泰拉霉素注射液分別配合補(bǔ)鐵劑、豬瘟疫苗使用對(duì)仔豬補(bǔ)鐵和免疫效果的影響研究

常洪濤，劉貴軍，魏欽帥，杜季梅 ，趙莉，郭占達(dá)*，于高水*

（1.河南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院 鄭州 450002；2.山東魯抗醫(yī)藥股份有限公司 山東濟(jì)寧 272000；3.河南省大河農(nóng)畜牧科技有限公司 鄭州 450002）

泰拉霉素（Tulathromycin）是一種半合成的大環(huán)內(nèi)酯類動(dòng)物專用長(zhǎng)效抗生素，肌注后以吸收迅速、生物利用度極高為特點(diǎn)，且在血漿中消除半衰期較長(zhǎng)（60～140 h），組織浸潤(rùn)范圍相對(duì)廣泛，尤其以藥物在肺組織高度蓄積為特征，藥效持久，單次肌注給藥即可供全程防治[1]，故在養(yǎng)豬生產(chǎn)中多應(yīng)用于產(chǎn)房（3 日齡給藥）、斷奶前（21～28 日齡給藥）以及保育豬等關(guān)鍵階段，可大幅降低死淘率并能顯著提高生產(chǎn)性能。

豬的胎盤鐵儲(chǔ)量有限，胚胎往往發(fā)育不足，為了補(bǔ)償這種不足，出生后60 d 內(nèi)生長(zhǎng)發(fā)育迅速，生長(zhǎng)強(qiáng)度極大，而高強(qiáng)度的生長(zhǎng)則需要旺盛的物質(zhì)代謝為基礎(chǔ)，強(qiáng)烈的細(xì)胞分化和組織器官發(fā)育過程，使得仔豬對(duì)鐵的需求量巨大[2]。新生仔豬唯一的鐵來源就是母乳，而母乳含鐵量較少，每頭新生仔豬通過母乳獲得的鐵量?jī)H為1～2 mg/d，遠(yuǎn)遠(yuǎn)無法滿足其生長(zhǎng)需求，因此仔豬出生后3 日齡內(nèi)需要進(jìn)行補(bǔ)鐵操作，這與泰拉霉素產(chǎn)房仔豬保健給藥的時(shí)間節(jié)點(diǎn)基本一致。

豬瘟（Classical Swine Fever，CSF）是由豬瘟病毒引起的一種高度接觸性熱性傳染病，以出血和發(fā)熱為主要特征，并可引起妊娠母豬流產(chǎn)、胎兒畸變、慢性營(yíng)養(yǎng)性消耗、淋巴細(xì)胞和血小板減少等免疫系統(tǒng)受損、繼發(fā)或并發(fā)細(xì)菌或其他病毒感染等臨床表現(xiàn)，對(duì)豬危害性極大[3]，免疫疫苗是防控該病最有效、最經(jīng)濟(jì)和最簡(jiǎn)便的方法。由于仔豬體內(nèi)母源抗體的半衰期僅為14d 左右，因此國(guó)內(nèi)大多數(shù)豬場(chǎng)將首免日齡定于21～28 日齡，這與泰拉霉素?cái)嗄糖氨＝〗o藥的時(shí)間節(jié)點(diǎn)非常接近。

因此，為降低勞動(dòng)強(qiáng)度，減少抓豬應(yīng)激和注射次數(shù)，盡可能避免非瘟等直接接觸性疾病的感染幾率，本研究擬分別開展泰拉霉素注射液與補(bǔ)鐵劑、豬瘟疫苗混合應(yīng)用試驗(yàn)，以達(dá)到新生仔豬一針兩防（防細(xì)菌性感染、防貧血）和斷奶前仔豬一針兩防（防細(xì)菌性感染、防豬瘟）目的，從而為獸醫(yī)臨床推廣提供更為豐富的科學(xué)依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 藥物和疫苗

10%泰拉霉素注射液（泰立達(dá)）由山東魯抗舍里樂藥業(yè)有限公司研發(fā)和提供，是國(guó)內(nèi)首家獲農(nóng)業(yè)農(nóng)村部評(píng)審批準(zhǔn)的泰拉霉素注射液；豬用補(bǔ)鐵劑購(gòu)自廣西化工研究院有限公司獸藥廠；豬瘟疫苗購(gòu)自廣東永順生物制藥有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

49 頭3 日齡仔豬，由禾豐食品股份有限公司提供，按窩隨機(jī)分組，用于泰拉霉素與補(bǔ)鐵劑混合應(yīng)用試驗(yàn)；40 頭21 日齡仔豬，由義馬市畜牧養(yǎng)殖培育中心提供，用于泰拉霉素與豬瘟疫苗混合應(yīng)用試驗(yàn)。

1.3 儀器與檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)

邁瑞獸用全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀（型號(hào)：BC-2800vet），由武漢賽維爾生物科技有限公司提供；熒光定量PCR 儀由河南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物疫病檢測(cè)中心提供，豬瘟疫苗熒光定量PCR 方法參考GB/T 27540—2011 標(biāo)準(zhǔn)。

1.4 方法

1）與補(bǔ)鐵劑合用試驗(yàn)。將49 頭試驗(yàn)豬隨機(jī)分組，具體分組情況見表1。先將1 mL 泰立達(dá)和9 mL 補(bǔ)鐵劑配制成10 mL 混合注射液，3 日齡注射，1 mL/頭；同時(shí)設(shè)立進(jìn)口產(chǎn)品+補(bǔ)鐵劑組、泰立達(dá)組、補(bǔ)鐵劑組和空白對(duì)照組，均在3 日齡注射，1 mL/頭。各組均在10 日齡采集抗凝血，5 mL/頭，4 ℃保存后，加冰塊送至武漢賽維爾生物科技有限公司檢測(cè)血常規(guī)項(xiàng)目。

表1 泰立達(dá)配合使用補(bǔ)鐵劑對(duì)初生仔豬混合注射試驗(yàn)情況

2）干擾性驗(yàn)證試驗(yàn)。先將豬瘟疫苗稀釋至2 mL/頭份，再將不同劑量（0.1、0.5 和1 mL）的泰立達(dá)與2 mL 豬瘟疫苗混合分別作用5、30、60 和120 min，具體分組見表2，再用熒光定量PCR 方法測(cè)定各組豬瘟疫苗效價(jià)。

表2 泰立達(dá)與豬瘟疫苗混合后的干擾性驗(yàn)證試驗(yàn)

3）臨床免疫試驗(yàn)。將0.1mL 泰立達(dá)與1 頭份豬瘟疫苗在室溫下混合，隨后免疫21 日齡仔豬，3 周后采血測(cè)定豬瘟疫苗免疫效果，同時(shí)設(shè)定豬瘟疫苗正常免疫對(duì)照組，具體分組見表3。

表3 泰立達(dá)與豬瘟疫苗混合后的臨床免疫試驗(yàn)

2 結(jié)果

2.1 與補(bǔ)鐵劑合用試驗(yàn)

各組選擇2 頭試驗(yàn)豬采集抗凝全血，經(jīng)獸用全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀做血常規(guī)分析，其血紅蛋白結(jié)果分別是：泰立達(dá)+補(bǔ)鐵劑組是109 和112 g/L、進(jìn)口產(chǎn)品+補(bǔ)鐵劑組是110 和102 g/L、泰立達(dá)組是60 和64 g/L、補(bǔ)鐵劑組是108 和116 g/L 和空白對(duì)照組是53 和57 g/L。結(jié)果顯示，與單獨(dú)使用補(bǔ)鐵劑組和進(jìn)口產(chǎn)品組+補(bǔ)鐵劑組測(cè)定結(jié)果相比，泰立達(dá)+補(bǔ)鐵劑組差異并不顯著；泰立達(dá)組和空白對(duì)照組由于未補(bǔ)鐵制劑，均處于重度貧血狀態(tài)。

2.2 干擾性驗(yàn)證試驗(yàn)

結(jié)果見圖1、圖2 和表4，可見不同劑量（0.1、0.5 和1 mL）的泰立達(dá)與2 mL 豬瘟疫苗混合分別作用5、30、60 和120 min 后，各組豬瘟疫苗效價(jià)基本沒有影響。

圖1 各樣品擴(kuò)增曲線

圖2 標(biāo)準(zhǔn)曲線

表4 泰立達(dá)與豬瘟疫苗混合后的干擾性驗(yàn)證試驗(yàn)

2.3 臨床免疫試驗(yàn)

結(jié)果見表5，可見泰立達(dá)+豬瘟疫苗組抗體合格率為55%，而豬瘟疫苗正常免疫組的抗體合格率為50%，兩組差異不顯著。

表5 泰立達(dá)與豬瘟疫苗混合后的臨床免疫試驗(yàn)

3 討論

產(chǎn)房新生仔豬抵抗力較弱，加之生產(chǎn)環(huán)節(jié)中存在斷臍、剪牙、斷尾等致創(chuàng)性工作，極易造成嚴(yán)重的細(xì)菌感染，使得"三針保健"是現(xiàn)階段養(yǎng)豬行業(yè)非常流行和有效的保健方式，其核心原則是要選擇長(zhǎng)效抗生素，以泰立達(dá)為代表的泰拉霉素?zé)o疑是最佳選擇，使用15 min 左右即可至最大血藥濃度、24 h 達(dá)到肺部最大濃度，1 次注射藥效維持15 d，各項(xiàng)指標(biāo)遠(yuǎn)超當(dāng)前廣泛應(yīng)用的長(zhǎng)效土霉素和頭孢類藥物。研究表明，新生仔豬每日約需7～16 mg 鐵才能保證正常的生長(zhǎng)發(fā)育，但出生時(shí)自身儲(chǔ)備鐵約為50 mg 左右，母乳日供量?jī)H供1～2 mg，因此國(guó)內(nèi)豬場(chǎng)對(duì)仔豬多為3 日齡補(bǔ)鐵，這恰與產(chǎn)房3 日齡給藥泰拉霉素的時(shí)間節(jié)點(diǎn)完全一致。本研究結(jié)果表明，3 日齡將泰立達(dá)和補(bǔ)鐵劑混合注射后，其血紅蛋白值與單獨(dú)使用補(bǔ)鐵劑組的血紅蛋白值基本一致，與同類進(jìn)口產(chǎn)品組相比，差異也不顯著，說明泰立達(dá)與補(bǔ)鐵劑合用絲毫不會(huì)影響補(bǔ)鐵效果。

由于保育仔豬自身免疫機(jī)能尚未發(fā)育完善，再加上斷奶后又失去了包括豬瘟在內(nèi)的大多數(shù)重要疫病母源抗體的保護(hù)，所以保育階段是整個(gè)生產(chǎn)流程中公認(rèn)的最難飼養(yǎng)的環(huán)節(jié)[4]。為了順利讓仔豬度過保育期，需要在母源抗體失去前通過免疫致使自身產(chǎn)生足夠的免疫保護(hù)，如豬瘟疫苗免疫程序多制定于21～28 日齡首免。斷奶是豬一生中最大的應(yīng)激事件之一，由營(yíng)養(yǎng)應(yīng)激、心理應(yīng)激、環(huán)境應(yīng)激和疾病應(yīng)激等疊加形成，常給仔豬的抗病力方面造成極大影響，容易導(dǎo)致細(xì)菌性呼吸道、腹瀉類疾病，生長(zhǎng)速度減慢，成活率顯著下降，一旦處理不當(dāng)將會(huì)嚴(yán)重影響整個(gè)豬場(chǎng)的經(jīng)濟(jì)效益[5]。斷奶前后仔豬的采食量差異較大、難以確定，消化道給藥的方式雖然簡(jiǎn)單但不精確，防治疾病效果較差。而選擇速效、長(zhǎng)效藥物通過注射給藥，藥量確實(shí)，效果確切，完全可幫助仔豬適應(yīng)斷奶應(yīng)激，減少疾病發(fā)生。目前國(guó)內(nèi)斷奶前給藥多集中于斷奶前1 周左右，這一時(shí)間節(jié)點(diǎn)與產(chǎn)房豬瘟疫苗首免日齡高度重合。本研究發(fā)現(xiàn)，將不同劑量的泰立達(dá)與豬瘟疫苗混合后的疫苗效價(jià)基本沒有影響，混合免疫后3 周測(cè)定豬瘟抗體合格率略高于而豬瘟疫苗正常免疫組，但差異不顯著。研究結(jié)果表明，泰立達(dá)在和豬瘟疫苗聯(lián)合使用時(shí)，對(duì)其在豬體內(nèi)、外均不存在干擾現(xiàn)象。

綜上，將泰拉霉素注射液泰立達(dá)分別與補(bǔ)鐵劑、豬瘟疫苗混合應(yīng)用時(shí)，完全可以達(dá)到新生仔豬一針兩防（防細(xì)菌性感染、防貧血）和斷奶前仔豬一針兩防（防細(xì)菌性感染、防豬瘟）目的，可有效減少勞動(dòng)強(qiáng)度、抓豬次數(shù)及注射應(yīng)激，降低非瘟等直接接觸性疾病的感染幾率，值得臨床中大力推廣。