尿素測(cè)定試劑盒國(guó)家監(jiān)督抽檢質(zhì)量分析*

高 飛，黃 杰，孫 楠，蘭華林

（1.中國(guó)食品藥品檢定研究院，北京 100050；2.重慶醫(yī)療器械質(zhì)量檢驗(yàn)中心，重慶 400714）

尿素是人體內(nèi)蛋白質(zhì)的代謝分解產(chǎn)物［1］，是客觀反映腎小球?yàn)V過(guò)率的常規(guī)檢測(cè)指標(biāo)，用于臨床評(píng)估腎功能損傷［2］。尿素測(cè)定值偏高常見(jiàn)于急性腎炎［3］、急性腎損傷［4-5］、慢性腎盂腎炎［6-7］等的臨床病變，偏低常見(jiàn)于急性肝萎縮、肝硬化和低蛋白飲食［8］等情況。目前臨床主要采用紫外- 可見(jiàn)分光光度法檢測(cè)人血清、血漿或尿液中尿素含量，輔助診斷疑似疾病［9］。但部分尿素測(cè)定試劑盒因生產(chǎn)工藝缺陷、研發(fā)體系不完善、原材料來(lái)源問(wèn)題等因素導(dǎo)致產(chǎn)品性能較差。此外，國(guó)內(nèi)大部分生產(chǎn)企業(yè)尚未形成產(chǎn)品質(zhì)量溯源體系，僅以臨床比對(duì)結(jié)果與國(guó)外產(chǎn)品相符為標(biāo)準(zhǔn)，在標(biāo)準(zhǔn)品和臨床溯源方面欠深入研究，可能導(dǎo)致臨床檢驗(yàn)結(jié)果不準(zhǔn)確或?qū)嶒?yàn)室間結(jié)果互換性較差，從而影響臨床的診斷、治療及患者的預(yù)后［10］。目前，絕大部分企業(yè)嚴(yán)格執(zhí)行了《尿素測(cè)定試劑盒（酶偶聯(lián)監(jiān)測(cè)法）》行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)［11］，其中一些企業(yè)的產(chǎn)品性能指標(biāo)高于行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，但也有產(chǎn)品質(zhì)量欠佳。為強(qiáng)化醫(yī)療器械監(jiān)管，維護(hù)市場(chǎng)秩序，促進(jìn)體外診斷試劑行業(yè)的長(zhǎng)足發(fā)展，確保產(chǎn)品安全有效和質(zhì)量可控，國(guó)家藥品監(jiān)督管理局組織了本次抽檢，筆者作為抽檢隊(duì)伍的一員，現(xiàn)將此次抽檢情況總結(jié)如下。

1 儀器與試劑

1.1 儀器

7180 型全自動(dòng)生化分析儀（日本Hitachi 公司）；UPS-B6K型純水儀（北京天創(chuàng)尚邦儀器設(shè)備有限公司）；移液器（德國(guó)Eppendorf 公司，規(guī)格為5～1 000μL）。

1.2 試劑

尿素、尿酸和總蛋白復(fù)合冰凍人血清標(biāo)準(zhǔn)品［中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)為360012 - 201601，濃度（5.68±0.17）mmol/L］；尿素測(cè)定試劑盒［抽取來(lái)自北京、上海、天津、河北、江蘇、江西、四川、貴州、山東、安徽、湖南、浙江、吉林、遼寧、廣西、福建、河南、湖北、廣東的有效樣本43 批次，其中國(guó)產(chǎn)38 批次、進(jìn)口5 批次，樣品均配套質(zhì)控品或抽樣時(shí)企業(yè)提供的工作校準(zhǔn)品或主校準(zhǔn)品］。

2 方法與結(jié)果

2.1 有效樣本分布統(tǒng)計(jì)

檢索國(guó)家藥品監(jiān)督管理局官網(wǎng)，通過(guò)關(guān)鍵詞查詢尿素測(cè)定試劑盒相關(guān)產(chǎn)品資料及數(shù)據(jù)，統(tǒng)計(jì)分析抽檢樣本的產(chǎn)品注冊(cè)證區(qū)域分布和業(yè)態(tài)分布。目前該產(chǎn)品國(guó)內(nèi)生產(chǎn)企業(yè)70 家，進(jìn)口生產(chǎn)企業(yè)5 家。43 批次有效抽樣樣本中，生產(chǎn)企業(yè)30 批次，使用單位12 批次，經(jīng)營(yíng)環(huán)節(jié)1 批次；涉及39 個(gè)注冊(cè)證。國(guó)內(nèi)產(chǎn)品注冊(cè)證區(qū)域分布見(jiàn)圖1，抽檢樣本產(chǎn)品注冊(cè)證業(yè)態(tài)分布見(jiàn)圖2。

圖1 國(guó)內(nèi)產(chǎn)品注冊(cè)證區(qū)域分布Fig.1 Regional distribution of domestic product registration certificates

圖2 抽檢樣本產(chǎn)品注冊(cè)證業(yè)態(tài)分布Fig.2 Distribution of business types of sample product registration certificates

2.2 法定檢驗(yàn)

本次檢驗(yàn)項(xiàng)目選擇了試劑空白吸光度、準(zhǔn)確度和精密度3個(gè)關(guān)鍵性能指標(biāo)，項(xiàng)目及規(guī)則信息詳見(jiàn)表1。綜合判定規(guī)則需依據(jù)以下幾點(diǎn)：1）表中任意項(xiàng)判定不合格，本次抽檢綜合結(jié)論即為不合格。2）樣本在正常檢驗(yàn)過(guò)程中不能正常使用，本次抽檢綜合結(jié)論即為不合格。3）樣本若為封閉試劑（專(zhuān)機(jī)專(zhuān)用），由企業(yè)負(fù)責(zé)儀器安裝、調(diào)試，保證儀器正常使用并出具加蓋企業(yè)公章的證明。若正常檢驗(yàn)過(guò)程中專(zhuān)用儀器不能正常使用，本次抽檢綜合結(jié)論即為不合格。4）適用的檢驗(yàn)項(xiàng)目以注冊(cè)產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)/產(chǎn)品技術(shù)要求中的規(guī)定為判定依據(jù)。5）所列檢驗(yàn)項(xiàng)目中涉及推薦性要求的不包含在本檢驗(yàn)方案中。

表1 檢驗(yàn)項(xiàng)目及規(guī)則信息Tab.1 Testing items and rules information

試劑空白吸光度：該檢測(cè)項(xiàng)目有效樣本數(shù)為42 批次（1 批次產(chǎn)品技術(shù)要求未規(guī)定該性能指標(biāo)）。其反應(yīng)為降反應(yīng)，應(yīng)不小于1.0，結(jié)果均符合，其中空白吸光度不小于1.5的有36批次（85.71%），不小于2.0的有4批次（9.52%）。詳見(jiàn)圖3。

圖3 試劑空白吸光度檢測(cè)結(jié)果分布Fig.3 Results of the blank absorbance test

準(zhǔn)確度：該檢測(cè)項(xiàng)目有效樣本數(shù)為41 批次（1 批次產(chǎn)品技術(shù)要求未規(guī)定該性能指標(biāo)，1 批次為已檢測(cè)樣本）。本次抽樣產(chǎn)品準(zhǔn)確度評(píng)價(jià)方法有以下4種。1）相對(duì)偏差，要求不大于± 15.0%，該類(lèi)樣本共37 批，檢測(cè)結(jié)果符合率100%（其中相對(duì)偏差值不大于± 5.0%的產(chǎn)品有30 批次，占比81.08%）；2）回收率，要求應(yīng)為90%～110%，該類(lèi)樣本共1批次，符合率100.00%；3）相關(guān)系數(shù)r，要求應(yīng)不小于0.990 0，該類(lèi)樣本共1 批，符合率100.00%；4）測(cè)定值應(yīng)在質(zhì)控品值范圍內(nèi)，該類(lèi)樣本共2批次，符合率為100.00%。詳見(jiàn)圖4。

圖4 37批次樣本準(zhǔn)確度檢測(cè)結(jié)果分布Fig.4 Results of the accuracy test of 37 batches of samples

精密度：該檢驗(yàn)項(xiàng)目有效樣本數(shù)為43批次。要求精密度變異系數(shù)（CV）應(yīng)不大于5.0%，符合率100.00%；其中CV不大于1.0%的樣本為31批次（72.09%）。詳見(jiàn)圖5。

圖5 43批次樣本精密度檢測(cè)結(jié)果分布Fig.5 Results of the precision test of 43 batches of samples

2.3 貫徹標(biāo)準(zhǔn)（簡(jiǎn)稱(chēng)貫標(biāo)）結(jié)果統(tǒng)計(jì)

統(tǒng)計(jì)企業(yè)產(chǎn)品技術(shù)要求是否嚴(yán)格執(zhí)行行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)或高于行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，若某性能指標(biāo)參數(shù)低于行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)或某一項(xiàng)性能指標(biāo)或檢驗(yàn)方法出錯(cuò)等，均屬于貫標(biāo)不符合。結(jié)果顯示，試劑空白吸光度、準(zhǔn)確度和精密度項(xiàng)目貫標(biāo)符合率分別為97.67%，93.02%，100.00%。本次抽檢產(chǎn)品的說(shuō)明書(shū)和標(biāo)簽均基本符合《醫(yī)療器械說(shuō)明書(shū)和標(biāo)簽管理規(guī)定》的規(guī)定，貫標(biāo)符合率為100.00%。

2.4 探索研究

因抽檢產(chǎn)品性能指標(biāo)差異較大，本次探索研究依據(jù)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，采用尿素、尿酸和總蛋白復(fù)合冰凍人血清國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)各樣本準(zhǔn)確度進(jìn)行評(píng)價(jià)［12-13］。結(jié)果顯示，42 批次抽檢樣本中，有36 批次（85.71%）的相對(duì)偏差在± 15.0% 范圍內(nèi)；有28 批次（66.67%）相對(duì)偏差在±5.0%范圍內(nèi)。詳見(jiàn)圖6。

圖6 合格樣本探索研究結(jié)果分布Fig.6 Results of the exploration research on qualified samples

3 討論

本次國(guó)家抽檢產(chǎn)品尿素測(cè)定試劑盒臨床應(yīng)用廣泛，抽樣難度小，樣品覆蓋率高，業(yè)態(tài)分布廣，能較好地反映現(xiàn)階段該產(chǎn)品的質(zhì)量情況。法定檢驗(yàn)項(xiàng)目為試劑空白吸光度、準(zhǔn)確度和精密度，依據(jù)各企業(yè)產(chǎn)品注冊(cè)標(biāo)準(zhǔn)或產(chǎn)品技術(shù)要求進(jìn)行判斷。在法定檢驗(yàn)基礎(chǔ)上，進(jìn)行了貫標(biāo)統(tǒng)計(jì)分析和探索研究，對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，發(fā)現(xiàn)以下問(wèn)題。

性能指標(biāo)和試驗(yàn)方法不統(tǒng)一：本產(chǎn)品存在行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)及國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品。在技術(shù)指標(biāo)和試驗(yàn)方法上均能較好地對(duì)照，生產(chǎn)企業(yè)可根據(jù)自身產(chǎn)品特點(diǎn)制訂相應(yīng)的性能指標(biāo)，但不得低于國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)要求。同時(shí)企業(yè)應(yīng)動(dòng)態(tài)跟蹤行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)和產(chǎn)品技術(shù)審查指導(dǎo)原則的制修訂情況，實(shí)時(shí)調(diào)整本企業(yè)產(chǎn)品注冊(cè)標(biāo)準(zhǔn)或產(chǎn)品技術(shù)要求?！扼w外診斷試劑注冊(cè)與備案管理辦法》（國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局令第48 號(hào)）第三十四條規(guī)定，“對(duì)于有適用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品的，應(yīng)當(dāng)使用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)試劑進(jìn)行檢驗(yàn)”。中國(guó)食品藥品檢定研究院負(fù)責(zé)組織國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品的制備和標(biāo)定工作，根據(jù)部門(mén)規(guī)章要求，本產(chǎn)品具有國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品，生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)根據(jù)要求選擇國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品來(lái)評(píng)價(jià)產(chǎn)品的準(zhǔn)確度，而不建議利用相關(guān)系數(shù)和質(zhì)控品來(lái)評(píng)估。

產(chǎn)品貫標(biāo)情況有待進(jìn)一步完善：本次抽檢的有效樣品中，有1 批樣品未規(guī)定試劑空白吸光度性能指標(biāo)，有1批樣品未規(guī)定準(zhǔn)確度性能指標(biāo)，此兩指標(biāo)均為產(chǎn)品質(zhì)量的關(guān)鍵性能指標(biāo)。若檢驗(yàn)結(jié)果不合格，將導(dǎo)致臨床結(jié)果偏差較大，從而誤導(dǎo)臨床診斷。

生產(chǎn)企業(yè)臨床溯源體系建設(shè)需加強(qiáng)：通過(guò)探索研究結(jié)果分析發(fā)現(xiàn)，利用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品評(píng)價(jià)各生產(chǎn)企業(yè)的產(chǎn)品，其準(zhǔn)確度達(dá)標(biāo)率僅為85.71%，遠(yuǎn)低于臨床生化產(chǎn)品質(zhì)量的平均水平，也提示各企業(yè)產(chǎn)品檢測(cè)結(jié)果的互換性差。在生產(chǎn)企業(yè)的注冊(cè)產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)和產(chǎn)品技術(shù)要求中還存在用商業(yè)校準(zhǔn)品和商業(yè)質(zhì)控品代替有證參考物質(zhì)的規(guī)定。

結(jié)合本次國(guó)家抽檢情況分析，為提高我國(guó)臨床用尿素檢測(cè)試劑盒質(zhì)量，更好地服務(wù)臨床檢驗(yàn)［14］，建議從以下幾個(gè)方面加強(qiáng)監(jiān)督管理：1）強(qiáng)化企業(yè)主體責(zé)任，須隨時(shí)動(dòng)態(tài)跟蹤國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)和產(chǎn)品技術(shù)審查指導(dǎo)原則的更新情況，并根據(jù)變更后的標(biāo)準(zhǔn)及時(shí)修訂產(chǎn)品執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)。2）企業(yè)在進(jìn)行注冊(cè)檢驗(yàn)或出廠檢驗(yàn)時(shí)，建議采用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品來(lái)評(píng)價(jià)、控制試劑質(zhì)量。國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品溯源鏈可查，標(biāo)示值的不確定度合理，大多經(jīng)過(guò)參考方法或多種方法驗(yàn)證或多個(gè)參考實(shí)驗(yàn)室協(xié)作賦值，其溯源性好，評(píng)價(jià)產(chǎn)品質(zhì)量科學(xué)合理，互換性較好［15］。3）加強(qiáng)體外診斷試劑監(jiān)督檢查力度，可將國(guó)家抽檢和省級(jí)抽檢作為常規(guī)性監(jiān)督管理手段，對(duì)可能出現(xiàn)的風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行預(yù)判，加大抽檢產(chǎn)品不合格企業(yè)的處罰力度，加強(qiáng)臨時(shí)飛行檢查頻次，倒推企業(yè)加大研發(fā)投入，提升產(chǎn)品質(zhì)量。