膚爾康膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提升研究

張恩 潘泰 周小波

基金項(xiàng)目：

貴州省中醫(yī)藥管理局項(xiàng)目［QZYY-2021-175］；紅花崗區(qū)科技局項(xiàng)目［遵紅科合社字（2019）22號(hào)］。

作者簡(jiǎn)介：

張恩（1991—），男，漢族，碩士，主管中藥師，研究方向?yàn)獒t(yī)院制劑研發(fā)。E-mail：781302656@qq.com

通信作者：

【摘? 要】

目的： 提高膚爾康膠囊的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，保證制劑的安全性和有效性。方法： 從定性、定量?jī)煞矫孢M(jìn)行研究，用薄層色譜法（TLC）對(duì)膚爾康膠囊中苦參、白芷、牡丹皮三味中藥進(jìn)行定性鑒別；用高效液相色譜法（HPLC）測(cè)定膚爾康膠囊中綠原酸的含量。結(jié)果：苦參、白芷、牡丹皮的薄層色譜斑點(diǎn)清晰，分離效果較好、無(wú)陰性干擾；綠原酸的質(zhì)量濃度在0～120μg/mL范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系（r=0.9994）；精密度、穩(wěn)定性、重復(fù)性試驗(yàn)的RSD均≤1.2%；平均加樣回收率為98.1%，RSD=1.3%（n=6）。結(jié)論：建立的方法有較強(qiáng)的專屬性及穩(wěn)定性，可用于膚爾康膠囊的質(zhì)量控制。

【關(guān)鍵詞】

膚爾康膠囊；質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；薄層色譜法；高效液相色譜法

【中圖分類號(hào)】R286.0??? 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A??? 【文章編號(hào)】1007-8517（2023）24-0046-04

DOI：10.3969/j.issn.1007-8517.2023.24.zgmzmjyyzz202324010

Study on Quality Control of Fuerkang Capsules

ZHANG En? PAN Tai? ZHOU Xiaobo

Zunyi Hospital of Traditional Chinese Medicine， Zunyi 563000，China

Abstract：

Objective Improve the quality standard of Fuerkang capsules to ensure the safety and effectiveness of the hospital pharmaceutica. Methods From the qualitative and quantitative analysis， TLC（thin layer chromatography） was used to identify Sophorae Flavescentis Radix， Angelicae Dahuricae Radix and Moutan Cortex in Fuerkang capsules; The content of Chlorogenic acid in Fuerkang capsules was determined by HPLC （high performance liquid chromatography）. Results The TLC spots of Sophora Flavescentis Radix， Angelicae Dahuricae Radix and Moutan Cortex peel were clear， with good separation effect and without negative interference; The mass concentration of Chlorogenic acid showed good linear relationship in the range of 0～120μg/mL （r=0.9994）; RSDS of precision， stability and reproducibility tests were all lower than 1.2%. The average recovery was 98.1%， RSDS=1.3%（n=6）. Conclusion The established method has well specificity and stability， and can be used for the quality control of Fuerkang Capsules.

Keywords：

Fuerkang Capsules; Quality Standard; TLC；HPLC

膚爾康膠囊（批準(zhǔn)文號(hào)：黔藥制字Z20030347）是遵義市中醫(yī)院自行研發(fā)的醫(yī)院制劑，處方由金銀花、苦參、白芷、牡丹皮、生地黃等藥物組成，具有清熱涼血、祛風(fēng)止癢的功效，主治尋常型銀屑病、慢性蕁麻疹、老年性皮膚瘙癢等［1-2］。該制劑是我院皮膚科常用專科用藥，在臨床使用中有顯著療效、無(wú)不良反應(yīng)，但該制劑原質(zhì)量檢測(cè)項(xiàng)目?jī)H為膠囊劑的常規(guī)檢查項(xiàng)，缺乏系統(tǒng)的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，質(zhì)量安全性難以有效控制。為較好地控制該制劑質(zhì)量，保證臨床用藥的安全性和有效性，課題組采用薄層色譜法及高效液相色譜法對(duì)膚爾康膠囊進(jìn)行定性鑒別、含量測(cè)定研究，以期建立較完善的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。

1? 儀器與材料

1.1? 儀器? 島津LC-20AD高效液相色譜儀，SPD-M20二極管陣列檢測(cè)器，LcsoLution色譜數(shù)據(jù)工作站；Diamonsil C18 （ 4.6 mm× 250 mm，5μm） 色譜柱；梅特勒EL104電子分析天平（分度值0.01mg）；SK1200H型超聲清洗器（上海科導(dǎo)超聲儀器有限公司）；HH-W600數(shù)顯三用恒溫水箱（江蘇金壇市億通電子有限公司）。

1.2? 藥品與試劑? 膚爾康膠囊（遵義市中醫(yī)院自制，樣品批號(hào)分別為210901、210902、210903）；綠原酸對(duì)照品（批號(hào)：120913-201109）、苦參對(duì)照藥材（批號(hào)：121367-200605）、白芷對(duì)照藥材（批號(hào)：121065-201406）、牡丹皮對(duì)照藥材（批號(hào)：120905-201610）均在中國(guó)食品藥品檢定研究院采購(gòu)；乙腈（德國(guó)Merck公司）為色譜純；其他試劑均為色譜純；水為自制重蒸餾水。

2? 方法與結(jié)果

2.1? 薄層色譜鑒別

2.1.1? 苦參的薄層色譜鑒別［3-4］? 取膚爾康膠囊內(nèi)容物3 g，加氨水1.0 mL，三氯甲烷20 mL，回流提取20 min，冷卻過(guò)濾，濾液蒸干，殘?jiān)尤燃淄? mL溶解作為供試品溶液。取缺苦參的膚爾康膠囊陰性樣品3 g，同法做成陰性對(duì)照溶液，另取苦參對(duì)照藥材0.1 g，三氯甲烷10 mL，同法制成對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法（《中國(guó)藥典》2020 年版四部通則0502）試驗(yàn)，吸取上述3種溶液3～4 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-氨水（8∶[KG-*3/5]1∶[KG-*3/5]0.1）為展開(kāi)劑，用濃氨試液飽和30 min，展開(kāi)，取出晾干，噴稀碘化鉍鉀試液。供試品色譜中，在與對(duì)藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性對(duì)照無(wú)干擾（如圖1 A所示 ）。

2.1.2? 白芷的薄層色譜鑒別［5-6］? 取膚爾康膠囊內(nèi)容物2 g，加乙醚20 mL，浸泡1 h，時(shí)時(shí)振搖，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)右宜嵋阴? mL溶解作為供試品溶液。另取缺白芷的膚爾康膠囊陰性樣品同法做成陰性對(duì)照溶液，取白芷對(duì)照藥材0.1 g，加乙醚10 mL，同法制成對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法（《中國(guó)藥典》2020 年版四部通則0502）試驗(yàn)，吸取上述3種溶液各3～4 μL，點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉制備的硅膠GF254薄層板上，以苯-乙酸乙酯（5∶[KG-*3/5]1）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出晾干，置紫外光燈（254 nm）下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性對(duì)照無(wú)干擾（如圖1 B所示）。

2.1.3? 牡丹皮的薄層色譜鑒別［7-8］? 取膚爾康膠囊內(nèi)容物3 g，加10 mL乙醚，密塞，震蕩10 min，濾過(guò)，濾液揮干，殘?jiān)颖? mL使溶解，作為供試品溶液。取缺牡丹皮的膚爾康膠囊陰性樣品同法做成陰性對(duì)照溶液，另取牡丹皮對(duì)照藥材0.5 g，加丙酮10 mL，同法制成作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法（《中國(guó)藥典》2020 年版四部通則0502）試驗(yàn)，分別吸取供試品溶液，陰性對(duì)照溶液各5 μL、對(duì)照藥材溶液2 μL，點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-乙酸乙酯（3∶[KG-*3/5]1）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出晾干，置紫外光燈365 nm熒光檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性對(duì)照無(wú)干擾（如圖1 C所示）。

2.2? 含量測(cè)定［9-10］

2.2.1? 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)? C18色譜柱；以乙腈-0.4%磷酸溶液（13∶[KG-*3/5]87）為流動(dòng)相；柱溫不超過(guò)20 ℃；流速為1.0 mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為327 nm。理論板數(shù)按綠原酸峰計(jì)算應(yīng)不低于8000。

2.2.2? 溶液的制備? 對(duì)照品溶液的制備：精密稱定綠原酸對(duì)照品10mg，置于10 mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容，得1mg/mL對(duì)照品溶液。

供試品溶液制備：取本品內(nèi)容物約1 g，精密稱定，置于具塞錐形瓶中，精密加入40%乙醇50 mL，稱定重量，搖勻，超聲處理（功率500 W，頻率40 kHz）30 min，放冷，再稱定重量，用40%乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，經(jīng)0.45μm濾膜濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

陰性對(duì)照溶液的制備：按處方比例稱取缺金銀花的其他藥材，按照膚爾康膠囊的制備工藝制備缺金銀花的陰性對(duì)照品，再按供試品溶液制備方法制得陰性對(duì)照溶液。

2.2.3? 專屬性試驗(yàn)? 精密吸取對(duì)照品溶液、供試品溶液及陰性對(duì)照溶液各10 μL，按“2.2.1”色譜條件進(jìn)樣測(cè)定。結(jié)果顯示，供試品色譜在與對(duì)照品色譜相應(yīng)位置上有色譜峰，而陰性對(duì)照色譜在與對(duì)照品色譜相應(yīng)位置上未出現(xiàn)色譜峰，結(jié)果表明該法無(wú)陰性干擾，專屬性強(qiáng)（如圖2 A、圖2 B、圖2 C所示）。

2.2.4? 線性關(guān)系考察? 取綠原酸對(duì)照品溶液，配置成綠原酸濃度為0μg/mL、20μg/mL、40μg/mL、60μg/mL、80μg/mL、100μg/mL、120μg/mL對(duì)照品溶液，分別精密吸取上述各濃度對(duì)照品溶液10 μL，注入液相色譜儀，測(cè)定蜂面積。以綠原酸含量為橫坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程為Y=2547.2X+20.075，r=0.9994，說(shuō)明綠原酸對(duì)照品在0～120μg/L范圍內(nèi)，峰面積值與進(jìn)樣量呈良好的線性關(guān)系。

2.2.5? 精密度試驗(yàn)? 精密吸取對(duì)照品溶液10μL，重復(fù)進(jìn)樣6次，記錄峰面積并計(jì)算RSD。結(jié)果顯示RSD為1.20%（n=6），表明儀器精密度良好。

2.2.6? 穩(wěn)定性試驗(yàn)? 精密吸取供試品溶液10 μL，分別于0 h、2 h、4 h、8 h、12 h、24 h進(jìn)樣，測(cè)定峰面積。結(jié)果顯示綠原酸RSD為0.13%（n=6），表明供試品在24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.2.7? 重復(fù)性試驗(yàn)? 按擬定的含量測(cè)定條件及方法，取同一批號(hào)樣品，平行稱取6份進(jìn)行含量測(cè)定。 結(jié)果顯示平均含量為5.8275mg/g，RSD為0.66%（n=6），表明重復(fù)性良好。

2.2.8? 加樣回收試驗(yàn)? 稱取已知含量的樣品9份，每份約0.5 g，精密稱定，精密加入一定量的綠原酸對(duì)照品，按標(biāo)準(zhǔn)正文中綠原酸含量測(cè)定方法進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算回收率，結(jié)果顯示該方法平均回收率為98.1%，RSD為1.3%，表明其回收率較好（見(jiàn)表1）。

2.2.9? 樣品含量測(cè)定? 分別稱取3批膚爾康膠囊樣品約1 g，精密稱定，置于具塞錐形瓶中，精密加40%乙醇50 mL，稱定重量，搖勻，超聲處理（功率500 W，頻率40 kHz）30 min，放冷，再稱定重量，用40%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)（0.45 μm濾膜），取續(xù)濾液，測(cè)定含量（見(jiàn)表2）。結(jié)果顯示膚爾康膠囊3個(gè)批次樣品的綠原酸平均含量為5.72mg/g，按其平均含量的80%設(shè)限，規(guī)定本品金銀花含量以綠原酸計(jì)不得少于4.6mg/g。

3? 結(jié)果與討論

特色醫(yī)療機(jī)構(gòu)制劑在醫(yī)療服務(wù)中起著十分重要的作用，其質(zhì)量的好壞關(guān)系著臨床用藥的安全性及有效性，提升醫(yī)療機(jī)構(gòu)制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)在促進(jìn)醫(yī)院科研、教學(xué)，保障用藥安全等方面有著重要意義［11-14］。膚爾康膠囊是我院使用了二十多年的院內(nèi)制劑，具有清熱涼血、祛風(fēng)止癢的功效，主治尋常型銀屑病、慢性蕁麻疹、老年性皮膚瘙癢等［1-2］，顯著的臨床療效得到廣大患者的認(rèn)可。為了進(jìn)一步規(guī)范工藝，有效控制膚爾康膠囊的質(zhì)量，發(fā)揮膚爾康膠囊在治療銀屑病、慢性蕁麻疹等頑固性皮膚病的優(yōu)勢(shì)，課題組對(duì)膚爾康膠囊的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了提升研究。

在薄層色譜研究中，課題組參考相關(guān)文獻(xiàn)對(duì)膚爾康膠囊中全部藥味進(jìn)行薄層鑒別試驗(yàn)，其中苦參、白芷、牡丹皮三味藥材斑點(diǎn)清晰，分離度較好，專屬性強(qiáng)，故選擇上述三味藥材作為膚爾康膠囊的定性鑒別指標(biāo)。在金銀花、生地黃等其他藥味的鑒別過(guò)程中，存在陰性干擾、斑點(diǎn)不清晰等因素，難以鑒別，故未納入質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中。

在建立含量測(cè)定方法時(shí)選擇了君藥金銀花中的綠原酸作為含量測(cè)定指標(biāo)，綠原酸具有保護(hù)心血管、抗菌、抗病毒、增強(qiáng)免疫力等藥理作用［15-17］，因此研究制定綠原酸含量限度對(duì)保證膚爾康膠囊的臨床療效具有重要作用。

供試品溶液制備過(guò)程中考察了提取溶劑、提取方法和提取時(shí)間，綜合考慮提取率及操作時(shí)間，選擇以40%乙醇，超聲提取30 min作為產(chǎn)品供試品溶液制備方法。在流動(dòng)相的選擇過(guò)程中，課題組參照藥典方法在其基礎(chǔ)上進(jìn)行優(yōu)化，確定以乙腈-0.4%磷酸為流動(dòng)項(xiàng)，所得色譜圖分離效果良好，解決了色譜峰拖尾的問(wèn)題。根據(jù)考察結(jié)果顯示，綠原酸含量在0～120μg/mL的范圍內(nèi)，線性回歸方程是Y=2547.2X+20.075，r=0.9994，其線性關(guān)系良好；精密度試驗(yàn)結(jié)果RSD為1.20%，穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果RSD為0.13%，重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果RSD為0.66%；回收率為98.1%，RSD為1.3%。

4? 結(jié)論

課題組建立的鑒別方法操作簡(jiǎn)便，專屬性較強(qiáng)，得到的TLC圖譜斑點(diǎn)清晰，無(wú)陰性干擾；建立的含量測(cè)定方法專屬性強(qiáng)、穩(wěn)定性、重現(xiàn)性較好，可用于膚爾康膠囊的質(zhì)量控制。該研究為膚爾康膠囊的質(zhì)量控制提供了理論基礎(chǔ)，有助于提高該制劑的穩(wěn)定性與可控性。

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（收稿日期：2023-04-03? 編輯：陶希睿）