CYP2C19 基因多態性與急性腦梗死及病灶面積的相關性

龔曉芹，鐘 平

(安徽醫科大學附屬宿州醫院神經內科，安徽 宿州 234000)

近年來，我國每年因腦梗死（cerebral infarction）死亡的人數高達200 萬，其高復發率、高致殘率、高死亡率足以與癌癥比肩[1]。腦梗死的面積是決定患者病情嚴重程度及預后的關鍵因素之一，其中大面積腦梗死占所有腦梗死的3%～15%，且該病發病突然，病情嚴重，即使搶救成功后生活質量仍然低下，是腦卒中較為嚴重的一類[2]。目前已有國內外研究證實CYP2C19 基因多態性與腦梗死的發生、發展有著密切聯系。然而，現階段對于CYP2C19 基因多態性與急性腦梗死病情嚴重程度的關系尚不明確，對此研究也較少。基于此，本研究主要探討CYP2C19基因多態性與急性腦梗死及其病灶面積大小的相關性，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2021 年11 月-2022 年6 月在安徽醫科大學附屬宿州醫院神經內科就診的無血緣關系的漢族患者213 例，根據磁共振表現、臨床表現分為急性腦梗死組（142 例）及對照組（非急性腦梗死組71 例）。對照組納入標準：與急性腦梗死組年齡、性別匹配的，經病史、體格檢查、頭顱CT 和/或頭顱核磁共振均無新發腦梗死的住院患者。排除標準：嚴重心力衰竭、凝血功能障礙、惡性腫瘤、嚴重感染等。將142 例急性腦梗死患者按照梗死面積分為大面積梗死組（直徑≥4 cm）和非大面積梗死組（直徑＜4 cm）。本研究經醫院倫理委員會審核通過，所有患者均知情同意并簽署知情同意書。

1.2 方法 收集兩組人口統計學資料，包括年齡、性別、BMI、個人史、既往史等；常規相關檢查：頭顱MRI、頸動脈彩超；外周血檢查：血糖、血脂；相關量表：ADL 評分。采用CYP2C19 基因芯片檢測系統檢測目的基因和位點突變情況。基因檢測儀購自陜西西安市天隆科技有限公司，試劑盒購自陜西西安市天隆科技有限公司。從EDTA 抗凝管采集血樣（靜脈血，不少于2 ml）送檢，從外周血提取的基因組DNA中檢測CYP2C19 基因型。在該試劑盒中，CYP2C19基因特異性對引物1 和2 通過聚合酶鏈反應擴增，在用生物素標記的擴增產物和固定在醛底物上的CYP2C19 基因類型檢測探針之間進行特異性雜交反應。特異性雜交信號通過酶促顯色反應進行顯色。通過掃描芯片，獲得樣品DNA 擴增產物與每個基因位點的野生型和突變型探針的雜交圖像。通過軟件分析圖像來判斷待測樣品的基因型。

1.3 統計學方法 應用SPSS 26.0 統計學軟件進行數據分析，計量資料以（P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 急性腦梗死組和對照組臨床資料比較 急性腦梗死組血糖、低密度脂蛋白、頸動脈硬化例數高于對照組，ADL 評分低于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05），見表1。

表1 急性腦梗死組和對照組臨床資料比較[（%）,]

表1 急性腦梗死組和對照組臨床資料比較[（%）,]

2.2 急性腦梗死組和對照組CYP2C19 基因型比較CYP2C19 G681A 和G636A 在急性腦梗死組（P＞0.05）；急性腦梗死組與對照組中兩位點GG 型、AG 型、AA 型頻率分布比較，差異無統計學意義（P＞0.05），見表2。

表2 急性腦梗死組和對照組CYP2C19 基因型比較[（%）]

表2 急性腦梗死組和對照組CYP2C19 基因型比較[（%）]

2.3 急性腦梗死組與對照組CYP2C19 基因型及等位基因分布頻率比較 急性腦梗死組與對照組基因型分布均以CYP2C19*1/*1、CYP2C19*1/*2 為主，未檢測出CYP2C19*3/*3 純合突變型，兩組基因型分布頻率比較，差異無統計學意義（P＞0.05）；急性腦梗死組與對照組等位基因分布均以CYP2C19*1、CYP2C19*2 為主，兩組等位基因分布頻率比較，差異無統計學意義（P＞0.05），見表3。

表3 兩組基因型及等位基因分布頻率比較[（%）]

表3 兩組基因型及等位基因分布頻率比較[（%）]

2.4 急性腦梗死不同梗死面積患者基因型和等位基因分布頻率比較 大面積梗死組CYP2C19*1/*1 基因型分布頻率低于非大面積梗死組，差異有統計學意義（P＜0.05）；大面積梗死組CYP2C19*1 等位基因分布頻率低于非大面積梗死組，差異有統計學意義（P＜0.05），見表4。

表4 急性腦梗死不同梗死面積患者基因型和等位基因分布頻率比較[（%）]

表4 急性腦梗死不同梗死面積患者基因型和等位基因分布頻率比較[（%）]

2.5 急性期腦梗死影響因素的Logistic 多因素回歸分析 將是否發生急性腦梗死作為因變量，血糖、低密度脂蛋白、頸動脈彩超、ADL 評分、CYP2C19 基因型作為自變量，采用Logistic 多因素回歸分析，結果顯示，血糖、低密度脂蛋白、頸動脈彩超、ADL 評分是急性腦梗死發病的獨立危險因素，CYP2C19 基因型與急性腦梗死的發病無明顯相關性，見表5。

表5 急性腦梗死影響因素的Logistic 多因素回歸分析

3 討論

目前，已知人類一些基因多態性與腦梗死的遺傳易感性相關[3]。而從分子遺傳學水平解釋腦梗死的發病本質和遺傳規律是國內外腦血管疾病的研究熱點[4]。CYP2C19 基因多態性與腦血管病的發生發展有著密切關系，攜帶CYP2C19 LOF 基因患者較未攜帶CYP2C19 LOF 基因的患者更容易發生血管不良事件[5，6]。有研究顯示[7，8]，CYP2C19 LOF 等位基因攜帶者較非攜帶者卒中風險增加，復合血管事件的發生也更頻繁。其中CYP2C19*2 及CYP2C19*3等位基因功能性缺失可導致一系列的表達產物改變，如酶的功能活性下降、表氧化二十碳三烯酸水平下降，從而激活炎癥反應、微循環發生障礙，導致腦梗死的發生率增加。大面積的腦梗死病因是心源性的栓子脫落，或大動脈的血管狹窄嚴重閉塞。已有研究表明[9，10]，攜帶CYP2C19 LOF 基因的患者發生血栓栓塞事件概率較高，患者攜帶CYP2C19 LOF 基因是產生各類血栓的一大高危因素，也間接導致大面積腦梗死的發生概率增加。另外導致大面積腦梗死的原因在于CYP2C19 基因多態性與氯吡格雷藥效反應的關系，攜帶LOF 基因的患者發生大面積腦梗死的風險較大，可能與遺傳變異導致個體的血小板反應性差異有關[11，12]。CYP2C19 LOF 攜帶者血小板抑制率較低[13]，血小板聚集率增高，導致其形成血栓體積增加，以至于腦梗死病灶面積更大，病情發展更為嚴重。

本研究結果表明，急性腦梗死組與對照組基因型及等位基因分布頻率比較，差異無統計學意義（P＜0.05），表明CYP2C19 基因型與病灶面積大小有一定的相關性，攜帶CYP2C19 LOF 等位基因的患者較未攜帶者患大面積腦梗死的風險更大，與王娜娜等[6]的研究結果基本一致。在臨床工作中，應重視CYP2C19 基因型與病灶面積及病情嚴重程度的關系，對于攜帶CYP2C19 LOF 基因的急性腦梗死患者，需要更加謹慎、持續地觀察患者的療效，及早評估患者出現大面積腦梗死的可能性，降低其病情惡化的風險。因此，有必要采用個體化抗血小板治療來克服氯吡格雷在CYP2C19 LOF 等位基因患者中藥效明顯降低的作用[16]，對于減少心腦血管不良事件及抗血小板治療的管理具有指導意義。

本研究通過Logistic 多因素回歸分析發現，頸動脈粥樣斑塊形成、日常自主活動能力降低、低密度脂蛋白及血糖升高是急性腦梗死發病的獨立危險因素。低密度脂蛋白的升高與急性腦梗死的發病有一定相關性，通過“脂質浸潤學說”可以解釋其原理，這與膽固醇在動脈壁局部聚集、形成粥樣斑塊及動脈狹窄有關，所以血漿中低密度脂蛋白水平是提示心腦血管疾病發病的重要指標[17]，降低低密度脂蛋白的水平被認為是預防心腦血管事件再發的重要治療措施[18]。同時，本研究表明，頸動脈粥樣硬化形成與急性腦梗死的發生的也有相關性，對高危人群進行頸動脈粥樣硬化斑塊及其穩定性的篩查在急性腦梗死的一級預防中具有重要的意義[19]。另外，ADL 評分降低也可能是急性腦梗死發病的一大危險因素，ADL 評分反映患者自主生活活動能力[20]，ADL 評分越低，患者自主活動能力及活動耐受力越差，長期臥床風險越高，由于軀體的重壓和摩擦而引起血液循環不良，血液流速減慢。血液粘滯會加快動脈血管粥樣硬化，引起急性腦梗死的風險增大。最后，血糖升高也是急性腦梗死的一大危險因素，高血糖使血漿處于較高的滲透壓，水分相對較少，血液粘稠度增高，腦梗死風險增加。

本研究存在以下局限性：研究的樣本量較少、選擇偏倚及單中心住院患者。因此，未來還需擴大樣本量，并通過多中心研究來進一步證實該結論，為臨床提供更有力的數據支持。

綜上所述，頸動脈粥樣斑塊形成、日常自主活動能力降低、低密度脂蛋白及血糖升高都是導致急性腦梗死的危險因素，對于急性腦梗死患者，建議常規行CYP2C19 基因多態性檢測，若為CYP2C19 LOF基因攜帶者，則大面積腦梗死的風險較大，臨床應重視對此類患者的監測。