清Sestrin2、PTX3對急性腦梗死病人預后不良的預測價值 繪制ROC曲線評估血清Sestrin2、PTX3對急性腦梗死病人出院后90 d預后不良的預測價值。結果顯示，Sestrin2預測預后不良的ROC曲線下面積(AUC)為0.839[95%CI(0.801，0.873)]，截斷值為12.90 ng/mL，約登指數為0.64，靈敏度為0.87，特異度為0.77；PTX3預測預后不良的AUC為0.832[95%CI(0.795，0.869)]，截斷值為3.24 μg/L，約登指數為0.58，靈敏度為0.82，特異度為0.76；Sestrin2聯合PTX3預測預后不良的AUC為0.925[95%CI(0.872，0.951)]，靈敏度為0.96，特異度為0.90。詳見圖1。

圖1 血清Sestrin2、PTX3預測急性腦梗死病人預后不良的ROC曲線圖

3 討 論

急性腦梗死是臨床常見的腦卒中類型，溶栓療法是治療的主要措施，但溶栓治療可能增加病人顱內出血風險，使閉塞血管在血流灌注恢復時出現缺血再灌注損傷[10]。有研究顯示，發病后3個月內急性腦梗死病人致殘率約為35%，病死率約為10%，嚴重威脅病人的健康和生命質量[11]。入院后采取有效手段及時評估病人病情嚴重程度及預測預后，對早期制定針對性治療措施提高臨床療效，并改善預后具有重要意義。有研究表明，頸動脈粥樣硬化斑塊形成是急性腦梗死重要的病理基礎，氧化應激反應、血管炎癥反應及脂質代謝紊亂貫穿頸動脈粥樣硬化斑塊形成的整個過程[12]。因此，尋找反映血管炎癥及脂質代謝紊亂的血清學標志物可輔助判斷急性腦梗死病情。

Sestrins是高度保守的應激誘導蛋白，具有修復細胞和消除各種損傷所致有毒代謝物的功能。Sestrin2屬Sestrins家族成員，主要存在于細胞核的1p35.3染色體上，當機體出現缺血缺氧、氧化應激及DNA損傷等應急刺激時其表達水平顯著升高。汪鵬等[4]研究表明，Sestrin2在缺血性腦損傷組織中表達上調，并通過誘使血管內皮生長因子表達促進腦缺血區域微血管再生，進而減輕神經元損傷，改善神經功能缺損。張金枝等[13]研究發現，Sestrin2通過激活N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受體信號傳導神經元突觸活性，進而發揮抗氧化活性作用，保護神經元損傷。另有研究顯示，Sestrin2沉默通過抑制線粒體生物合成引起其生物活性下降，進而阻斷腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/過氧化物酶體增殖物激活受體-γ共激活因子-1α(PGC-1α)通路，加重大鼠腦損傷，增加腦梗死風險[14]。本研究結果顯示，急性腦梗死病人血清Sestrin2水平較體檢者升高，提示其可能參與了急性腦梗死發病過程，推測其發病機制可能是因為Sestrin2是活性氧產生的抗氧化防御活性物質，急性腦梗死發生時產生的氧化應激反應活化并促使缺氧誘導因子1α(HIF-1α)大量合成，進一步導致腦神經嚴重損傷，為保護神經損傷，機體的代償性機制通過上調Sestrin2表達以縮小梗死面積，減少腦損傷[15]。同時本研究結果顯示，隨著神經功能缺損程度加重，急性腦梗死病人血清Sestrin2水平逐漸升高，相關性分析顯示，Sestrin2與NIHSS評分呈正相關，表明血清Sestrin2可作為臨床輔助評估神經功能缺損嚴重程度的生化指標。可能是由于急性腦梗死病情越嚴重，氧化應激反應越嚴重，抗氧化應激反應越劇烈，血清Sestrin2水平越高。

PTX3位于人體第3q25染色體上，具有核轉錄因子-κB(NF-κB)、激活蛋白-1等增強子結合位點，是反映局部動脈壁損傷后炎癥反應的重要指標。有研究顯示，巨噬細胞、內皮細胞、血管平滑肌細胞在白細胞介素-6(IL-6)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)等促炎因子刺激下釋放大量PTX3，參與炎癥反應過程[16]。PTX3通過誘導氧化低密度脂蛋白表達，增強炎癥反應，進而促使動脈粥樣硬化斑塊進程[17]。Zhou等[18]研究發現，PTX3參與急性腦梗死病人頸動脈粥樣硬化斑塊形成，其主要機制是通過抑制血管內促纖維細胞因子釋放，加速斑塊纖維壁變薄，誘導血液呈高凝狀態，形成粥樣硬化斑塊。本研究結果顯示，急性腦梗死病人血清PTX3水平高于體檢者，PTX3可能通過以下機制參與急性腦梗死發病過程[19]：①PTX3特異性結合成纖維細胞生長因子-2促進血管平滑肌細胞遷移和增殖，降低血小板穩定性，最終導致血栓形成；②PTX3通過引起脂代謝紊亂和血液高凝狀態擴大炎癥反應，并加重血管內皮細胞發生炎癥損傷，促進斑塊形成及破裂。同時本研究結果顯示，PTX3隨著神經功能缺損程度加重而升高，PTX3與NIHSS評分呈正相關，表明PTX3可作為反映急性腦梗死病情嚴重程度的指標，神經功能缺損程度越重，病人炎癥反應越劇烈，損傷應激調節PTX3水平急劇升高。

對出院后90 d的急性腦梗死病人隨訪發現，預后不良組血清Sestrin2、PTX3水平高于預后良好組，且與預后評估指標mRS呈正相關，表明血清Sestrin2、PTX3與急性腦梗死病人預后密切相關，其水平越高提示病人病情越嚴重，預后越差。繪制的ROC曲線結果顯示，血清Sestrin2、PTX3對急性腦梗死病人不良預后具有預測價值，Sestrin2預測預后不良的AUC為0.839[95%CI(0.801，0.873)]，靈敏度為0.87，特異度為0.77；PTX3預測預后不良的AUC為0.832[95%CI(0.795，0.869)]，靈敏度為0.82，特異度為0.76；Sestrin2聯合PTX3預測預后不良的AUC為0.925[95%CI(0.872，0.951)]，靈敏度為0.96，特異度為0.90。上述結果表明早期檢測血清Sestrin2、PTX3可預測急性腦梗死病人短期預后，且聯合檢測預測價值更高。

綜上所述，急性腦梗死病人血清Sestrin2、PTX3表達上調，且與神經功能缺損嚴重程度及預后密切相關，早期聯合檢測可輔助判斷病情嚴重性及預測預后。